MAB351
Anti-Glutamatdecarboxylase-Antikörper, 65-kDa-Isoform, Klon GAD-6
clone GAD-6, Chemicon®, from mouse
Synonym(e):
GAD65
Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
Alle Fotos(2)
About This Item
UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
mouse
Qualitätsniveau
Antikörperform
purified immunoglobulin
Antikörper-Produkttyp
primary antibodies
Klon
GAD-6, monoclonal
Speziesreaktivität
rat, human
Hersteller/Markenname
Chemicon®
Methode(n)
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
Isotyp
IgG2a
NCBI-Hinterlegungsnummer
UniProt-Hinterlegungsnummer
Versandbedingung
dry ice
Posttranslationale Modifikation Target
unmodified
Angaben zum Gen
human ... GAD2(2572)
Allgemeine Beschreibung
Glutamat-Decarboxylase (GAD; E.C. 4.1.1.15) ist ein Enzym, das für die Umwandlung von Glutaminsäure in Gamma-Aminobuttersäure (GABA), dem wichtigsten inhibitorischen Transmitter in höheren Hirnregionen und Hemmer des mutmaßlichen parakrinen Hormons in Langerhans-Inseln, verantwortlich ist. Zwei molekulare Formen von GAD (65 kDa und 67 kDa, 64 % AS-Identität zwischen Formen) sind hoch-konserviert und beide Formen werden im ZNS, den Langerhans-Inselzellen, Hoden, Eileitern und Eierstöcken exprimiert. Die Isoformen sind zytoplasmatisch und bereichsweise im Gehirn von Ratten und Mäusen verteilt (Sheikh, S. et al. 1999). Bei GAD65 handelt es sich um ein amphiphiles, membranverankertes Protein (AS 585), das auf dem menschlichen Chromosom 10 kodiert wird und für die vesikuläre GABA-Bildung verantwortlich ist. GAD67 ist zytoplasmatisch (594 a.a.), wird auf dem Chromosom 2 kodiert und scheint zu einem beträchtlichen Teil für die zytoplasmatische GABA-Bildung verantwortlich zu sein. Während der neuronalen Entwicklung ändert sich die GAD-Expression im Rückenmark von Ratten. GAD65 wird transient in Kommissuralaxonen um E13 herum exprimiert, jedoch am nächsten Tag herunterreguliert, während sich die Expression von GAD67 in den Somata dieser Neuronen größtenteils erhöht (Phelps, P. et al. 1999). Bei der voll entwickelten Bauchspeicheldrüse von Ratten scheinen GAD65 und GAD67 unterschiedlich lokalisiert zu sein, GAD65 hauptsächlich in Insulin enthaltenden Beta-Zellen und GAD67 in Glucagon enthaltenden (A) Zellen (Li, L. et al. 1995). Die GAD67-Expression scheint vor allem plastisch zu sein und kann sich als Reaktion auf experimentelle Manipulationen (zum Beispiel durch neuronale Stimulation oder Durchtrennung) oder Krankheitsprogression und auftretende Störungen wie Schizophrenie ändern (Volk et al., 2000). Die Kolokalisierung der beiden GAD-Isoforme zeigt ebenfalls Änderungen bei der GAD65/GAD67-Verteilung, die mit bestimmten Krankheitsstadien wie IDDM und SMS zusammenhängen.
Spezifität
Erkennt die Isoform mit dem geringeren Molekulargewicht der beiden im Gehirn identifizierten GAD-Isoformen (Gottlieb, et al., 1986; Chang & Gottlieb, 1988). Dieser monoklonale Antikörper kann für die immunhistochemische Lokalisierung in Gehirn oder Pankreas verwendet werden. Anti-GAD wurde auch zur Markierung von aufgereinigter GAD in Western Blots verwendet (Chang & Gottlieb, 1988).
Immunogen
Aufgereinigte Glutamat-Decarboxylase aus Rattenhirn.
Anwendung
Anti-GAD-Antikörper. 65 kDa Isoform, Klon GAD-6, weist den Gehalt an Glutamatdecarboxylase nach und wurde zur Verwendung in IH und WB in Publikationen beschrieben und validiert.
Forschungskategorie
Neurowissenschaft
Neurowissenschaft
Forschungsunterkategorie
Neurotransmitter und Rezeptoren
Neurotransmitter und Rezeptoren
Immunhistochemie: (1 μg/ml * siehe Protokoll)
Western Blot
Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.
ANWENDUNGSHINWEISE FÜR MAB351
IMMUNHISTOCHEMIE
1) Ratten mit 100 mmol/l Phosphatpuffer, pH 7,4 mit 1 % Paraformaldehyd, 0,34 % L-Lysin und 0,05 % m-Periodat (1 % PLP) perfundieren.
2) Gehirne 1 bis 2 Stunden lang in 1 % PLP einlegen.
3) Gehirne in 100 mmol/l Phosphatpuffer mit 30 % Saccharose überführen und auf einem Schüttler bei +4 °C 48 bis 60 Stunden lang vorsichtig schütteln.
4) Schneiden Sie mit einem Schlittenmikrotom 30 mm lange Schnitte aus dem gefrorenen Kleinhirn. Sammeln Sie die Schnitte nach dem Schneiden in einem Fläschchen mit 100 mmol/l kaltem Phosphatpuffer.
5) Inkubieren Sie die Schnitte 30 Minuten lang in PBS mit 1,5 % normalem Serum und 0,2 % Triton X-100.
6) Inkubieren Sie die Schnitte auf einem Schüttler bei +4 °C 12 bis 36 Stunden lang in MAB351 (verdünnt mit 1 μg/ml in PBS mit 1,5 % normalem Serum und 0,2 % Triton X-100).
7) Spülen Sie die Schnitte auf einem Schüttler achtmal 10 bis 15 Minuten lang pro Spülung in PBS.
8) Führen Sie den Nachweis mit einem Standard-Sekundärantikörper-Detektionssystem (PAP, ABC usw.) durch.
9) Tragen Sie die Schnitte auf, dehydrieren Sie sie und bringen Sie Deckgläser an.
Western Blot
Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.
ANWENDUNGSHINWEISE FÜR MAB351
IMMUNHISTOCHEMIE
1) Ratten mit 100 mmol/l Phosphatpuffer, pH 7,4 mit 1 % Paraformaldehyd, 0,34 % L-Lysin und 0,05 % m-Periodat (1 % PLP) perfundieren.
2) Gehirne 1 bis 2 Stunden lang in 1 % PLP einlegen.
3) Gehirne in 100 mmol/l Phosphatpuffer mit 30 % Saccharose überführen und auf einem Schüttler bei +4 °C 48 bis 60 Stunden lang vorsichtig schütteln.
4) Schneiden Sie mit einem Schlittenmikrotom 30 mm lange Schnitte aus dem gefrorenen Kleinhirn. Sammeln Sie die Schnitte nach dem Schneiden in einem Fläschchen mit 100 mmol/l kaltem Phosphatpuffer.
5) Inkubieren Sie die Schnitte 30 Minuten lang in PBS mit 1,5 % normalem Serum und 0,2 % Triton X-100.
6) Inkubieren Sie die Schnitte auf einem Schüttler bei +4 °C 12 bis 36 Stunden lang in MAB351 (verdünnt mit 1 μg/ml in PBS mit 1,5 % normalem Serum und 0,2 % Triton X-100).
7) Spülen Sie die Schnitte auf einem Schüttler achtmal 10 bis 15 Minuten lang pro Spülung in PBS.
8) Führen Sie den Nachweis mit einem Standard-Sekundärantikörper-Detektionssystem (PAP, ABC usw.) durch.
9) Tragen Sie die Schnitte auf, dehydrieren Sie sie und bringen Sie Deckgläser an.
Zielbeschreibung
65 kDa
Physikalische Form
Aufgereinigtes Immunglobulin. Lyophilisiert aus 10 mmol/l Natriumphosphatpuffer, 70 mmol/l Natriumchlorid, pH 7,4, 0,02 % Natriumazid. Mit 100 μl sterilem Wasser (1 mg/ml) rekonstituieren.
Format: Aufgereinigt
Mit Protein A aufgereinigt
Lagerung und Haltbarkeit
Das lyophilisierte Material ist bei -20 °C bis zu 12 Monate haltbar. Nach der Rekonstitution bei -20 °C gefroren in unverdünnten Aliquoten bis zu 6 Monate haltbar. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.
Hinweis zur Analyse
Kontrolle
Rattenhirngewebe
humanes Hirnlysat
Rattenhirngewebe
humanes Hirnlysat
Sonstige Hinweise
Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.
Rechtliche Hinweise
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Haftungsausschluss
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Empfehlung
Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben
Signalwort
Warning
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3
Lagerklassenschlüssel
13 - Non Combustible Solids
WGK
WGK 3
Flammpunkt (°F)
Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
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Differential activation of neuronal cell types in the basolateral amygdala by corticotropin releasing factor.
Rostkowski, AB; Leitermann, RJ; Urban, JH
Neuropeptides null
Synaptic reorganisation of the medial amygdala during puberty.
Cooke BM
Journal of Neuroendocrinology null
Thalamocortical dysfunction and thalamic injury after asphyxial cardiac arrest in developing rats.
Shoykhet, M; Simons, DJ; Alexander, H; Hosler, C; Kochanek, PM; Clark, RS
The Journal of Neuroscience null
Quantitative effects produced by modifications of neuronal activity on the size of GABAA receptor clusters in hippocampal slice cultures.
Serge Marty, Rosine Wehrle, Jean-Marc Fritschy, Constantino Sotelo
The European Journal of Neuroscience null
Quantitative analysis of ER alpha and GAD colocalization in the hippocampus of the adult female rat.
S A Hart, J D Patton, C S Woolley, S A Hart, J D Patton, C S Woolley
The Journal of Comparative Neurology null
Unser Team von Wissenschaftlern verfügt über Erfahrung in allen Forschungsbereichen einschließlich Life Science, Materialwissenschaften, chemischer Synthese, Chromatographie, Analytik und vielen mehr..
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