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MAB345M

Sigma-Aldrich

Anti-O4-Antikörper, Klon 81

clone 81 (mAB O4), Chemicon®, from mouse

Synonym(e):

Sulfatide

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

Biologische Quelle

mouse

Qualitätsniveau

100
300

Antikörperform

purified immunoglobulin

Antikörper-Produkttyp

primary antibodies

Klon

81 (mAB O4), monoclonal

Speziesreaktivität

rat, mouse, human, chicken

Hersteller/Markenname

Chemicon®

Methode(n)

immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable

Isotyp

IgM

Eignung

not suitable for Western blot
not suitable for immunoprecipitation

Versandbedingung

wet ice

Posttranslationale Modifikation Target

unmodified

Spezifität

Erkennt den Oligodendrozyten-Marker O4. Reagiert auch mit bestimmten Galaktolipiden in Spermien (Liste siehe Zusatzinformationsbibliothek).

Anwendung

Anti-O4-Antikörper, Klon 81, ist ein Antikörper gegen O4 zur Verwendung in IC, IH mit mehr als 50 Produktzitaten.
Immunhistochemie: 10–20 μg/mL auf unfixiertem, schockgefrorenem Gewebe.

Immunzytochemie: 10–20 μg/mL auf Zellen, die mit 4 % Paraformaldehyd fixiert wurden.

Hinweis: O4 ist ein Sulfatid, das mit organischen Lösungsmitteln aus der Membran herausgelöst werden kann; Aceton und Methanol sollten nicht zur Fixierung verwendet werden.

Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Anwender bestimmt werden.

Immunhistochemie-Protokoll

1. Schnitte aus unfixiertem, schockgefrorenem Gewebe vorbereiten. Die Schnitte sollten 4–5 μm dick sein. Die Schnitte auf Objektträger legen.

2. Die einzelnen Objektträger drei Mal jeweils 5 Minuten lang bei Raumtemperatur in PBS reinigen.

3. Die unspezifischen Bindungsstellen blockieren. Dazu die Schnitte in einer feuchten Kammer mit 5 % FCS bei Raumtemperatur 30 Minuten lang inkubieren.

4. Die Objektträger wie in Schritt 2 beschrieben reinigen.

5. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge MAB345 (10–20 μg/mL in PBS) bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37 °C inkubieren.

6. Die Objektträger drei Mal kurz mit PBS reinigen. Sorgfältig um den zu färbenden Bereich herum abtrocknen.

7. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge Anti-Maus-IgM-Fluorescein*-Lösung bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37°C inkubieren.

8. Die Objektträger wie in Schritt 6 beschrieben reinigen.

9. Die Schnitte mit einem geeigneten Einbettmedium bedecken, mit einem Deckglas abdecken und fluoreszenzmikroskopisch untersuchen.



*Es kann auch HRP oder ABC verwendet werden.



Optimale Ergebnisse können durch Titrierung der primären und sekundären Antikörper erzielt werden



Immunzytochemie



1. Die Präparate mit 4 % Paraformaldehyd (in PBS) 10 Minuten lang bei Raumtemperatur fixieren. O4 ist ein Sulfatid, das mit organischen Lösungsmitteln aus der Membran herausgelöst werden kann; Aceton und Methanol sollten nicht zur Fixierung verwendet werden.

2. Die einzelnen Objektträger drei Mal jeweils 5 Minuten lang bei Raumtemperatur in PBS reinigen.

3. Die unspezifischen Bindungsstellen blockieren. Dazu die Schnitte in einer feuchten Kammer mit 5 % FCS bei Raumtemperatur 30 Minuten lang inkubieren.

4. Die Objektträger wie in Schritt 2 beschrieben reinigen.

5. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge MAB345 (10–20 μg/mL in PBS) bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37 °C inkubieren.

6. Die Objektträger drei Mal kurz mit PBS reinigen. Sorgfältig um den zu färbenden Bereich herum abtrocknen.

7. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge Anti-Maus-IgM-Fluorescein*-Lösung bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37°C inkubieren.

8. Die Objektträger wie in Schritt 6 beschrieben reinigen.

9. Die Schnitte mit einem geeigneten Einbettmedium bedecken, mit einem Deckglas abdecken und fluoreszenzmikroskopisch untersuchen.



Hinweis: Die Präparate während der Färbung nicht austrocknen lassen.

Physikalische Form

Aufgereinigtes Immunglobulin in 0,05 M Kaliumphosphatpuffer, pH 8,0, mit 0,3 M NaCl und 0,05 % Natriumazid.
Format: Aufgereinigt

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Kortikale Stammzellen der Ratte oder Zellkulturen des Gehirns von Mausembryonen von Tag 3

Sonstige Hinweise

Konzentration: Unterschiedlich, siehe chargenspezifisches Analysezertifikat

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 2


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Unique astrocyte ribbon in adult human brain contains neural stem cells but lacks chain migration.
Sanai, Nader, et al.
Nature, 427, 740-744 (2004)
Distinct neural precursors in the developing human spinal cord.
Walder, S; Ferretti, P
International Journal of Developmental Biology null
Differentiated human neural stem cells: a new ex vivo model to study HHV-6 infection of the central nervous system.
Lidia De Filippis, Chiara Foglieni, Sara Silva, Angelo L Vescovi, Paolo Lusso, Mauro S Malnati
Journal of Clinical Virology null
Marc-André Mouthon et al.
Journal of neurochemistry, 99(3), 807-817 (2006-08-24)
Developing and adult forebrains contain neural stem cells (NSCs) but no marker is available to highly purify them. When analysed by flow cytometry, stem cells from various tissues are enriched in a 'side population' (SP) characterized by the exclusion of
Thyroid hormone activates oligodendrocyte precursors and increases a myelin-forming protein and NGF content in the spinal cord during experimental allergic encephalomyelitis.
Calza, L; Fernandez, M; Giuliani, A; Aloe, L; Giardino, L
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA null

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