ABE1462

Anti-phospho LSD1 (Ser 112)-Antikörper

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Synonym(e): Lysine-specific histone demethylase 1A, Ser 112 phosphorylated, BRAF35-HDAC complex protein BHC110, Ser 112 phosphorylated, Flavin-containing amine oxidase domain-containing protein 2, Ser 112 phosphorylated
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rabbit
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: affinity isolated antibody
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: polyclonal
• Aufgereinigt durch: affinity chromatography
• Speziesreaktivität: human, mouse
• Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie): rat (based on 100% sequence homology), porcine (based on 100% sequence homology), zebrafish (based on 100% sequence homology), rhesus macaque (based on 100% sequence homology)
• Methode(n): dot blot: suitable; western blot: suitable
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_598633
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q6ZQ88
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: phosphorylation (pSer112 )
• Angaben zum Gen: human ... KDM1A(23028)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die Lysin-spezifische Histondemethylase 1A (UniProt Q6ZQ88; auch bekannt als BRAF35-HDAC-Komplexprotein BHC110, Flavin-haltiges Aminooxidase Domäne-haltiges Protein 2) wird bei Mäusen durch das Gen Kdm1a (auch bekannt als Aof2, Kiaa0601, Lsd1) kodiert (Gen-ID: 99982). Die FAD+-abhängige, Lysin-spezifische Demethylase (LSD) LSD1 ist eine Komponente der REST-Corepressor-Komplexe (CoREST), die die Genunterdrückung vermitteln, indem sie die Demethylierung von mono- und di-methyliertem Histon H3 Lys4 (H3K4me1/2) katalysieren. LSD1 ist durch die Demethylierung von H3K9me1/2 auch an der Genaktivierung im Zusammenhang mit Kernrezeptoren beteiligt. Darüber hinaus ist bekannt, dass LSD1 auch Nicht-Histon-Substrate wie p53 und Dnmt1 demethyliert. Es wird berichtet, dass LSD1 durch PKCalpha an Ser112 phosphoryliert wird und dadurch die von PKCalpha-Signalen abhängige Regulierung der zirkadianen Uhr vermittelt. Die Ser112-Phosphorylierung induziert die Interaktion von LSD1 mit CLOCK:BMAL1 und erleichtert die E-Box-abhängige Transkriptionsaktivierung. Knockin-Mäuse, die LSD1(SA/SA)-Allele tragen, die für die phosphorylierungsdefiziente S112A-LSD1-Mutante kodieren, zeigen veränderte zirkadiane Rhythmen im Bewegungsverhalten mit einer abgeschwächten rhythmischen Expression zentraler Uhrengene und einer gestörten Phasenumstellung der zirkadianen Uhr.

Spezifität

Die Bezeichnung Ser112 basiert auf der KDM1A/LSD1-Sequenz der Maus (UniProt Q6ZQ88). Das murine Ser112 entspricht dem menschlichen Ser111 und dem Ser106 der Ratte (UniProt O60341 & F1MA31). Die Spezifität dieses polyklonalen Antikörpers wurde durch Dot-Blot-Analysen mit dem immunogenen Peptid und dem entsprechenden nicht phosphorylierten Peptid sowie durch Western-Blotting-Analysen der PMA-induzierten Zielphosphorylierung bestätigt, wobei eine Lambda-Phosphatase-Behandlung des Zelllysats vor dem Western Blotting den Nachweis der Zielbande vollständig aufhob (Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53: 791-805).

Immunogen

Epitop: pSer112.

Lineares Peptid, das einer LSD1-Sequenz der Maus entspricht, die das phosphorylierte Ser112 enthält.

Anwendung

Anti-phospho LSD1 (Ser 112)-Antikörper ist ein Antikörper gegen phospho LSD1 (Ser 112) zur Verwendung im Western Blotting, Dot Blot.

Dot-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies das immunogene Peptid mit phosphoryliertem Ser112 (entspricht menschlichem pSer111) nach, nicht aber das entsprechende Peptid mit nicht phosphoryliertem Ser112 (Nam, H.J., et al. (2014)). Mol. Cell 53: 791-805).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies die Phosphorylierungsinduktion von exogen exprimiertem menschlichem LSD1 nach PMA-Behandlung von HEK293T-Transfektanten, die 24 Stunden lang hungerten, nach. Phosphoryliertes LSD1 wurde in der nukleären, aber nicht in der zytosolischen Fraktion nachgewiesen, und die gleichzeitige Behandlung mit dem PKC-Inhibitor Go 6976 (Best.-Nr. 365250) verhinderte die PMA-induzierte LSD1-Phosphorylierung (Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53: 791-805).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies eine zeitabhängige LSD1-Phosphorylierung in Leberextrakten von Mäusen nach, die in einem ständigen Dunkelheitszyklus (DD) gehalten wurden. Kernextrakte aus MEFs zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Induktion der zirkadianen Gentranskription durch Dexamethason-Behandlung zeigten ebenfalls eine zirkadian-ähnliche Oszillation der LSD1-Phosphorylierungsmenge (Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53: 791-805).

Qualität

Beurteilt mittels Western Blot in menschlichem LSD1-überexprimierendem HEK293T-Zelllysat.

Western-Blot-Analyse: Eine 1:500-Verdünnung dieses Antikörpers wies die PMA-induzierte Phosphorylierung von exogen exprimiertem menschlichem LSD1 in 24 Stunden hungernden HEK293T-Transfektanten nach. Durch die Behandlung der Membran mit Lambda-Phosphatase vor der Antikörperuntersuchung wurde der Nachweis der Zielbande vollständig aufgehoben.

Zielbeschreibung

~ 115 kDa beobachtet. 92,90/95,16 kDa (menschliche Isoform 1/2), 92,85 kDa (Maus) und 94,60 kDa (Ratte) berechnet. In manchen Lysaten können uncharakterisierte Banden auftreten.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable