AB1783

Glialer Anti-Glutamat-Transporter-Antikörper

serum, Chemicon^®

• Synonym(e): GLT-1, EAAT2
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: guinea pig
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: serum
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: polyclonal
• Speziesreaktivität: human, mouse, rat
• Hersteller/Markenname: Chemicon^®
• Methode(n): immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry: suitable (paraffin); western blot: suitable
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NM_004171.3
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P43004
• Versandbedingung: dry ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... SLC1A2(6506)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Glutamat-Ttransporter (GluT) entfernen L-Glutamat (Glu), den primären exzitatorischen Neurotransmitter im zentralen Nervensystem (ZNS) von Säugern, aus dem synaptischen Spalt. Durch ein derartiges Säubern der Synapse kann Glu für eine spätere Wiederverwendung recycelt, der korrekte Diffusionsgradient beibehalten und eine Excitotoxizität verhindert werden. Es liegen Berichte über viele verschiedene Mitglieder einer GluT-Multigenfamilie vor: GLT1, GLAST, EAAC1 und EAAT2. mRNA wurde für jedes dieser Proteine im Gehirn festgestellt.

EAAT2 transportiert L-Glutamat sowie L- und D-Aspartat. Es ist für die Beendigung der postsynaptischen Wirkung von Glutamat durch ein schnelles Entfernen des freigesetzten Glutamats aus dem synaptischen Spalt von essenzieller Bedeutung. Wirkt durch den Cotransport von Natrium als Symport.

Spezifität

Glialer Glutamat-Transporter GLT-1 (EAAT2). Der Antikörper wurde am Gewebe des zentralen Nervensystems getestet. Die Präabsorption des Antiserums mit dem immunogenen Peptid (Katalognummer AG391) entfernt die gesamte Immunfärbung.

Immunogen

Epitop: C-Terminus

Synthetisches Peptid vom Carboxy-Terminus von Ratten GLT-1.

Anwendung

Forschungskategorie
Neurowissenschaft

Forschungsunterkategorie
Ionenkanäle & Transporter

Mit diesem glialen Anti-Glutamat-Transporter-Antikörper, der für die Verwendung in IH(P), IF und WB validiert wurde, kann ein Glutamat-Transporter nachgewiesen werden.

Mittels Western Blot an Mäusehirn-Membranlysaten bewertet.

Western-Blot: Eine 1:500-Verdünnung dieses Antikörpers resultierte im Nachweis von GLT-1 an 10 μg Mäusehirn-Membranlysaten.

Immunhistochemie:
Eine 1:1.000–1:4.000-Verdünnung aus einer zuvor benutzten Charge verwendete ein mit 4 % Paraformaldehyd fixiertes DAB-Nachweissystem am Vorderhirn von adulten Ratten.

Immunhistochemie:
Eine 1:5.000–1:10.000-Verdünnung aus einer zuvor benutzten Charge verwendete einen mit Cyanin konjugierten Sekundärantikörper.

Der enzymatische Nachweis erfordert wesentlich höhere Verdünnungen des Primärantikörpers. Leicht fixiertes 4-%-PFA-Material wird empfohlen.

Anmerkungen:

Sprague-Dawley-Ratten (n. Gew. 100–150 g) wurden mit Natriumpentobarbital anästhesiert und 6 Minuten lang über die Aorta ascendens mit 50 mL einer Ca2+-freien Tyrode+s-Lösung perfundiert, gefolgt von einem Formalin-Pikrinsäure-Fixiermittel (4 % Paraformaldehyd mit 0,4 % Pikrinsäure in 0,16 M Phosphatpuffer, pH 6,9). Das Gewebe wurde schnell herausseziert, 90 Minuten lang im selben Fixiermittel nachfixiert und mindestens 24 Stunden lang in 0,1 M Phosphatpuffer (pH 7,4) mit 10 % Saccharosegehalt gespült. In einem Kryostat wurden Gewebeschnitte durchgeführt (14 μm), die über Nacht bei 4 °C mit AB1783 (1:5.000–1:10.000) inkubiert wurden. Nach dem Spülen in PBS wurden die Schnitte bei Raumtemperatur mit Cy3-konjugierten Sekundärantikörpern 60 Minuten lang inkubiert. Nach dem Fixieren in einem Gemisch aus PBS und Glycerin, das 0,1 % p-Phenylendiamin enthielt, wurden die Schnitte mit einem Nikon-Microphot-SA-Epifluoreszenzmikroskop untersucht.



Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Anwender bestimmt werden.

Qualität

Mittels Western Blot an Mäusehirn-Membranlysaten bewertet.

Zielbeschreibung

~ 62 kDa

Physikalische Form

Meerschweinchen-Antiserum ohne Konservierungsmittel.

Nicht aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 ºC 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Rattenhirngewebe

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
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