17-648
ChIPAb+-Dimethyl-Histon H3 (Lys9) – durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set
serum, from rabbit
Synonym(e):
H3K9me2, Histone H3 (di methyl K9), Histone H3K9me2
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.52
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
rabbit
Qualitätsniveau
Antikörperform
serum
Klon
polyclonal
Speziesreaktivität
human, mouse
Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie)
mammals
Hersteller/Markenname
ChIPAb+
Upstate®
Methode(n)
ChIP: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
NCBI-Hinterlegungsnummer
UniProt-Hinterlegungsnummer
Versandbedingung
dry ice
Angaben zum Gen
human ... H3F3B(3021)
Allgemeine Beschreibung
Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Set enthält den Anti-Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Antikörper, einen Antikörper für die Negativkontrolle (normales Kaninchenserum) und qPCR-Primer, die eine 110-Basenpaare-Region innerhalb des Promotors des humanem β-Globin-Gens amplifizieren. Das Dimethyl-Histon H3 (Lys9) und die Antikörper für die Negativkontrolle werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.
Das ChIPAb+-Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Set enthält den Anti-Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Antikörper, einen Antikörper für die Negativkontrolle (normales Kaninchenserum) und qPCR-Primer, die eine 110-Basenpaare-Region innerhalb des Promotors des humanem β-Globin-Gens amplifizieren. Das Dimethyl-Histon H3 (Lys9) und die Antikörper für die Negativkontrolle werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.
Die Methylierung von Histonen kann an zwei verschiedenen Resten erfolgen: Arginin oder Lysin. Die Histon-Methylierung kann, abhängig vom methylierten Rest, mit einer Transkriptionsaktivierung oder -unterdrückung in Zusammenhang stehen. Lysin 9 von Histon H3 kann durch verschiedene Histon-Methyltransferasen (HMT) wie SuvH39H1 oder G9a mono-, di- oder trimethyliert werden. Dieses methylierte Lysin kann durch Histon-Demethylasen wie JMJD1A, LSD1 oder JMJD2C demethyliert werden. Die Methylierung dieses Rests ist primär mit der Transkriptionsunterdrückung assoziiert.
Spezifität
Dimethyl-Histon H3 (Lys9)
Immunogen
Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Kaninchenserum wurde gegen ein an KLH-konjugiertes, verzweigtes synthetisches Peptid entwickelt, das die Sequenz ..Rme2KSTG.. enthält, in der me2K dem Dimethyl-Lysin an Rest 9 des menschlichen Histons H3 entspricht.
Epitop: Dimethyl-Lys9
Anwendung
Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus unbehandelten HeLa-Zellen (1 x 106 Zelläquivalente) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit 4 μl von entweder normalem Kaninchen-Antiserum oder Anti-Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Serum und dem Magna ChIP A Kit (Art.- Nr. 17-610) unterzogen. (Siehe Abbildungen) Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit Dimethyl-Histon H3 (Lys9) assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit β-Globin-ChIP-Primern, die den humanen β-Globin-Promotor flankieren, oder mit Primern, die den humanen GAPDH-Promotor, der in HeLa-Zellen transkriptionell inaktiv ist, amplifizieren, verifiziert. Die prozentuale Eingabe relativ zu den Standardkurven für jedes qPCR-Primer-Set ist dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich auf das Protokoll EZ-Magna A ChIP (Art.- Nr. 17-408) oder EZ-ChIP (Art.- Nr. 17-371) für experimentelle Details.
Western-Blot-Analyse und Peptidhemmung:
HeLa-Säureextrakt wurde aufgetrennt durch Elektrophorese, zu Nitrocellulose transferiert und mit Anti-Dimethyl-Histon H3 (Lys9) getestet (1:500, Bahn 1) oder mit 0,4 μM Histon H3-Peptid mit folgenden Modifikationen vorinkubiert:
Bahn 2: Linear, nicht modifiziert
Bahn 3: Verzweigt, nicht modifiziert
Bahn 4: Verzweigtes Trimethyl
Bahn 5: Lineares Trimethyl
Bahn 6: Verzweigtes Dimethyl
Bahn 7: Lineares Dimethyl
Bahn 8: Verzweigtes Monomethyl
Bahn 9: Lineares Monomethyl
Die Proteine wurden mit einem an HRP konjugierten Anti–Kaninchen-Sekundärantikörper der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert.
Beschalltes Chromatin aus unbehandelten HeLa-Zellen (1 x 106 Zelläquivalente) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit 4 μl von entweder normalem Kaninchen-Antiserum oder Anti-Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Serum und dem Magna ChIP A Kit (Art.- Nr. 17-610) unterzogen. (Siehe Abbildungen) Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit Dimethyl-Histon H3 (Lys9) assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit β-Globin-ChIP-Primern, die den humanen β-Globin-Promotor flankieren, oder mit Primern, die den humanen GAPDH-Promotor, der in HeLa-Zellen transkriptionell inaktiv ist, amplifizieren, verifiziert. Die prozentuale Eingabe relativ zu den Standardkurven für jedes qPCR-Primer-Set ist dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich auf das Protokoll EZ-Magna A ChIP (Art.- Nr. 17-408) oder EZ-ChIP (Art.- Nr. 17-371) für experimentelle Details.
Western-Blot-Analyse und Peptidhemmung:
HeLa-Säureextrakt wurde aufgetrennt durch Elektrophorese, zu Nitrocellulose transferiert und mit Anti-Dimethyl-Histon H3 (Lys9) getestet (1:500, Bahn 1) oder mit 0,4 μM Histon H3-Peptid mit folgenden Modifikationen vorinkubiert:
Bahn 2: Linear, nicht modifiziert
Bahn 3: Verzweigt, nicht modifiziert
Bahn 4: Verzweigtes Trimethyl
Bahn 5: Lineares Trimethyl
Bahn 6: Verzweigtes Dimethyl
Bahn 7: Lineares Dimethyl
Bahn 8: Verzweigtes Monomethyl
Bahn 9: Lineares Monomethyl
Die Proteine wurden mit einem an HRP konjugierten Anti–Kaninchen-Sekundärantikörper der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert.
Durch ChIP validiertes Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Antikörper- und Primer-Set, einschließlich Antikörper in ChIP-Qualität und spezifische Kontroll-PCR-Primer für die Chromatin-Immunpräzipitation von H3K9Me2.
Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion
Epigenetik und Zellkernfunktion
Forschungsunterkategorie
Chromatin-Biologie
Chromatin-Biologie
Verpackung
25 Assays je Kit, ~4 μl je Chromatin-Immunpräzipitation
Komponenten
Anti-Dimethyl-Histon H3 (Lys9) (Kaninchenserum), 1 Fläschchen
Negatives ChIP-Kontrollserum, 1 Fläschchen
ChIP-Primer β-globin, 1 Fläschchen
Negatives ChIP-Kontrollserum, 1 Fläschchen
ChIP-Primer β-globin, 1 Fläschchen
Qualität
Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus unbehandelten HeLa-Zellen (1 x 106 Zelläquivalente) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit 4 μl normalem Kaninchen-Antiserum oder 4 μl Anti-Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Serum und dem Magna ChIP A Kit (Art.- Nr. 17-610) unterzogen.
Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit Dimethyl-Histon H3 (Lys9) assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Kontrollprimern, die den humanen β-Globin-Promotor flankieren, verifiziert (siehe Abbildungen).
Beschalltes Chromatin aus unbehandelten HeLa-Zellen (1 x 106 Zelläquivalente) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit 4 μl normalem Kaninchen-Antiserum oder 4 μl Anti-Dimethyl-Histon-H3(Lys9)-Serum und dem Magna ChIP A Kit (Art.- Nr. 17-610) unterzogen.
Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit Dimethyl-Histon H3 (Lys9) assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Kontrollprimern, die den humanen β-Globin-Promotor flankieren, verifiziert (siehe Abbildungen).
Zielbeschreibung
17 kDa
Physikalische Form
Dimethyl-Histon H3 (Lys9) (polyklonales Kaninchenserum). Ein Fläschchen mit 100 μl Antiserum mit 0,05 % Natriumazid.
Normales Kaninchenserum. Ein Fläschchen mit 100 µl Antiserum mit 0,05 % Natriumazid.
ChIP-Primer, β-Globin. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μM jedes spezifischen Primers für humanes β-Globin.
FÜR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC
Normales Kaninchenserum. Ein Fläschchen mit 100 µl Antiserum mit 0,05 % Natriumazid.
ChIP-Primer, β-Globin. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μM jedes spezifischen Primers für humanes β-Globin.
FÜR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC
Lagerung und Haltbarkeit
Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Hinweis zur Analyse
Kontrolle
Einschließlich normales Kaninchenserum als Antikörper für die Negativkontrolle und für den humanen β-Globin-Promotor spezifische Primer.
Einschließlich normales Kaninchenserum als Antikörper für die Negativkontrolle und für den humanen β-Globin-Promotor spezifische Primer.
Rechtliche Hinweise
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Haftungsausschluss
Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.
Lagerklassenschlüssel
10 - Combustible liquids
Analysenzertifikate (COA)
Suchen Sie nach Analysenzertifikate (COA), indem Sie die Lot-/Chargennummer des Produkts eingeben. Lot- und Chargennummern sind auf dem Produktetikett hinter den Wörtern ‘Lot’ oder ‘Batch’ (Lot oder Charge) zu finden.
Besitzen Sie dieses Produkt bereits?
In der Dokumentenbibliothek finden Sie die Dokumentation zu den Produkten, die Sie kürzlich erworben haben.
Haobin Chen et al.
Carcinogenesis, 31(12), 2136-2144 (2010-10-01)
Epigenetic silencing of tumor suppressor genes commonly occurs in human cancers via increasing DNA methylation and repressive histone modifications at gene promoters. However, little is known about how pathogenic environmental factors contribute to cancer development by affecting epigenetic regulatory mechanisms.
Youhua Tan et al.
Nature communications, 5, 4619-4619 (2014-08-08)
Tumour-repopulating cells (TRCs) are a self-renewing, tumorigenic subpopulation of cancer cells critical in cancer progression. However, the underlying mechanisms of how TRCs maintain their self-renewing capability remain elusive. Here we show that relatively undifferentiated melanoma TRCs exhibit plasticity in Cdc42-mediated
Youhua Tan et al.
Biochemical and biophysical research communications, 483(1), 456-462 (2016-12-23)
Tumor-repopulating cells (TRCs) are a tumorigenic sub-population of cancer cells that drives tumorigenesis. We have recently reported that soft fibrin matrices maintain TRC growth by promoting histone 3 lysine 9 (H3K9) demethylation and Sox2 expression and that Cdc42 expression influences
Yuxia Zhang et al.
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We describe a transcriptional mechanism regulating the expression of Dnmt1 by nuclear receptors. We show that ERRγ functions as a transcriptional activator of mouse and human Dnmt1 expression by direct binding to its response elements (ERE1/ERE2) in the dnmt1/DNMT1 promoters.
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The development of disease-modifying pharmacologic therapy for osteoarthritis (OA) currently faces major obstacles largely because the regulatory mechanisms for the function of adult articular chondrocytes remain unclear. We previously demonstrated that lack of Nfat1, one of the nuclear factor of
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