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EZ-ChIP

• Synonym(e): Chromatin Immunoprecipitation Kit
• UNSPSC-Code: 41105331
• NACRES: NA.84

Eigenschaften

• Beschreibung: 22 individual chromatin immunoprecipitation (ChIP) reactions using inexpensive protein G agarose beads
• Qualitätsniveau: 100
• Verpackung: kit of 22 assay(s)
• Methode(n): immunoprecipitation (IP): suitable

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) ist ein wichtiges Verfahren, das es Forschenden ermöglicht, In-vivo-Wechselwirkungen von Proteinen mit genomischer DNA zu analysieren. Mit dieser Methode kann jedes Chromatin-assoziierte oder DNA bindende Protein analysiert werden, sofern ein guter Antikörper gegen das Protein vorhanden ist. Man kann verschiedene Proteine, die in einer bestimmten Region des Genoms lokalisiert sind, oder die genomweite Verteilung eines bestimmten Proteins messen. Eine weitere leistungsstarke Anwendung dieser Methode ist die Analyse von Veränderungen in Histonmodifikationen, die mit Prozessen wie Transkription, Mitose oder DNA-Reparatur korrelieren.

Die Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) ist eine leistungsstarke Methode zur Kartierung der In-vivo-Verteilung von Proteinen, die mit chromosomaler DNA assoziiert sind. Bei diesen Proteinen kann es sich um Histon-Untereinheiten und posttranslationale Modifikationen sowie andere Chromatin-assoziierte Proteine wie Transkriptionsfaktoren, Chromatin-Regulatoren etc. handeln. Zusätzlich kann ChIP verwendet werden, um mit diesen Proteinen assoziierte Regionen des Genoms zu identifizieren, oder umgekehrt, um mit einer bestimmten Region des Genoms assoziierte Proteine zu identifizieren. Die ChIP-Methodik beinhaltet häufig eine Protein-DNA- und Protein-Protein-Vernetzung, eine Fragmentierung des vernetzten Chromatins und eine anschließende Immunpräzipitation des Chromatins mit einem für ein Zielprotein spezifischen Antikörper. Die im Komplex mit dem Zielprotein isolierten DNA-Fragmente können mit einer Vielzahl von Methoden wie PCR, DNA-Microarray und DNA-Sequenzierung identifiziert werden. Mit einer Standard-PCR oder quantitativen PCR kann überprüft werden, ob eine bestimmte DNA-Sequenz (das Gen oder die Region des Genoms) mit dem jeweiligen Protein assoziiert ist. Die Kombination von ChIP und Promoter Microarrays oder Genomic Tiling Microarrays (ChIP-Chip) ermöglicht die genomweite Identifizierung von DNA-Bindungsstellen für Chromatin-assoziierte Proteine mit präziser Auflösung. Die Hochdurchsatz-Sequenzierung von Bibliotheken, die aus immunpräzipitierter chromosomaler DNA (ChIP-Seq) konstruiert wurden, ist eine leistungsstarke Alternative zum ChIP-Chip bei der Kartierung der Protein-DNA-Interaktionen bei Säugetiergenomen.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Einfacher: Spinsäulen erleichtern die DNA-Aufreinigung und machen sie zuverlässiger - keine unordentlichen Phenol-Chloroform-Extraktionen mehr.
• Schneller: Alle Reagenzien zum Verarbeiten Ihrer Proben sind enthalten - Sie müssen keine wertvolle Zeit mit ihrer Herstellung vergeuden.
• Bessere Reproduzierbarkeit: Positiv- und Negativkontrolle-Antikörper sowie PCR-Primer sind enthalten, um Sie bei der Validierung Ihrer Ergebnisse und Fehlersuche in Ihren Experimenten zu unterstützten.

Verpackung

Enthält alle notwendigen Reagenzien zur Durchführung von 22 einzelnen Chromatin-Immunpräzipitations(ChIP)-Reaktionen. Die gelieferten Puffer reichen zum Erzeugen von Chromatin von bis zu fünf 15-cm-Platten mit kultivierten Zellen, wobei jede Platte bis zu 10 Chromatinaufbereitungen liefert (variiert in Abhängigkeit von Zell- und Assay-Typ). Dieses EZ-ChiP-Kit enthält alle notwendigen Reagenzien zur Durchführung von 22 einzelnen Chromatin-Immunpräzipitations(ChIP)-Reaktionen unter Verwendung günstiger Protein-G-Agarose-Beads. Kontrollprimer enthalten.

Kit-Kapazität: 22 Chromatin-Immunpräzipitations-Assays

Komponenten

• Spinsäulen und Sammelröhrchen für die DNA-Aufreinigung
• ChIP-blockierte Protein-G-Agarose
• Anti-RNA-Polymerase II
• PCR-Kontrollprimer
• Normales Maus-IgG
• Bindungs-, Wasch- und Elutionsreagens
• Proteaseinhibitor-Cocktail II
• RNase A
• Proteinase K
• Alle erforderlichen Puffer
• ChIP-Verdünnungspuffer
• Immunkomplex-Waschpuffer mit geringem Salzgehalt
• Immunkomplex-Waschpuffer mit hohem Salzgehalt
• LiCl-Immunkomplex-Waschpuffer
• TE-Puffer
• 0,5 mol/l EDTA
• 5 mol/l NaCl
• SDS-Lysepuffer
• 1 mol/l Tris-HCl, pH-Wert 6,5
• 10X PBS
• 10X Glycin
• 1 mol/l NaHCO3
• Kontrollprimer
• 20 % SDS
• Spinfilter
• Sammelröhrchen
• Bindungsreagens A
• Waschreagens B
• Elutionsreagens C

Lagerung und Haltbarkeit

Die Komponenten nach Erhalt bei den auf den Etiketten angegebenen Temperaturen lagern. Bei Lagerung und Verwendung nach Anweisung sind die Kit-Komponenten ab Versanddatum 1 Jahr haltbar.

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS02,GHS08,GHS05,GHS07
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H225,H302,H315,H318,H334,H412
• P-Sätze: P210 - P273 - P280 - P301 + P312 - P303 + P361 + P353 - P305 + P351 + P338
• Gefahreneinstufungen: Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2
• Lagerklassenschlüssel: 3 - Flammable liquids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): 55.4 °F
• Flammpunkt (°C): 13 °C