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TCF-Reporter-Plasmid-Kit

Set of transfection grade T cell factor (TCF) reporter plasmids for use in TOPFlash and FOPFlash wnt/b-catenin activity assays.

• Synonym(e): TOPFlash/FOPFlash, TOPFlash plasmid, FOPFlash plasmid
• UNSPSC-Code: 12161503
• eCl@ss: 32161000

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Hersteller/Markenname: Upstate^®
• Methode(n): transfection: suitable
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NM_000545.4
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P15884; P15923; P20823
• Anwendung(en): genomic analysis
• Versandbedingung: dry ice

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

FOPflash: T-Zellfaktor(TCF)-Reporter-Plasmid in Transfektionsqualität mit zwei ganzen und einer unvollständigen Kopie der TCF-Bindungsstelle (mutiert), gefolgt von drei Kopien in umgekehrter Orientierung, vorgelagert des minimalen Thymidin-Kinase(TK)-Promotors und des offenen Luciferase-Leserahmens. Dieses Plasmid dient als Negativkontrolle für TOPflash, das Wildtyp-TCF-Bindungsstellen aufweist.

TOPflash: T-Zellfaktor(TCF)-Reporter-Plasmid in Transfektionsqualität mit zwei Sätzen (wobei der zweite Satz in umgekehrter Orientierung vorliegt) von drei Kopien der TCF-Bindungsstelle (Wildtyp), vorgelagert des minimalen Thymidin-Kinase(TK)-Promotors und des offenen Luciferase-Leserahmens. FOPflash mit mutierten TCF-Bindungsstellen ist auch als Negativkontrolle erhältlich.

Die Wnt-Familie kodiert sezernierte Glykoproteine, die an der Regulation des Zellwachstums, der Bestimmung des Zellschicksals, der Organogenese und Onkogenese beteiligt sind. Wie aus der genetischen Analyse der Wingless(wg)-Signalisierung in Drosophila gefolgert, signalisiert Wnt in Säugetierzellen durch die Frizzled-Familie von Rezeptoren an Dishevelled. Dishevelled reguliert die Glykogen-Synthase-Kinase-3ß (GSK-3ß)-Aktivität herab. Dies führt zur Stabilisierung und Anreicherung von zytosolischem ß-Catenin, einem GSK-3ß-Substrat, das für die Ubiquitin-vermittelte Proteolyse ins Visier genommen wird, wenn es durch GSK-3ß phosphoryliert ist. ßβ-Catenin transloziert anschließend in den Zellkern, wo es mit Mitgliedern der Tcf/LEF-Familie von Transkriptionsregulatoren komplexiert und die Transkription von Tcf-responsiven Genen aktiviert. Gemeinsam mit FOPflash (Katalognr. 21-169) ermöglicht dieses Tcf-Reporter-Plasmid die Quantifizierung der Wnt/Wg-Signalisierung in mit diesen Konstrukten transfizierten Zellen.

Anwendung

Satz von T-Zellfaktor(TCF)-Reporter-Plasmiden in Transfektionsqualität zur Verwendung in TOPflash und FOPflash wnt/b-Catenin-Aktivitätsassays.

Komponenten

FOPflash (mutierte TCF-Bindungsstellen, Katalognr. 21-169)

TOPflash (TCF-Reporter-Plasmid, Katalognr. 21-170)

Qualität

Regelmäßig durch DNA-Sequenzanalyse beurteilt, um die Identität von TCF-Bindungsstellen zu bestätigen.

Physikalische Form

FOPflash, Katalognr. 21-169, Lot-Nummer 30860, 5,5 kb. 5 μg affinitätsgereinigte, eluierte und aseptisch in 50 μl 10-mmol/l-Tris-HCl, pH-Wert 8,0, und 1-mmol/l-EDTA verpackte DNA. Gefrorene Lösung.

TOPflash, Katalognr. 21-170, Lot-Nummer 27752, 5,5 kb. 5 μg affinitätsgereinigte, eluierte und aseptisch in 50 μl 10-mmol/l-Tris-HCl, pH-Wert 8,0, und 1-mmol/l-EDTA verpackte DNA. Gefrorene Lösung.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C ab Versanddatum 2 Jahre haltbar. Für maximale Produktrückgewinnung die Originalfläschchen nach dem Auftauen und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren.

Rechtliche Hinweise

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 2