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MultiDsk-Ubiquitin-bindendes Proteinreagenz

This MultiDsk-Ubiquitin-binding protein reagent is validated for use in Affinity Precipitation Assays for the pull-down of mono- and poly-ubiquitinated proteins.

• Synonym(e): Dsk-Ubiquitin-binding protein reagent, Ubiquitin domain-containing protein DSK2
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Saccharomyces cerevisiae
• Qualitätsniveau: 100
• Methode(n): affinity precipitation assay: suitable
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P48510
• Versandbedingung: dry ice

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das MultiDsk-Ubiquitin-bindende Proteinreagenz ist ein GST-Fusionsprotein, das ein Array von fünf Ubiquitin-assoziierten (UBA) Domänen aus dem Ubiquitin-bindenden Hefeprotein Dsk2 (aa 327–373; UniProt P48510) enthält. MultiDsk bindet und schützt ubiquitinierte Proteine vor der Deubiquitinierung. Bei der Immobilisierung auf Glutathionharzen kann MultiDsk für das Affinitäts-Pulldown von Proteinen mit Mono- und Poly-Ubiquitinierung aus Zellextrakten und Gewebehomogenaten verwendet werden. Diese Struktur enthält auch eine C-terminale 6xHis-Sequenz und eine interne 6xHis-Sequenz zwischen der N-terminalen GST- und der 5XUBA-Sequenz (PMID 23056298). MultiDsk wird im Rosetta-(DE3)-pLysS-Stamm von E. coli (Art.-Nr. 70956) exprimiert und gereinigt.

Produktherkunft: Hefeprotein mit einer GST-Markierung und einer His-Markierung, in E. coli exprimiert.

Spezifität

Proteine mit Mono- und Poly-Ubiquitinierung

Immunogen

Dies ist ein Proteinreagenz und kein Antikörper, da es sich um ein Hefeprotein handelt, das eine GST- und eine His-Markierung aufweist und in E. coli exprimiert wird.

Epitop: Ubiquitin

Anwendung

Affinitätspräzipitations-Assayanalyse: Eine repräsentative Charge des MultiDsk-Ubiquitin-bindenden Proteins wurde auf Agarose-Beads immobilisiert und zur Präzipitation von ubiquitinierten Proteinen aus Hefe- und HEK293-Gesamtzellextrakten verwendet. (Wilson, D.M., et al. (2012) PLoS One. 7(10):e46398).
Affinitätspräzipitations-Assayanalyse: Eine repräsentative Charge des MultiDsk-Ubiquitin-bindenden Proteins wurde auf Agarose-Beads immobilisiert und zum Pulldown von ubiquitinierten Proteinen aus Hefen-Gesamtzellextrakten verwendet. (Wilson, D.M., et al. (2013) Cell. 154:983-995).

Qualität

Die Beurteilung erfolgt durch Affinitätspräzipitation in Hefe-Gesamtzellextrakt.

Affinitätspräzipitations-Assayanalyse: Aus 1,0 mg Hefe-Gesamtzellextrakt wurden ubiquitinierte Proteine mithilfe des MultiDsk-Ubiquitin-bindenden Proteinreagenzes (7,8 μg bis 31,3 μg MultiDsk pro Pulldown) isoliert, das auf Agarose-Beads immobilisiert wurde.

Physikalische Form

Format: Aufgereinigt

Gereinigtes Ubiquitin-bindendes Protein im Puffer mit 25 mM Tris-HCl, pH 7,5, 150 mM NaCl, 2 mM β-Mercaptoethanol mit 50 % Glycerol ohne Konservierungsmittel.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -80 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Versand auf Trockeneis. Nach der Lieferung in Aliquote aufteilen und bei -80 °C aufbewahren. Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Hinweis zur Analyse

Mehrere Banden beobachtet.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable