03-198

RIPAb+-IGF2-mRNA-Bindungsprotein 3 – RIP-validierte-Antikörper- und Primer-Set

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Synonym(e): IGF II mRNA binding protein 3, IGF-II mRNA-binding protein 3, IGF2 mRNA-binding protein 3, KH domain containing protein overexpressed in cancer, KH domain-containing protein overexpressed in cancer, VICKZ family member 3, insulin-like growth factor 2 mRN
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.32

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rabbit
• Qualitätsniveau: 100
• Klon: polyclonal
• Aufgereinigt durch: affinity chromatography
• Speziesreaktivität: canine, mouse, human
• Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie): chimpanzee (based on 100% sequence homology), dog (based on 100% sequence homology), horse (based on 100% sequence homology), rhesus monkey (based on 100% sequence homology)
• Hersteller/Markenname: RIPAb+; Upstate^®
• Methode(n): RIP: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_006538
• UniProt-Hinterlegungsnummer: O00425
• Versandbedingung: dry ice
• Angaben zum Gen: human ... IGF2BP3(10643)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

RIPAb+-Antikörper werden mit dem RNA-Bindungsprotein-Immunpräzipitation(RIP)-Assay beurteilt. Jedes RIPAb+-Antikörper-Set beinhaltet einen Antikörper für die Negativkontrolle, um die Spezifität der RIP-Reaktion zu gewährleisten und ist für die Co-Immunpräzipitation von RNA, die speziell mit dem immunpräzipierten RNA-Bindungsprotein von Interesse assoziiert wird, verifiziert. Der RIPAb+-Satz enthält ggf. auch quantitative RT-PCR-Kontrollprimer (RIP-Primer) für die biologische Validierung Ihrer IP-Ergebnisse durch die erfolgreiche Co-Präzipitation der spezifischen RNA-Ziele, wie Boten-RNAs. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, RIP-Protokolle zu validieren, wenn sie den Antikörper für ihre Experimente nutzen. Wenn kein zielspezifischer Assay im Lieferumfang enthalten ist, wird das RIPAb+-Kit unter Verwendung eines automatisierten Mikrofluidik-basierten Assays validiert, indem die nachweisbare RNA per Kontroll-Immunpräzipitation angereichert wird.
IGF2-mRNA-Bindungsprotein 3 enthält mehrere KH-Domänen, die eine wichtige Rolle bei der RNA-Bindung spielen und bekanntermaßen an der RNA-Synthese und -Metabolisierung beteiligt sind.

Spezifität

Dieser Antikörper erkennt IGF2-mRNA-Bindungsprotein 3 am C-Terminus.

Immunogen

Epitop: C-Terminus

KLH-konjugiertes lineares Peptid, das humanem IGF2-mRNA-Bindungsprotein 3 am und um den C-Terminus entspricht.

Anwendung

Dieses praktische Set aus validiertem RIPAb+-IGF2 mRNA-Bindungsprotein-3-RIP-Antikörper und Primer enthält den Antikörper und die spezifischen PCR-Kontrollprimer.

Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Forschungsunterkategorie
Wachstumsfaktoren & Rezeptoren

RNA-Metabolismus- und Bindungsproteine

Immunpräzipitation aus RIP-Lysat:
Repräsentative Chargendaten.
RIP-Lysat aus HeLa-Zellen (ca. 2 x 10E7-Zelläquivalente pro IP) wurde Immunpräzipitation unter Verwendung von 5 µg entweder normalem Kaninchen-IgG (Kat.-Nr. PP64B) oder 5 µg Anti-IGF2-mRNA-Bindungsprotein-3-Antikörper (Kat.-Nr. CS207310) unterzogen. Zehn Prozent der präzipitierten Proteine (Bahn 1: Kaninchen-IgG, Bahn 2: IGF2-mRNA-Bindungsprotein 3) wurden mittels Elektrophorese aufgelöst, auf Nitrocellulose übertragen und mit Anti-IGF2-mRNA-Bindungsprotein-3-Antikörper (Kat.-Nr. CS207310, 1:1000) getestet. Die Proteine wurden mit dem One-Step IP-Western-Kit (GenScript Kat.-Nr. L00231) visualisiert. Der Pfeil zeigt IGF2-mRNA-Bindungsprotein 3. Das untere Band in Bahn 2 entspricht Isoform 2.
Western-Blot-Analyse:
Repräsentative Chargendaten.
HEK293-Zelllysat wurde mittels Elektrophorese aufgelöst, auf PVDF-Membranen übertragen und mit IGF2BP3 (1:2.000) verdünnt getestet. Die Proteine wurden mit HRP-konjugierten Anti-Kaninchen-Antikörpern vom Esel und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert.
Der Pfeil kennzeichnet IGF2BP3 (~64 kDa).

Verpackung

10 Assays je Set. Empfohlene Verwendung: ca. 5 μg Antikörper je RIP (abhängig vom biologischen Kontext).

Qualität

RNA-Bindungsprotein-Immunpräzipitation:
Repräsentative Chargendaten.
RIP-Lysat aus NIH/3T3-Zellen (Äquivalent von 2 x 107 Zellen je IP) wurde einer Immunpräzipitation mit 5 µg normalem Kaninchen-IgG oder 5 µg Anti-IGF2-mRNA-Bindungsprotein-Antikörper und dem Magna RIP^®-RNA-Bindungsprotein-Immunpräzipitation Kit (Kat.-Nr. 17-700) unterzogen.
Die erfolgreiche Immunpräzipitation von IGF2-mRNA-Bindungsprotein-3-assoziierter RNA wurde mittels qPCR mit RIP-Primern IGF2 bestätigt (Abbildung 1).
Nähere Informationen zu Experimenten entnehmen Sie bitte dem Protokoll für Magna RIP (Katalognr. 17-700) oder EZ-Magna RIP (Katalognr. 17-701).

Zielbeschreibung

64 kDa gemessen. Eine Kreuzreaktion mit allen Isoformen von IGF2BP3 wird erwartet.

Physikalische Form

Affinitätsgereinigt

Anti-IGF2-mRNA-Bindungsprotein 3 (polyklonaler Kaninchen-Antikörper). Ein Fläschchen mit 75 μl aufgereinigtem polyklonalem Kaninchen-Antikörper in PBS mit 0,09 % Natriumazid und 30 % Glycerin. Bei -20 °C aufbewahren. Konzentration: 0,7 mg/ml
Normales Kaninchen-IgG. Ein Fläschchen mit 125 μg Kaninchen-IgG in 125 μl Lagerpuffer mit 0,05 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.
RIP-Primer IGF2, Art.-Nr. CS207311.
Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μM jedes spezifischen Primers für humane IGF2-mRNA. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: GCG GCT TCT ACT TCA GCA G
REV: CAG GTG TCA TAT TGG AAG AAC

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können. Hinweis: Ein Abfall der Gefrierschranktemperatur unter -20 °C kann dazu führen, dass glycerinhaltige Lösungen während der Lagerung einfrieren.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Enthält normale Kaninchen-IgG-Antikörper als Negativkontrolle und für die cDNA von humanem IGF2 spezifische Kontrollprimer.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

MAGNA RIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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