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  • An in vitro study of peptide-loaded alginate nanospheres for antagonizing the inhibitory effect of Nogo-A protein on axonal growth.

An in vitro study of peptide-loaded alginate nanospheres for antagonizing the inhibitory effect of Nogo-A protein on axonal growth.

Biomedical materials (Bristol, England) (2015-08-05)
Peng Zhai, X B Chen, David J Schreyer
RESUMEN

The adult mammalian central nervous system has limited ability to regenerate after injury. This is due, in part, to the presence of myelin-associated axon growth inhibitory proteins such as Nogo-A that bind and activate the Nogo receptor, leading to profound inhibition of actin-based motility within the growing axon tip. This paper presents an in vitro study of the use of a Nogo receptor-blocking peptide to antagonize the inhibitory effect of Nogo-A on axon growth. Alginate nanospheres were fabricated using an emulsion technique and loaded with Nogo receptor-blocking peptide, or with other model proteins. Protein release profiles were studied, and retention of the bioactivity of released proteins was verified. Primary dorsal root ganglion neurons were cultured and their ability to grow neurites was challenged with Nogo-A chimeric protein in the absence or presence of Nogo receptor antagonist peptide-loaded alginate nanospheres. Our results demonstrate that peptide released from alginate nanospheres could overcome the growth inhibitory effect of Nogo-A, suggesting that a similar peptide delivery strategy using alginate nanospheres might be used to improve axon regeneration within the injured central nervous system.

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
Laminina from Engelbreth-Holm-Swarm murine sarcoma basement membrane, 1-2 mg/mL in Tris-buffered saline, 0.2 μm filtered, BioReagent, suitable for cell culture
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Supelco
Reactivo Bradford, for 0.1-1.4 mg/ml protein
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Sigma-Aldrich
Cloruro de calcio solution, BioUltra, for molecular biology, ~1 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Span® 80, nonionic surfactant
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Sigma-Aldrich
Calcium chloride, anhydrous, BioReagent, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥96.0%
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Sigma-Aldrich
Medio de Eagle modificado de Dulbecco, glucosa elevada, With 4500 mg/L glucose and L-glutamine, without sodium bicarbonate, powder, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Sodium, cubes, contains mineral oil, 99.9% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Sodium, in kerosene, pieces (large), ≥99.8% (sodium basis)
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Sigma-Aldrich
Poli-L-lisina hydrobromide, mol wt 30,000-70,000, lyophilized powder, γ-irradiated, BioXtra, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Calcium chloride, anhydrous, powder, 99.99% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Sodium, 99.95% trace metals basis, ingot
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Sigma-Aldrich
Calcium chloride, AnhydroBeads, −10 mesh, ≥99.9% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Paraffin oil, puriss., meets analytical specification of Ph. Eur., BP, viscous liquid
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Sigma-Aldrich
Sodium, 25-35 wt % dispersion in paraffin
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Sigma-Aldrich
Nogo-66(1-40) antagonist peptide, ≥84% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
Cloruro de calcio dihydrate
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Sigma-Aldrich
1,2-Dilinoleoyl-3-palmitoyl-rac-glycerol, ≥95% (TLC), liquid
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Sigma-Aldrich
Calcium chloride, AnhydroBeads, −10 mesh, ≥99.99% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Sodium, ACS reagent, dry
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Sigma-Aldrich
Cloruro de calcio solution, 0.025 M
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Sigma-Aldrich
Sodium, CP
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sodium, SAJ first grade, ≥99.5%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de calcio solution, 3.2 mM
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad