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Wide injection zone compression in gradient reversed-phase liquid chromatography.

Journal of chromatography. A (2015-03-10)
Martin Gilar, Thomas S McDonald, Jay S Johnson, James P Murphy, James W Jorgenson
RESUMEN

Chromatographic zone broadening is a common issue in microfluidic chromatography, where the sample volume introduced on column often exceeds the column void volume. To better understand the propagation of wide chromatographic zones on a separation device, a series of MS Excel spreadsheets were developed to simulate the process. To computationally simplify these simulations, we investigated the effects of injection related zone broadening and its gradient related zone compression by tracking only the movements of zone boundaries on column. The effects of sample volume, sample solvent, gradient slope, and column length on zone broadening were evaluated and compared to experiments performed on 0.32mm I.D. microfluidic columns. The repetitive injection method (RIM) was implemented to generate experimental chromatograms where large sample volume scenarios can be emulated by injecting two discrete small injection plugs spaced in time. A good match between predicted and experimental RIM chromatograms was observed. We discuss the performance of selected retention models on the accuracy of predictions and use the developed spreadsheets for illustration of gradient zone focusing for both small molecules and peptides.

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, suitable for HPLC, gradient grade, ≥99.9%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, HPLC Plus, ≥99.9%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Ácido fórmico, reagent grade, ≥95%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Ácido fórmico, ACS reagent, ≥96%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Ácido fórmico, puriss. p.a., ACS reagent, reag. Ph. Eur., ≥98%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, ACS reagent, ≥99.5%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, suitable for HPLC, gradient grade, ≥99.9%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Ácido fórmico, puriss., meets analytical specifications of DAC, FCC, 98.0-100%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Ácido fórmico, ACS reagent, ≥88%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Uracil, ≥99.0%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, suitable for HPLC-GC, ≥99.8% (GC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Indole, ≥99%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Valerophenone, 99%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, biotech. grade, ≥99.93%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, anhydrous, 99.8%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetofenona, ≥98%, FG
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Ácido fórmico, ≥95%, FCC, FG
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Uracil, BioReagent, suitable for cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Reserpine
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, ReagentPlus®, 99%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Butyrophenone, ≥99%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetofenona, ReagentPlus®, 99%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, electronic grade, 99.999% trace metals basis
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Indole, ≥99%, FG
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, suitable for DNA synthesis, ≥99.9% (GC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Supelco
Acetonitrilo, HPLC grade, ≥99.93%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Ácido fórmico, JIS special grade, ≥98.0%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, ≥99.8%, suitable for HPLC
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Supelco
Acetonitrilo, Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad