Saltar al contenido
Merck

Purification and cryo-EM structure determination of Arabidopsis thaliana GLR3.4.

STAR protocols (2021-10-15)
Shanti Pal Gangwar, Marriah N Green, Maria V Yelshanskaya, Alexander I Sobolevsky
RESUMEN

Ionotropic glutamate receptors (iGluRs) are ligand-gated ion channels that play crucial roles in the central nervous system. iGluR homologs, termed glutamate receptor-like channels (GLRs), have been found in plants. Investigating the structural and functional relationship between iGluRs and GLRs was limited by GLR protein expression, purification, and structural characterization. Here, we provide a detailed protocol for Arabidopsis thaliana GLR3.4 (AtGLR3.4) expression in a mammalian cell line and purification for structure determination by cryogenic electron microscopy (cryo-EM). For the complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Green et al. (2021).

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
Aprotinina from bovine lung, lyophilized powder, 3-8 TIU/mg solid
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
D-Destiobiotina, ≥98% (TLC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
L-Glutamic acid monosodium salt monohydrate, ≥98.0% (NT)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Pepstatina A, microbial, ≥75% (HPLC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Gentamicina sulfate salt, meets USP testing specifications, powder
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Leupeptin hydrochloride, microbial, ≥70% (HPLC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad