Concentración de proteínas y cambio de tampones

La concentración de proteínas y el cambio de tampones se utilizan habitualmente en la purificación de anticuerpos y proteínas, en el bioprocesamiento y en el análisis proteómico. Las preparaciones de muestras de disoluciones macromoleculares como proteínas, enzimas, anticuerpos y virus producen a menudo grandes volúmenes de proteínas diluidas y otras biomoléculas en disoluciones tampón que son incompatibles con los procesos posteriores o con la detección. Después de la extracción de la muestra, las proteínas diluidas a menudo tienen que ser concentradas y clarificadas antes de su análisis o de su utilización.

Concentración de proteínas

Existen diversos métodos para la concentración de proteínas, entre ellos, la filtración con membranas de filtración porosas, la diálisis en disoluciones hiperosmóticas y la precipitación con o sin sal. La ultrafiltración proporciona un método cómodo en el que se utilizan membranas semipermeables para concentrar las proteínas a presión o fuerza centrífuga con desnaturalización, desactivación y degradación mínima de las proteínas. Utilizando esta técnica, el exceso de líquido atraviesa el filtro mientras que la proteína deseada es retenida, aumentando así la concentración proteica al disminuir el volumen de la muestra.

Enriquecimiento proteico

En el enriquecimiento proteico, se concentran grupos o tipos específicos de proteínas en una muestra biológica para su ulterior análisis. Los métodos de enriquecimiento de proteínas se utilizan para aislar proteínas poco abundantes y reducir la complejidad de la muestra. En el enriquecimiento se separan y concentran las proteínas deseadas para mejorar el análisis proteómico consecutivo. La ultrafiltración suele utilizarse en el enriquecimiento de proteínas para separar las clases de proteínas en función de su peso molecular.