Expresión y silenciamiento génicos
La modulación de la expresión génica es una de las técnicas más potentes utilizadas para investigar las complejas redes genéticas que rigen los procesos biológicos. En particular, los experimentos de modulación génica se utilizan mucho para identificar los tratamientos eficaces en la lucha contra enfermedades que van desde el cáncer hasta los trastornos del desarrollo y neurodegenerativos.
Existen numerosas tecnologías para la regulación efectiva de la expresión génica en células y tejidos. El RNAi (ARN de interferencia) es un mecanismo biológico natural en el que los dúplex de siRNA (ARN de interferencia corto) inducen una inhibición potente y dirigida de la expresión génica. SigmaAldrich® Advanced Genomics ha encabezado el desarrollo de productos RNAi comerciales para los investigadores.
Más recientemente, el desarrollo de la inhibición CRISPR (CRISPRi) y la activación (CRISPRa) proporciona a los investigadores un nuevo y potente conjunto de herramientas que permiten opciones de regulación génica casi ilimitadas. Utilizando la incomparable cartera de productos CRISPR de SigmaAldrich® Advanced Genomics, los investigadores son capaces de atenuar la expresión, inactivar, activar o sobreexpresar con precisión y eficiencia prácticamente cualquier gen.
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Diagrama que muestra la secuencia del silenciamiento genético mediado por shRNA y siRNA en las células.
RNAi - Modulación génica para iluminar las vías genéticas
Los cribados genómicos funcionales son una parte integral de la investigación de descubrimiento, que le permiten desentrañar los mecanismos ocultos en los sistemas y las vías biológicas, y en las enfermedades. El estudio eficaz de estas complejas redes de interacción molecular puede lograrse utilizando colecciones de shRNA para proporcionar una atenuación génica fiable, eficiente y prolongada.
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics es el proveedor exclusivo de las colecciones TRC1.5 y TRC2 del The RNAi Consortium (TRC). Estos bancos de shRNA en lentivirus ofrecen una cobertura sin precedentes y están disponibles en varios formatos como genoma completo, clones/vectores de RNAi individuales y conjuntos de familias de genes.
CRISPRi y CRISPRa - Una potente inhibición y activación génica
CRISPRi (interferencia CRISPR) y CRISPRa (activación CRISPR) proporcionan un silenciamiento y una activación génicas muy eficientes sin alterar la secuencia de ADN subyacente. Cuando se emplean en cribados de LOF (pérdida de función) y GOF (ganancia de función) a gran escala, los investigadores pueden identificar vías génicas únicas, pero funcionalmente relacionadas, que a menudo pasan desapercibidas con otros métodos.
Diagramas esquemáticos de CRISPRa con el complejo mediador de la activación sinérgica (SAM) y CRISPRi utilizando el dominio KRAB.
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics ofrece un conjunto completo de colecciones CRISPRi y CRISPRa optimizadas para experimentos de atenuación y sobreexpresión génicas. Disponemos de virotecas lentivirales agrupadas de CRISPRi y SAM CRISPRa genéricas o personalizadas para sus requisitos específicos.
- Colecciones CRISPRi de genoma completo y no codificantes
- Colecciones de SAM CRISPRa de genoma completo
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Proteínas de fusión Cas9-GFP
Folleto de RNAi
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Preguntas frecuentes sobre shRNA
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