蛋白电泳凝胶染液

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文章：电泳 - 蛋白染色试剂
实验方案: 蛋白质印迹指南
手册: 免疫印迹法工作流程步骤

固定液

在凝胶电泳后，蛋白通常会被“固定”在凝胶上以防止在染色前发生分散。某些凝胶染液中含有不再需要在染色前固定凝胶的化学物质。

比色蛋白凝胶染液

• 考马斯亮蓝可通过与蛋白质氨基和羧基的静电相互作用而用于对聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白质进行染色。
• ReadyBlue™蛋白凝胶染液是一种用于聚丙烯酰胺凝胶的快速、灵敏型胶体考马斯染液，它以即用型溶液的形式提供，可实现更为快速、简化的实验方案。ReadyBlue™可通过比色或IR荧光法进行成像。 这种安全的制剂不含有机溶剂或磷酸，并最多可重复使用3次。ReadyBlue™已被证明可达到低至每条带2 ng的灵敏度。
• EZBlue™凝胶染色试剂是一种便捷、灵敏且安全的考马斯亮蓝G-250胶体蛋白染液，可在显著减少染色时间的同时改善蛋白电泳的结果。作为胶体染色剂，它只与蛋白质反应，而不是凝胶本身。由于背景染色被减少，因此几乎可以立即在聚丙烯酰胺凝胶和PVDF膜上看到蛋白条带。无需脱色步骤，尽管水洗可能会加强条带并澄清背景。EZBlue™试剂极度灵敏，可检测最低5 ng的蛋白。
• 可逆蛋白检测试剂盒是一种设计用于对尼龙、硝酸纤维素膜、PVDF膜或PAGE凝胶上的蛋白进行染色的独特检测系统，具有与考马斯蓝染液相似的检测灵敏度。大多数其他染液因与尼龙膜具有强电荷相互作用而产生高背景。染色可通过EDTA溶液轻松实现逆转，因此该印迹可重复用于免疫印迹或氨基酸序列分析。
• 萘酚蓝黑染料可用于在聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶和硝酸纤维素膜上对蛋白进行染色。建议在电泳后对凝胶上的蛋白进行固定。然后用7％（v/v）乙酸中的0.1％萘酚蓝黑染料对凝胶染色至少2小时，并用7％（v / v）乙酸溶液进行脱色。检测灵敏度约为考马斯蓝的20%
• ProteoSilver™银染试剂盒提供了最高的灵敏度，在孵育3-12分钟后具有每条带≥0.1 ng蛋白的灵敏度。该染色方法推荐用于极低丰度的蛋白，并可兼容MALDI-TOF应用。

荧光蛋白凝胶染液

• EZFluor™一步法荧光蛋白凝胶染液是一种即用型荧光蛋白凝胶染液，它仅需一步不含固定的5-30分钟染色步骤，并可检测最低每条带1-10 ng的蛋白。染色可完全兼容质谱和基于Edman的测序。
• EZFluor™ UV一步法荧光蛋白凝胶染液是一种即用型荧光蛋白凝胶染液，设计用于使用紫外透射仪和兼容质谱的溴化乙锭滤光片进行成像。
• SYPRO^® Ruby蛋白凝胶染液是一种即用型、超灵敏的荧光染液，可用于对通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）分离的蛋白进行检测。这种染液专为2-D PAGE设计，已被证明也是用于1-D PAGE和等电聚焦（IEF）凝胶的一种绝佳选择。SSYPRO^® Ruby蛋白凝胶染液具有与多种银染技术相当的灵敏度。
• SYPRO^® Orange与YPRO^® Red相似，但它颜色更亮一些，且背景荧光略高。该染料可由紫外线或宽带照明光有效激发。它不适用于印迹或IEF凝胶中蛋白的染色，并在2维凝胶染色中显示出较低的灵敏度。

脱色试剂

• CoZap可用于考马斯蓝染液的快速去除。独特的CoZap垫被直接放置在脱色托盘中，并吸收了溶液中的所有游离染料，从而免去了更换脱色溶液的需要。