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一般說明
CpGenome 通用未甲基化DNA组为基因甲基化研究提供了2个单独的基因组DNA对照。该产品预期与CpGenome DNA修饰试剂盒(S7820)配合使用,随后可用作基因甲基化研究的非甲基化DNA对照。
提供的材料:
通用非甲基化DNA小瓶A含有浓度为0.1 μg/μL的5微克(50μL)人基因组DNA。通用未甲基化DNA小瓶B含有从原代人胎儿细胞系分离的5微克(50μL)基因组DNA,浓度为0.1 μg/μL。注意:必须首先使用(S7820)对DNA进行亚硫酸氢盐修饰,以使用针对目的基因的未甲基化形式的特异性引物组。
验证:
亚硫酸氢盐修饰后,对DNA进行甲基化特异性PCR(MSP)。 在测定中使用了来自CpG WIZ产品线的各种引物组。 小瓶A的DNA已用几种CpG WIZ扩增试剂盒的引物进行了验证。 小瓶B DNA在使用CpG WIZ试剂盒测定的几个启动子上也未甲基化,并作为可能在小瓶A DNA中部分甲基化的启动子的DNA替代来源提供。
CpG基因组和CpG WIZ甲基化产品应用技术,该技术已获得约翰霍普金斯大学医学院的独家许可。甲基化特异性PCR(MSP)技术由美国专利#5,786,146涵盖。
提供的材料:
通用非甲基化DNA小瓶A含有浓度为0.1 μg/μL的5微克(50μL)人基因组DNA。通用未甲基化DNA小瓶B含有从原代人胎儿细胞系分离的5微克(50μL)基因组DNA,浓度为0.1 μg/μL。注意:必须首先使用(S7820)对DNA进行亚硫酸氢盐修饰,以使用针对目的基因的未甲基化形式的特异性引物组。
验证:
亚硫酸氢盐修饰后,对DNA进行甲基化特异性PCR(MSP)。 在测定中使用了来自CpG WIZ产品线的各种引物组。 小瓶A的DNA已用几种CpG WIZ扩增试剂盒的引物进行了验证。 小瓶B DNA在使用CpG WIZ试剂盒测定的几个启动子上也未甲基化,并作为可能在小瓶A DNA中部分甲基化的启动子的DNA替代来源提供。
CpG基因组和CpG WIZ甲基化产品应用技术,该技术已获得约翰霍普金斯大学医学院的独家许可。甲基化特异性PCR(MSP)技术由美国专利#5,786,146涵盖。
经5′端的胞嘧啶甲基化为鸟嘌呤对许多真核基因的表达具有深远的影响。在正常细胞中,甲基化主要发生在CG贫乏区域,而富含CG的区域(称为CpG岛)则保持未甲基化状态。其中例外的是,CpG岛的广泛甲基化与印记基因和女性无活性X染色体上的基因调节区的转录失活有关。在永生化和转化的细胞中,正常未甲基化的CpG岛的异常甲基化已被报道为一个相对频繁的事件,并且与人类癌症中已定义的肿瘤抑制基因的转录失活有关。目前已知数百个CpG岛在肿瘤中表现出高甲基化的特征。
已经开发了几种方法来确定胞嘧啶的甲基化状态。这些包括用甲基化敏感的限制酶消化,如限制性标志基因组扫描,寡核苷酸阵列,基因组DNA测序和甲基化特异性PCR(MSP)。一些技术对于发现更有用,而其他技术则更好地用于监测已知的甲基化胞嘧啶。虽然基因组DNA测序费时费力,但提供了一种更通用的检测方法。MSP现在是用于监测所选基因序列中异常基因甲基化的既定技术。该程序利用少量DNA,可灵敏并特异地检测启动子中的5-甲基胞嘧啶。它被用来定义肿瘤抑制基因的功能,并为早期肿瘤检测提供新的策略。
基因组测序和MSP的初始步骤是对DNA样品进行亚硫酸氢盐修饰。然后,MSP涉及使用特定引物进行PCR扩增,这些引物旨在区分甲基化和未甲基化的DNA。
已经开发了几种方法来确定胞嘧啶的甲基化状态。这些包括用甲基化敏感的限制酶消化,如限制性标志基因组扫描,寡核苷酸阵列,基因组DNA测序和甲基化特异性PCR(MSP)。一些技术对于发现更有用,而其他技术则更好地用于监测已知的甲基化胞嘧啶。虽然基因组DNA测序费时费力,但提供了一种更通用的检测方法。MSP现在是用于监测所选基因序列中异常基因甲基化的既定技术。该程序利用少量DNA,可灵敏并特异地检测启动子中的5-甲基胞嘧啶。它被用来定义肿瘤抑制基因的功能,并为早期肿瘤检测提供新的策略。
基因组测序和MSP的初始步骤是对DNA样品进行亚硫酸氢盐修饰。然后,MSP涉及使用特定引物进行PCR扩增,这些引物旨在区分甲基化和未甲基化的DNA。
包裝
2 x 5 μg
外觀
在TE(10mM Tris-HCL,0.1mM EDTA)中的液体,不含防腐剂。
儲存和穩定性
建议储存: -15°C至-25°C,等分分装,自接收之日起保存长达2年,避免冻融。相同的-20°C等分试样的冷冻和解冻不要超过3倍,以获得最佳结果。多次冻融可使DNA片段化。在-70°C下保存,必要时可长期保存;尽量减少多次冻融,以获得最佳结果。
法律資訊
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
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儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
分析證明 (COA)
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