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生物源
rat
品質等級
抗體表格
culture supernatant
抗體產品種類
primary antibodies
無性繁殖
DAT-Nt, monoclonal
物種活性
rat, human, mouse, monkey
製造商/商標名
Chemicon®
技術
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
同型
IgG2aκ
NCBI登錄號
UniProt登錄號
運輸包裝
dry ice
目標翻譯後修改
unmodified
基因資訊
human ... SLC6A3(6531)
一般說明
跨膜多巴胺转运蛋白(DAT)位于突触前神经末梢,负责通过将多巴胺从突触间隙转运到多巴胺能神经元(再摄取)来终止多巴胺能传递。 多巴胺能途径与奖赏和成瘾、冲动、酒精中毒、多动症和退行性运动疾病(如帕金森′氏症、亨廷顿′氏症和舞蹈病)密切相关。
特異性
识别N末端多巴胺转运蛋白。 与密切相关的5-羟色胺和去甲肾上腺素转运蛋白无交叉反应性(Miller,1997)。使用MAB369在多聚甲醛固定的人脑冷冻切片上进行DAT的免疫定位显示,整个尾核、壳核和伏隔核都有密集的点状染色(Miller,1997)。
免疫原
与谷胱甘肽S-转移酶融合的人多巴胺转运蛋白的N末端。
表位:N末端
應用
研究子类别
离子通道&转运蛋白
离子通道&转运蛋白
研究类别
神经科学
神经科学
蛋白质印迹: 在人尾核、壳核和伏隔核提取物(20μg总蛋白)的蛋白质印迹上识别约70-85 kDa的扩散带。
免疫组织化学:4%多聚甲醛固定组织(应注意不要过度固定组织);灌注,然后在固定后少于90分钟,然后冷冻保护。建议的工作稀释度为1:1,000-1:10,000。如果在大鼠组织上使用,建议使用吸收的抗大鼠二抗,并且使用大鼠PAP系统,或ABC检测会增强灵敏度。
免疫细胞化学:1:5,000至1:10,000。
免疫印迹(不建议用于大鼠)
最佳工作稀释度和方案必须由最终用户确定。
MAB369的免疫组织化学方案
该抗体已成功用于30 μm,自由浮动,4%多聚甲醛固定的小鼠脑组织。 所有步骤均在恒定搅拌下进行。 建议的方案如下。
1)在TBS(含或不含0.25% Triton)中清洗3 × 10分钟。
2)含3%血清的TBS中孵育30分钟(与来自二抗的宿主相同)。
3)将在TBS中适当稀释的一抗与1%血清(与来自二抗的宿主相同)(含或不含0.25% Triton)在室温下孵育2小时,然后在4°C下孵育16小时。
4)在TBS中清洗3 × 10分钟。
5)用含1%血清的TBS中适当稀释的二抗孵育(与来自二抗的宿主相同)。
6)在TBS中清洗3 × 10分钟。
7)TBS中的ABC Elite(1:200 Vector Labs)。
8)在TBS中清洗2 × 10分钟。
9)在磷酸盐缓冲液(无盐水)中清洗1 × 10分钟。
10)加入0.06% NiCl的DAB反应进行强化。
11)在PBS中清洗2 × 10分钟。
12)在磷酸盐缓冲液(无盐水)中清洗1 × 10分钟。
免疫组织化学:4%多聚甲醛固定组织(应注意不要过度固定组织);灌注,然后在固定后少于90分钟,然后冷冻保护。建议的工作稀释度为1:1,000-1:10,000。如果在大鼠组织上使用,建议使用吸收的抗大鼠二抗,并且使用大鼠PAP系统,或ABC检测会增强灵敏度。
免疫细胞化学:1:5,000至1:10,000。
免疫印迹(不建议用于大鼠)
最佳工作稀释度和方案必须由最终用户确定。
MAB369的免疫组织化学方案
该抗体已成功用于30 μm,自由浮动,4%多聚甲醛固定的小鼠脑组织。 所有步骤均在恒定搅拌下进行。 建议的方案如下。
1)在TBS(含或不含0.25% Triton)中清洗3 × 10分钟。
2)含3%血清的TBS中孵育30分钟(与来自二抗的宿主相同)。
3)将在TBS中适当稀释的一抗与1%血清(与来自二抗的宿主相同)(含或不含0.25% Triton)在室温下孵育2小时,然后在4°C下孵育16小时。
4)在TBS中清洗3 × 10分钟。
5)用含1%血清的TBS中适当稀释的二抗孵育(与来自二抗的宿主相同)。
6)在TBS中清洗3 × 10分钟。
7)TBS中的ABC Elite(1:200 Vector Labs)。
8)在TBS中清洗2 × 10分钟。
9)在磷酸盐缓冲液(无盐水)中清洗1 × 10分钟。
10)加入0.06% NiCl的DAB反应进行强化。
11)在PBS中清洗2 × 10分钟。
12)在磷酸盐缓冲液(无盐水)中清洗1 × 10分钟。
该抗多巴胺转运蛋白抗体(N末端,克隆DAT-Nt)经验证可用于检测多巴胺转运蛋白的IC、IH、WB。
標靶描述
约70-85 kDa
外觀
未纯化
未纯化的组织培养物上清液,在装瓶前通过0.2 μm膜过滤。产品包含20%FBS和环丙沙星,终浓度为10μg/mL。
儲存和穩定性
自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。分装保存以避免反复冻融。为了最大程度地回收产品,需在融化后和取下盖子之前将原始样品管进行离心。
分析報告
对照
阳性对照:脑(尾核、壳核和伏隔核)组织
阳性对照:脑(尾核、壳核和伏隔核)组织
其他說明
法律資訊
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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儲存類別代碼
10 - Combustible liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
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