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一般說明
迄今为止,通过体外培养已经稳定了小鼠多能性的两个阶段。‘原始态’代表最早的阶段,可以富集更纯净的人群,称为‘基态’。原始态最接近植入前胚泡中的胚胎上皮细胞。引发状态最接近体内即刻植入后上皮细胞。在培养、表达、表观遗传学(包括适当的X-灭活)和发育能力之间存在明显差异。原始mESC可以通过四倍体互补产生整个动物,而引发的mESC不能,这一事实是对原始hESC期望提高的一个特别令人信服的原因。
小鼠白血病抑制性因子(LIF)是小鼠ES细胞培养基中的关键成分,它可以促进自我更新并维持小鼠胚胎干(ES)细胞的多能性。 最近的研究已经确定,阻断MAPK/Erk途径的抑制剂与糖原合酶激酶3(GSK3)抑制剂结合,可以保护小鼠ES细胞免受分化诱导信号的影响,即使在没有LIF的情况下也可以自我更新。 在这些条件下培养的小鼠ES细胞保持其LIF反应性,研究表明,将LIF添加到2i培养条件下可产生更好的菌落繁殖并增强ES菌落的总体健康状况。支持原始/基态多能状态。
小鼠白血病抑制性因子(LIF)是小鼠ES细胞培养基中的关键成分,它可以促进自我更新并维持小鼠胚胎干(ES)细胞的多能性。 最近的研究已经确定,阻断MAPK/Erk途径的抑制剂与糖原合酶激酶3(GSK3)抑制剂结合,可以保护小鼠ES细胞免受分化诱导信号的影响,即使在没有LIF的情况下也可以自我更新。 在这些条件下培养的小鼠ES细胞保持其LIF反应性,研究表明,将LIF添加到2i培养条件下可产生更好的菌落繁殖并增强ES菌落的总体健康状况。支持原始/基态多能状态。
應用
ESGRO®-2i补充试剂盒(1000x)包含LIF a选择性GSK3β& Mek 1/2抑制剂,以在没有血清&饲养细胞的情况下增强小鼠胚胎干&iPS细胞的活率。支持原始/基态多能状态。
培养基制备的建议方案:
1.在室温下解冻MEK/GSK3抑制剂补充剂和mLIF。
2.每瓶补充剂足以制成500 mL用于无血清或血清依赖性小鼠ES培养的完全培养基。
3.将含有1000x稀释补充剂的小瓶中的内容物无菌转移到预热的无血清基础培养基瓶中,例如ESGRO完全基础培养基(目录编号SF002-500)或含血清的培养基中,并混合。
4.完全培养基可通过0.22 µm过滤器(目录编号S2GVU05RE)过滤。
5.将补充剂添加到培养基中后,在4°C下避光保存长达10天。
1.在室温下解冻MEK/GSK3抑制剂补充剂和mLIF。
2.每瓶补充剂足以制成500 mL用于无血清或血清依赖性小鼠ES培养的完全培养基。
3.将含有1000x稀释补充剂的小瓶中的内容物无菌转移到预热的无血清基础培养基瓶中,例如ESGRO完全基础培养基(目录编号SF002-500)或含血清的培养基中,并混合。
4.完全培养基可通过0.22 µm过滤器(目录编号S2GVU05RE)过滤。
5.将补充剂添加到培养基中后,在4°C下避光保存长达10天。
包裝
提供即用型等分试样,足以补充10 x 500 mL小鼠ES细胞培养基,以补充总共5 L完全培养基。
成分
ESGRO® 补充剂:(产品编号CS210511):小鼠重组白血病抑制性因子(LIF),0.5 x 106U/mL。十(10)个0.5 mL小瓶。
MEK/GS3抑制剂补充剂:(目录号CS210510-500UL):十(10)个0.5 mL小瓶。
MEK/GS3抑制剂补充剂:(目录号CS210510-500UL):十(10)个0.5 mL小瓶。
外觀
两种补充剂均在溶液中配制成1000x浓度。小鼠LIF是在磷酸盐缓冲生理盐水中制备的,其中1%w/v牛血清白蛋白BSA作为稳定性的载体。 在DMSO中制备MEK/GSK3抑制剂补充剂。
準備報告
提供的ESGRO补充剂经0.22微米过滤,并在支原体检测中呈阴性
儲存和穩定性
储存于-20°C。解冻后,ESGRO补充剂应储存于2-8°C。请勿重新冷冻ESGRO补充剂(产品编号CS210511)。 有关失效日期,请参阅标签。
分析報告
比活度:ESGRO补充剂在小鼠ES细胞和鼠M1髓样白血病细胞上进行了评估。50个单位的标准定义为在1.0 mL组织培养基中可诱导50%的M1菌落分化的ESGRO补充剂的浓度(Metcalf, 1988)。
胚胎干细胞测定:分化抑制测定,浓度为1000单位/mL
鼠髓样白血病,M1测定:比活度大于或等于108 单位/mg
胚胎干细胞测定:分化抑制测定,浓度为1000单位/mL
鼠髓样白血病,M1测定:比活度大于或等于108 单位/mg
法律資訊
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
ESGRO is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。
标签许可-仅限于研究用途
白血病抑制因子(“LIF”)受AMRAD Corporation Ltd.拥有的美国专利号5,443,825和5,750,654以及加拿大专利号1,341,581和1,341,469的保护,并且仅授予Millipore用于研究用途。 本产品的使用仅限于研究用途,不得用于任何商业目的,例如使用本产品制作或开发其他研究产品,或将本产品用作研究试剂盒中的组件。 本产品不得在人类中使用或用于任何诊断目的。
购买者可以拒绝接受本标签许可的条件,只需将未开封的产品退回,我们将会全额退还其所支付的购买价。
购买本产品的营利性实体或商业研究实体应在购买后3个月内与Millipore公司签署单独的商业许可证。未经 Millipore 公司的明确书面许可,并且这些实体未经 Millipore 获得使用本产品的明确许可,研究人员不得将本产品或其衍生物转让给在其他非营利组织进行商业研究的研究人员,也不得转让给营利组织。除此处明确规定外,本产品的受让人无权将本产品或其衍生物转让给任何其他个人或实体。
标签许可-仅限于研究用途
白血病抑制因子(“LIF”)受AMRAD Corporation Ltd.拥有的美国专利号5,443,825和5,750,654以及加拿大专利号1,341,581和1,341,469的保护,并且仅授予Millipore用于研究用途。 本产品的使用仅限于研究用途,不得用于任何商业目的,例如使用本产品制作或开发其他研究产品,或将本产品用作研究试剂盒中的组件。 本产品不得在人类中使用或用于任何诊断目的。
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儲存類別代碼
10 - Combustible liquids
分析證明 (COA)
輸入產品批次/批號來搜索 分析證明 (COA)。在產品’s標籤上找到批次和批號,寫有 ‘Lot’或‘Batch’.。
文章
Development of a serum-free and feeder-free 2i naive stem cell media for pluripotent stem cells.
我們的科學家團隊在所有研究領域都有豐富的經驗,包括生命科學、材料科學、化學合成、色譜、分析等.
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