测序
对DNA或RNA链中核酸的组成和排列顺序进行确定的能力，对于了解现代遗传学以及对于疾病研究和更好了解所有生物都必不可少的众多领域，都具有深远的意义。核酸测序能力不仅可用于解码生物体的遗传密码，还可为研究人员提供强大的工具，通过结合其他分子技术来轻松操纵DNA序列，并通过测序而对这些改变进行验证。由于DNA的编码会作为蛋白质的编码信息，研究人员现已可定制设计含有大量不同功能性元件的重组蛋白，并将其广泛用于解答同样大量的重要研究问题。如需更多全基因组测序试剂和指导，请访问下一代测序资源。
Sanger法测序
早期，分析化学方法能够确定核酸的组成。但是，Fred Sanger及其同事们开发了一些方法（最初使用的是放射性标记的消化片段和二维分级分离）来提供最初的一些完整核酸序列。该领域的发展持续了数十年，且每次发展都扩大了已测序蛋白和基因组的阵容。这些发展包括使用凝胶电泳和毛细管电泳，并通过长度进行核苷酸分离。此外，荧光标记核苷酸的引入以及通过计算机而对每个核酸片段进行自动化分析，都定义了现代Sanger法测序。
DNA测序方法学
尽管DNA测序技术自问世以来一直在不断改进，但多个基础性组成部分仍然是必需的，并仍被用于现代DNA测序平台。DNA制备通常包括宿主生物DNA的分离和纯化。其他重要组成部分，包括游离DNA碱基、DNA引物、含有荧光标记的修饰DNA碱基（终止子碱基）以及DNA聚合酶，会被加入到一管中。含有所有这些组成部分的小管经过一系列的加热和冷却步骤后会产生一组相对于全长目标DNA序列较短的DNA序列，而每段序列末端都带有荧光末端标记的终止子碱基。这些含有荧光末端标记核苷酸的新DNA链可通过长度进行分离，并通过毛细管而根据大小进行排列。随后采用激光对每条链上的荧光碱基，并同时采用相机对信号进行采集。最后，通常会采用计算机将这些收集的信息组装成全长DNA序列。
相关技术文章
- After you have performed a CRISPR experiment it is important to determine which gRNAs performed successfully editing. There are many ways to validate CRISPR gene editing experiments. A quick and easy way to check for cutting is by using the Sigma-Aldrich® T7E1 mismatch detection kit.
- An ultrafiltration cartridge can be placed at the outlet of a water purification system to deliver nuclease-free ultrapure water.
- Expression of the Multiple Sclerosis-Associated MHC Class II Allele HLA-DRB1*1501 Is Regulated by Vitamin D
- Next-generation sequencing (NGS) revolutionized genomic research, and is now playing a crucial role in the clinical environment.
- Amino Acid Codon Wheel for fast RNA translation. Find which amino acid is translated from your RNA sequence quickly and easily.
- 查看完整内容 (7)
相关实验方案
- Learn about Sanger Sequencing steps or the chain termination method and how DNA sequencing works and how to read Sanger Sequencing results accurately for your research.
- 查看完整内容 (1)
若要繼續閱讀，請登入或建立帳戶。
還沒有帳戶？