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Merck

CAS9D10ARFPP

Sigma-Aldrich

CAS9D10A 质粒

别名:

CAS9D10A Plasmid

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About This Item

分類程式碼代碼:
41106609
NACRES:
NA.51

重組細胞

expressed in E. coli

品質等級

包裝

vial of 50 μL

濃度

20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)

啟動子

Promoter name: CMV

報告基因

RFP

選擇

kanamycin

運輸包裝

dry ice

儲存溫度

−20°C

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一般說明

Cas9-D10A切口酶共表达质粒RFP使用CMV启动子,可获得较强的Cas9-D10A瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。同时,使用XbaI酶切可使Cas9D10A表达质粒线性化,得到基于T7的mRNA产物。

應用

功能基因组
配对 Cas9 Nickase + RFP 用于:
  • 在多种细胞系中进行基因敲除
  • 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
  • 建立基因敲入细胞系,将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中

成分

1管含1μg Cas9-D10A Nickase-RFP质粒

请注意,该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。

外觀

2 μg Sigma Cas9-D10A 切口酶-RFP 质粒

其他說明

来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统经过包含两种分子元件,即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA),该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下,在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似,细胞随后会激活内源性DNA修复程序,即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR),对目标DSB进行修复。RFP通过2A肽段连接,与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达,实现了对转染效率的追踪,也能通过荧光激活细胞分选术(FACS)对基因组编辑活性进行富集。

法律資訊

CRISPR专利正在申请中

儲存類別代碼

10 - Combustible liquids

水污染物質分類(WGK)

nwg

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable


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