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MAB3430

Sigma-Aldrich

抗结蛋白抗体,克隆DE-B-5

clone DE-B-5, Chemicon®, from mouse

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

生物源

mouse

品質等級

抗體表格

purified antibody

無性繁殖

DE-B-5, monoclonal

物種活性

mouse, frog, pig, rat, human

製造商/商標名

Chemicon®

技術

immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable
western blot: suitable

同型

IgG1

NCBI登錄號

UniProt登錄號

運輸包裝

wet ice

目標翻譯後修改

unmodified

基因資訊

human ... DES(1674)

特異性

该抗体与人、猪、大鼠和taod的肌间线蛋白反应。 在组织切片中,该抗体用于染色骨骼、心脏、内脏和一些血管平滑肌细胞。 RD(ATCC CCL 136)和仓鼠BHK-21等细胞系均为阳性(Debus et al.,1983)。

免疫原

纯化的肌间线蛋白。

應用

使用已经验证可用于WB、IH、IH(P)、IH(P) 的抗-肌间线蛋白抗体克隆DE-B-5检测肌间线蛋白。
免疫细胞化学:(5 μg/ml )免疫组化: (5 μg/mL)预稀释和详细石蜡方案见IHC2011-6。



最佳工作稀释度必须由最终用户进行确定。

免疫组织/细胞化学方案

理想的标本是从速冻组织样品的冷冻切片中获得的。冰冻切片置空气中干燥后用丙酮在-20°C下固定10min。使过量的丙酮在15-25°C下蒸发。也可以使用酒精固定和石蜡包埋的物料(2)。甲醛固定将降低或消除染色强度,具体取决于执行的条件。 其他固定条件必须先由研究者测试。

在15-25°C下用胎牛血清覆盖切片20-30分钟,有利于阻断非特异性结合位点。在应用抗体溶液之前,通过倾析除去过量的胎牛血清。

单细胞或细胞涂片的细胞离心制备物也固定在丙酮中。但是,这些制备物不应在空气中干燥。而是通过在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中短暂洗涤来除去多余的丙酮。

进一步的处理如下:

• 用10-20μ l抗体溶液覆盖制备物,并在37°C的湿度箱中培养1小时。

• 将载玻片短暂浸入PBS中,然后在PBS中3分钟洗涤3次(每种情况下均使用新鲜的PBS浴)。

• 擦干制备物的边缘,用10-20 μl抗小鼠Ig-FITC溶液或抗小鼠IgG-过氧化物酶溶液覆盖制备物,并在湿度箱中于37°℃下培养1小时。

• 如上所述清洗载玻片。

在任何步骤中,不得使制备物干燥。

如果使用间接免疫荧光技术,则应使用合适的包埋介质(例如Moviol,Hoechst)覆盖制备物,并在荧光显微镜下检查。 如果将POD偶联物用作二抗,则应使用底物溶液(见下文)覆盖制备物,并在15-25°℃下培养直至出现清晰可见的红棕色。 在此培养期间,阴性对照(例如仅二抗)的颜色应保持不变。 随后,用PBS洗去底物,如果需要,将制备物用hemalum染色剂染色约1分钟。用PBS洗去hemalum溶液;将制备物包埋并检查。

底物溶液:

氨乙基咔唑: 将2 mg 3-氨基-9-乙基咔唑溶于1.2 ml二甲基亚砜并加入28.8 ml 50 mM Tris-HCl、pH值7.3和20 μl 3%H 2 O 2(w/v)中。每天制备新鲜溶液。 二氨基联苯胺: 将25 mg 3,3′-二氨基联苯胺溶于50 ml 50 mM Tris-HCl,pH值7.3并加入40 μl 3%H 2 O 2(w/v)。 每天制备新鲜溶液。
研究子类别
细胞骨架
研究类别
细胞结构

品質

蛋白质印迹分析: 1:1000 稀释

聯結

替代品:04-585

外觀

0.02 M磷酸盐缓冲液,0.25M NaCl和0.1%叠氮化钠,pH值7.6的液体。
形式:纯化

儲存和穩定性

抗体以未稀释的等分试样可在2-8°C冷藏保存长达6个月。不可冷冻。

其他說明

浓度:请参考批次特异性浓缩物的分析证书。

法律資訊

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責聲明

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。

儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 2

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable


分析证书(COA)

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