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一般說明
Wnt5a是高度保守的Wnt蛋白家族的成员,是一种有352个氨基酸的蛋白,含23个保守半胱氨酸,并含有由棕榈酸修饰的半胱氨酸,这是受体结合和生物活性所必需的。Wnt5a氨基酸序列还含有一个N端信号肽,这意味着该蛋白在细胞培养中表达时会分泌到培养基中。
Wnt配体与由卷曲蛋白和脂蛋白受体相关蛋白组成的细胞表面共受体结合(5/6)。Wnt 5a属于不依赖或抑制β-连环蛋白信号传导的非规范Wnt蛋白。当Wnt5a与其受体结合时,会触发细胞内Ca释放,激活PKC和CaMK11,进而激活TAK1 MAP激酶和nemo样(NLK)激酶。NLK磷酸化Lef1/TCF蛋白复合物,抑制β-连环蛋白Lef1/TCF DNA复合物的形成。相反,Wnt3a信号传导可稳定β-连环蛋白,促进β-连环蛋白Lef1/TCF DNA复合物的形成。
Wnt信号传导与干细胞分化的控制有关。Wnt也已显示在成年干细胞的调节中具有假定的作用。最近,向心脏注射胚胎干细胞已被证明可以纠正心脏缺陷。原理是通过干细胞分泌的因子来纠正邻近细胞的基因缺陷。Wnt5a是干细胞分泌的一种短期因子,已被证明对这一过程至关重要(Fraidenraich和Benzra,2006)。
Wnt配体与由卷曲蛋白和脂蛋白受体相关蛋白组成的细胞表面共受体结合(5/6)。Wnt 5a属于不依赖或抑制β-连环蛋白信号传导的非规范Wnt蛋白。当Wnt5a与其受体结合时,会触发细胞内Ca释放,激活PKC和CaMK11,进而激活TAK1 MAP激酶和nemo样(NLK)激酶。NLK磷酸化Lef1/TCF蛋白复合物,抑制β-连环蛋白Lef1/TCF DNA复合物的形成。相反,Wnt3a信号传导可稳定β-连环蛋白,促进β-连环蛋白Lef1/TCF DNA复合物的形成。
Wnt信号传导与干细胞分化的控制有关。Wnt也已显示在成年干细胞的调节中具有假定的作用。最近,向心脏注射胚胎干细胞已被证明可以纠正心脏缺陷。原理是通过干细胞分泌的因子来纠正邻近细胞的基因缺陷。Wnt5a是干细胞分泌的一种短期因子,已被证明对这一过程至关重要(Fraidenraich和Benzra,2006)。
产品来源:Wnt5a已从条件培养基中通过blue-Sepharose、凝胶过滤和肝素亲和层析纯化。
應用
• 该蛋白质具有极强的粘性,在没有Chaps洗涤剂的情况下会粘在塑料器皿上。
• 使用该蛋白时,如果可能的话,按所需的稀释倍数直接注射到细胞上,无需预先过滤。
• 使用Wnt5a蛋白前,应在细胞系上对储存缓冲液中的Chaps毒性进行经验测试。
• 一般而言,我们建议哺乳动物细胞上的Wnt5a最小稀释比为1:1000,这可以使Chaps的最终浓度对细胞无毒。
• 如果在几天/几周内对细胞给药,建议每天补充含Wnt5a的培养基,而不是每天给现有培养基中添加Wnt5a。这是因为Chaps累积不利于细胞生存。
• 使用该蛋白时,如果可能的话,按所需的稀释倍数直接注射到细胞上,无需预先过滤。
• 使用Wnt5a蛋白前,应在细胞系上对储存缓冲液中的Chaps毒性进行经验测试。
• 一般而言,我们建议哺乳动物细胞上的Wnt5a最小稀释比为1:1000,这可以使Chaps的最终浓度对细胞无毒。
• 如果在几天/几周内对细胞给药,建议每天补充含Wnt5a的培养基,而不是每天给现有培养基中添加Wnt5a。这是因为Chaps累积不利于细胞生存。
应确定每项应用的最优浓度。
包裝
8-10 μg/瓶
外觀
溶于PBS的冷冻液,含1.0% Chaps。
儲存和穩定性
将冷冻物料保持在-20°C,直至标签上注明的失效日期。 收到后,解冻并等分成一次性等分,储存在-20°C。一旦一次性等分已解冻,切勿再次冷冻。 解冻后的材料在摄氏4°C下最多可保存一个月。
分析報告
比活度:Wnt5a的生物活性已被证明能够在BMP4存在下拮抗C2C12成骨细胞诱导Wnt3a碱性磷酸酶合成。该效应的EC50通常为100 ng/mL
法律資訊
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
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儲存類別代碼
13 - Non Combustible Solids
水污染物質分類(WGK)
WGK 2
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
Embryonic stem cells prevent developmental cardiac defects in mice
Nature Clinical Practice. Cardiovascular Medicine, 3 Suppl 1, S14-S17 (2006)
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