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一般說明
对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。 每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+乙酰基组蛋白H4组包括纯化的兔多克隆抗血清和正常兔IgG抗血清,可用于证明乙酰基组蛋白H4抗体能够沉淀与乙酰基组蛋白H4相关的染色质。qPCR引物包括人GAPDH启动子的侧翼,并产生166个碱基对的PCR产物。
ChIPAb+乙酰基组蛋白H4组包括纯化的兔多克隆抗血清和正常兔IgG抗血清,可用于证明乙酰基组蛋白H4抗体能够沉淀与乙酰基组蛋白H4相关的染色质。qPCR引物包括人GAPDH启动子的侧翼,并产生166个碱基对的PCR产物。
特異性
基于序列相似性,预测真核生物之间广泛的交叉反应性。
识别约10 kDa的乙酰化组蛋白H4。与四膜虫的乙酰化组蛋白H2B发生交叉反应,与HeLa细胞的乙酰化组蛋白H2B发生弱交叉反应。
可能与其他乙酰化蛋白质发生交叉反应。
可能与其他乙酰化蛋白质发生交叉反应。
免疫原
针对对应于四膜虫组蛋白H4的氨基酸2-19的肽制备乙酰基组蛋白H4抗血清。
應用
研究子类别
组蛋白
组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能
表观遗传学&核功能
蛋白质印迹分析:
来自正常HeLa细胞(泳道1)和经5 mM丁酸钠处理24小时的HeLa细胞(泳道2)的酸提取蛋白通过电泳分离,转移到硝酸纤维素膜上,并用抗乙酰化组蛋白H4(1:2000)探测。
使用与HRP偶联的山羊抗兔二抗和化学发光检测系统可视化蛋白质。(请参见图)。
来自正常HeLa细胞(泳道1)和经5 mM丁酸钠处理24小时的HeLa细胞(泳道2)的酸提取蛋白通过电泳分离,转移到硝酸纤维素膜上,并用抗乙酰化组蛋白H4(1:2000)探测。
使用与HRP偶联的山羊抗兔二抗和化学发光检测系统可视化蛋白质。(请参见图)。
该ChIPAb+乙酰基组蛋白H4-ChIP验证的抗体&引物组方便地包括抗体 &特异性对照PCR引物。
包裝
每组25次测定。每个染色质免疫沉淀约4 μL
品質
染色质免疫沉淀:
使用4 μL正常兔抗血清或抗乙酰化组蛋白
H4血清和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610),对从未处理HeLa细胞制备的超声染色质(1 X 106细胞当量)进行染色质免疫沉淀。使用人GAPDH引物侧翼的对照ChIP引物,通过qPCR验证了与乙酰化组蛋白H4相关的DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。
关于实验详细信息,请参阅EZ-Magna AChIP (目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案。
使用4 μL正常兔抗血清或抗乙酰化组蛋白
H4血清和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610),对从未处理HeLa细胞制备的超声染色质(1 X 106细胞当量)进行染色质免疫沉淀。使用人GAPDH引物侧翼的对照ChIP引物,通过qPCR验证了与乙酰化组蛋白H4相关的DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。
关于实验详细信息,请参阅EZ-Magna AChIP (目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案。
標靶描述
10 kDa
外觀
抗乙酰组蛋白H4(兔多克隆IgG)。一个小瓶含有100 μL抗血清(含0.05%叠氮化钠)。储存在-20°C。
正常兔血清。一个小瓶含有100 uL抗血清(含0.05%叠氮化钠)。储存在-20 °C。
对照引物。一个小瓶含有75 μL的5 μM人GAPDH特异性引物。
正常兔血清。一个小瓶含有100 uL抗血清(含0.05%叠氮化钠)。储存在-20 °C。
对照引物。一个小瓶含有75 μL的5 μM人GAPDH特异性引物。
儲存和穩定性
自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。
分析報告
对照
包括阴性对照兔IgG抗血清和对人GAPDH启动子特异性的对照引物。
包括阴性对照兔IgG抗血清和对人GAPDH启动子特异性的对照引物。
法律資訊
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
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儲存類別代碼
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