Kits de enzimoinmunoanálisis de absorción (ELISA)
Un ELISA (enzimoinmunoanálisis de absorción) es un inmunoanálisis en placas de múltiples pocillos en el que uno de los componentes del ensayo, normalmente un anticuerpo o muestra, se adsorbe a una superficie sólida, en este caso, una placa. Al ofrecer una detección rápida, cuantitativa y sensible de los analitos a un coste relativamente bajo, los ELISA representan uno de los formatos de análisis más sencillos de realizar. Además, la facilidad de adaptar un ELISA a un método de cribado de mayor rendimiento permite a los investigadores probar grandes cantidades de muestras en una sola ejecución.
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ELISA tipo sándwich, directo y competitivo
Nuestros ELISA constituyen un método cómodo y fácil de usar para estudiar biomarcadores proteicos solubles en una variedad de matrices, como suero, plasma, sobrenadante de cultivo celular o lisado. Nuestra oferta de ELISA consiste en >1 000 ensayos de uso exclusivo en investigación, contra una amplia variedad de especies, como la humana, ratones, ratas y otros modelos animales (agrícolas y complementarios). Cada análisis viene con un protocolo específico y los reactivos necesarios para procesar una placa de 96 pocillos. Los ELISA existen principalmente en un formato de 96 pocillos y el proveedor proporciona los reactivos necesarios para detectar y cuantificar el objetivo. Hay una variedad de métodos ELISA, como sándwich, directo y competitivo.
En el ensayo en sándwich se utiliza un par de anticuerpos monoclonales (AcM) contra diferentes epítopos frente al mismo objetivo. El AcM primario, unido a la placa, extrae la proteína de la disolución, mientras que el segundo AcM se utiliza para completar el “sándwich” y proporciona la señal que indicará la presencia del objetivo. Con el kit se proporciona una cantidad conocida de la versión recombinante de la proteína, lo que permite al usuario crear una curva patrón contra la que se interpretará la señal de una de las muestras. La mayor parte de nuestra cartera tiene este formato ELISA tipo sándwich.
Los análisis ELISA directos y competitivos son más raros. En el ensayo directo se utiliza un solo AcM para detectar la muestra que está unida a la placa. A continuación, el AcM se une a un anticuerpo secundario reportero para proporcionar la señal.
En el ensayo competitivo hay una cantidad conocida del biomarcador pre-unido a la placa. Se incuba un anticuerpo marcado con la muestra que “limpia” el anticuerpo en función de la concentración del objetivo en la muestra. A continuación, el anticuerpo libre puede unirse al antígeno de la placa y proporcionar una señal después de haberse lavado la muestra. En este caso, la señal es inversamente proporcional a la concentración del biomarcador objetivo.
Software de ajuste de curvas de inmunoanálisis Conferma™ ELISA y Belysa®
La marca Conferma™ ELISA consta de ensayos en sándwich diseñados para minimizar la variabilidad lote a lote al nivel crítico de reactivo, una preocupación clave de los usuarios del ensayo. La evaluación de los lotes individuales de reactivos cruciales con una gama de técnicas analíticas alineadas con un protocolo de control de calidad (QC) detallado nos permite controlar y limitar la variabilidad con el tiempo.
Con el fin de permitir a los científicos evaluar la reproducibilidad de su método, diseñamos el software de ajuste de curvas de inmunoanálisis Belysa®. Con esta herramienta, un usuario puede examinar su inmunoanálisis tipo sándwich para garantizar que parámetros como el %CV (coeficiente de variación) y el %Recuperación estaban dentro de lo esperado. A continuación, pueden pasar a comparar las curvas patrón de diversas placas para confirmar que su método era uniforme.
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