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Merck

T4674

Sigma-Aldrich

Tripsina solution from porcine pancreas

sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 25 g porcine trypsin per liter in Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red

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About This Item

Número de CAS:
MDL number:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.78

biological source

Porcine pancreas

Quality Level

sterility

sterile-filtered

product line

BioReagent

form

solution

mol wt

23.4 kDa

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

impurities

Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)

pH

7.6

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

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Application

Para la digestión de los péptidos con tripsina, utilice una proporción de aproximadamente 1:100 a 1:20 de tripsina:péptido. La utilización habitual de este producto es la separación de las células adherentes de una superficie de cultivo. La concentración necesaria de tripsina para separar las células de su sustrato depende fundamentalmente del tipo de célula y de la edad del cultivo. También se han utilizado tripsinas para la re-suspensión de células durante el cultivo celular, en investigación en proteómica para la digestión de proteínas y en varias digestiones en gel. Otras aplicaciones son la evaluación de la cristalización mediante técnicas de membrana y en un estudio para determinar que las tasas de plegado y los rendimientos de las proteínas pueden limitarse por la presencia de trampas cinéticas.

Biochem/physiol Actions

La tripsina rompe los péptidos por el lado C-terminal de los restos de lisina y de arginina. La velocidad de hidrólisis de esta reacción se reduce si a cada lado del punto de rotura hay un residuo ácido, y la hidrólisis se interrumpe si en el lado carboxilo del sitio de ruptura hay un resto de prolina. El pH óptimo de actividad de la tripsina es 7-9. La tripsina también puede actuar rompiendo las uniones éster y amida de los derivados sintéticos de aminoácidos. Se añade EDTA a las disoluciones de tripsina como agente quelante que neutraliza los iones de calcio y de magnesio, los cuales ocultan los enlaces peptídicos sobre los que actúa la tripsina. La eliminación de esos iones aumenta la actividad enzimática.

Los inhibidores de las proteasas de serina, como DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF y la aprotinina, entre otros, inhibirán la tripsina.

Caution

Este producto debe conservarse congelado a -20°C.

Unit Definition

Una unidad BAEE producirá un A253 de 0,001 por minuto a pH 7,6 y 25°C utilizando BAEE como sustrato.

Preparation Note

Se trata de una disolución de tripsina porcina 25 g/l en la disolución salina equilibrada de Hank con rojo fenol.

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pictograms

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Skin Sens. 1

Storage Class

10 - Combustible liquids

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WGK 3

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Protocolos

Trypsin may be used to remove adherent cells from a culture surface. Cells are most commonly removed from the culture substrate by treatment with trypsin or trypsin/EDTA solutions.

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