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Merck

BLNI-RO

Roche

Bln I (AVR II)

from Brevibacterium linens

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About This Item

UNSPSC Code:
12352204

biological source

bacterial (Brevibacterium linens)

Quality Level

form

solution

specific activity

10000 U/mL

packaging

pkg of 1,000 U (11558170001 [10 U/μl])
pkg of 200 U (11558161001 [10 U/μl])

manufacturer/tradename

Roche

parameter

37 °C optimum reaction temp.

color

colorless

pH

8.1 (39 °F)

solubility

water: miscible

suitability

suitable for molecular biology

application(s)

life science and biopharma
sample preparation

foreign activity

Endonucleases, none detected (up to 20 U with MWM II-DNA)
Endonucleases, none detected (up to 20U with pBR 322-DNA)

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

General description

Bln I reconoce la secuencia C↓CTAGG y genera fragmentos con extremos 5′-cohesivos.

Extremos compatibles
Los extremos bln I son compatibles con los extremos generados por Nhe I, Spe I y XBA I.

Isosquizómeros
El bln i es un isosquizómero de Avr II
Nota: Se ha comunicado el mapa completo de restricción Avr II sitio 13 del genoma de E.coli.

Sensibilidad a la metilación
No se sabe que la enzima se vea afectada por la metilación.

Specificity

Sitios de reconocimiento: CCTAGG
CCTAGG
Sitio de restricción: C↓CTAGG
C↓CTAGG
Inactivación por calor: No inactivación de Bln I después de la incubación a 65 °C durante 15 minutos.

Quality

Ausencia de actividades endonucleasas inespecíficas
Se incuba 1 μg λde ADN durante 16 horas en 50 μl de tampón Sure/Cut H con un exceso de Bln I. El número de unidades enzimáticas que no cambian el patrón enzimático específico se indica en el certificado de análisis.

Ausencia de actividad exonucleasa
Aproximadamente 5 μg de ADN de timo de ternero marcado con [3H] se incuban con 3 μl de Bln I durante 4 horas a +37°C en un volumen total de 100 μl de Tris-HCl 50 mM, MgCl2 10 mM, ditioeritritol 1 mM, pH aproximado de 7,5. En estas condiciones, no se detecta liberación de radiactividad, como se indica en el certificado de análisis.

Ensayo típico de ligadura y recorte
Fragmentos de bln I obtenidos por digestión completa de 1 μg λ × EcoR I ADN ligado durante 16 horas a +4°C con 1 U de ADN Ligasa T4 en 10 μl de tampón que contiene Tris-HCl 66 mM, MgCl2 5mM, ditiotreitol 5 mM, ATP 1 mM, pH 7,5 (a +20°C). Los porcentajes de producto que pueden ligarse y luego volverse a cortar con Bln I y EcoR I (que producen el patrón típico de los fragmentos λ × EcoR I × Bln I) se indican bajo "Lig" y "Rec" en el certificado de análisis.

DNA Profile

Número de sitios de escisión en diferentes ADN
  • λ: 2
  • φX174: 0
  • Ad2: 2
  • M13mp7: 0
  • M13mp18:0
  • pBR322: 0
  • pBR328: 0
  • pUC18: 0
  • SV40: 2

Unit Definition

Una unidad es la actividad enzimática que rompe por completo fragmentos de ADN 1 μg λ x ECOR I en una hora a +37 °C en un volumen total de 25 μl (1x) de tampón SuRE/Cut Buffer H.

Storage and Stability

No conservar por debajo de −25°C.

Analysis Note

PFGE analizado
Bln I ha sido probado en electroforesis en gel de campo pulsado (en cromosomas bacterianos). Para la escisión del ADN genómico (E.coli C 600) incluido en agarosa para el análisis mediante PFGE, se recomienda utilizar 10 U de enzima/μg de ADN y 4 horas de incubación.
Sistema de tampón Sure/Cut
El tampón en negrita se recomienda para una actividad óptima
  • A: 25 - 50 %
  • B: 50 - 75%
  • H: 100 %
  • L: 0-10 %
  • M: 25 - 50%

Actividad en tampón para PCR: No se ha probado

Other Notes

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos de diagnóstico.

Solo componentes del kit

Referencia del producto
Descripción

  • Enzyme Solution

  • SuRE/Cut Buffer H 10x concentrated

Storage Class

12 - Non Combustible Liquids

wgk_germany

WGK 1

flash_point_f

does not flash

flash_point_c

does not flash


Certificados de análisis (COA)

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Artículos

The term “Restriction enzyme” originated from the studies of Enterobacteria phage λ (lambda phage) in the laboratories of Werner Arber and Matthew Meselson.

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Restriction endonucleases popularly referred to as restriction enzymes, are ubiquitously present in prokaryotes. The function of restriction endonucleases is mainly protection against foreign genetic material especially against bacteriophage DNA.

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