mPAGE^® Bis-Tris 프리캐스트 겔을 이용한 겔 전기영동

mPAGE^® Bis-Tris 프리캐스트 겔은 예산을 초과하지 않으면서 바로 공개가 가능한 결과에 필요한 높은 분해능을 제공합니다. 더 짧은 분리 시간(최대 15분 이내)으로 동일한 단백질 분리를 실현하는 이 가성비 출중한 용액은 대부분의 전기영동 탱크에서 사용하기에 적합합니다. 요구 사항을 최대한 충족하면서도 시간과 비용을 절약하려면 지금 mPAGE^® 프리캐스트 겔로 전환하십시오. 

• 적은 비용으로 바로 우수한 단백질 분해능 제공
• Merck 포함 타사의 전기영동 장치와 호환 가능
• 웰 당 검체 80μL까지 사용 가능
• 효율적인 wet 및 semi-dry 웨스턴 블롯 전사
• 기존 젤 대비 최대 15분 짧은 러닝 시간
• 중성 pH로 단백질 변형 방지

• mPAGE^® 프리캐스트 겔을 사용한 단백질 분리 및 멤브레인 전달
• mPAGE^® 프리캐스트 겔 선택 방법
• mPAGE^® 겔 교차 참조 지침
• 주문 정보: mPAGE^® 겔, 버퍼 및 액세서리

mPAGE^® 프리캐스트 겔을 사용한 단백질 분리 및 멤브레인 전달

폴리아크릴아마이드 겔 전기영동법(PAGE)은 전기영동 이동성에 따른 단백질 분리에 널리 사용되는 기술입니다. 단백질은 native-PAGE를 통해 고유한(또는 접힌) 상태로 분리될 수 있지만 대체로 분리 전에 디티오트레이톨(DTT)과 같은 환원제와 함께 황산도데실나트륨(SDS)을 사용하여 화학적으로 변성되거나 풀립니다. SDS PAGE 겔은 분자량을 기준으로 단백질을 분리하는 데 사용되며, 알려진 분자량의 단백질을 포함하는 표준 물질(사다리)과 검체를 서로 비교합니다.

분리

겔 전기영동의 분리 시간은 겔과 단백질 분리 조건에 따라 달라집니다. mPAGE^® bis-tris 프리캐스트 겔은 분해능이 저하되지 않고도 시중에서 구입할 수 있는 유사한 프리캐스트 겔보다 분리 시간이 짧은(최대 15분) 것으로 나타났으며(그림 1) 시간과 비용을 절약하는 데 도움이 됩니다.

그림 1. mPAGE^® Bis-Tris 프리캐스트 겔(4~12%)을 경쟁사의 프리캐스트 Bis-Tris 겔과 비교하는 MOPS 전기영동용 버퍼를 이용한 단백질 분리. 검체: 염색되지 않은 단백질 마커, 대장균(E.coli) 추출물의 계열 희석.

멤브레인 전달

분리된 단백질은 멤브레인으로 전달되며 대체로 웨스턴 블로팅(Western Blotting)(면역 블로팅) 또는 다른 검출 기법에 사용됩니다. 웨스턴 블로팅(Western Blotting) 프로토콜에 따라 단백질은 주로 wet 전사법(탱크) 또는 semi-dry 전사법을 사용하여 전기영동으로 전달됩니다. mPAGE^® bis-tris 프리캐스트 겔은 wet 전사 및 semi-dry 전사 모두에 대해 효율적인 단백질 전달 효과를 제공합니다(그림 2 참조).

그림 2. mPAGE^® 4~12% 겔에 로딩되어 표준 방법으로 Immobilon^®-P 멤브레인에 전달된 A431 세포 용해물의 연속 희석액. EGFR(180 kDa), AKT1(60 kDa) 및 히스톤(17 kDa)에 대한 항체를 통해 검출된 블롯. 과산화효소 결합 이차 항체 및 Immobilon^® Forte 화학발광 기질로 검출된 항체.

mPAGE^® 프리캐스트 겔 선택 방법

SDS-PAGE용 프리캐스트 겔은 분리되는 단백질의 크기에 따라 선택됩니다. 프리캐스트 겔은 다양한 고정 아크릴아마이드 비율(%)로 제공되며 또는 겔 전체에서 이 비율이 변동하는 기울기에 따라 제공됩니다. 일반적으로 고정 아크릴아마이드 비율이 낮은 겔은 고분자량 단백질을 분리하는 데 사용되며 동 비율이 높은 겔은 저분자량 단백질을 분리하는 데 사용됩니다. 구배 겔(Gradient gel)은 고정 비율 겔보다 더 넓은 범위의 단백질을 분리할 수 있습니다. MOPS 또는 MES 전기영동용 버퍼의 선택은 단백질 분리의 세부 조정에 사용할 수 있습니다. MOPS는 더 높은 범위의 겔에서 단백질 분리를 개선할 수 있으며 MES는 더 낮은 범위의 겔에서 단백질 분리를 개선할 수 있습니다. MOPS(그림 3) 및 MES 버퍼(그림 4)에 대한 아래의 이동 차트를 사용하여 전기영동 응용분야에 가장 적합한 mPAGE^® 겔 및 버퍼를 식별하십시오.

mPAGE^® 겔 교차 참조 지침

Merck의 mPAGE^® 겔 교차 참조 문서는 일반적인 TruPAGE™ 제품을 교체하려는 고객을 위한 권고 지침을 제공합니다.