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Saggi di migrazione e invasione cellulare

Immagine al microscopio del saggio scratch Cell Comb per l’analisi della migrazione cellulare

Le metastasi tumorali sono il risultato di molteplici alterazioni delle cellule tumorali e del microambiente che le circonda che consentono alle cellule di migrare o invadere i tessuti sani. Il nostro portafoglio di saggi di migrazione e invasione e della chemiotassi e aptotassi mediante camera di Boyden, consente ai ricercatori di simulare le condizioni dalle cellule normali e metastatiche presenti in vivo.

Saggi di migrazione cellulare

La migrazione cellulare è fondamentale per lo sviluppo embrionale, l'angiogenesi, la guarigione delle ferite, la risposta immunitaria e l'infiammazione. Poiché la malattia metastatica è il fattore chiave che porta alla mortalità dovuta a tumore, la comprensione dei meccanismi di migrazione cellulare è di fondamentale importanza negli studi sul cancro. Molti saggi di migrazione cellulare si basano su di un saggio scratch qualitativo o sulla tecnica della camera di Boyden, più quantitativa.

La tecnica della camera di Boyden monitora la migrazione cellulare legata a chemiotassi e aptotassi. La chemiotassi descrive la migrazione cellulare in risposta a segnali chimici extracellulari, mentre l'aptotassi descrive la migrazione cellulare verso un gradiente di siti proteici legati alla matrice extracellulare (ECM).

I saggi di migrazione QCM™ per chemiotassi e aptotassi sono disponibili con pori di diverse dimensioni e formati multipozzetto. I saggi di migrazione QCM™ non richiedono la marcatura, il raschiamento, il lavaggio e il conteggio delle cellule associati ai protocolli basati su marcatura con calceina-AM.

I saggi di migrazione cellulare InnoCyte™ in formato multi-pozzetto sono destinati all’analisi della migrazione cellulare per chemiotassi. Questi saggi misurano la migrazione di cellule epiteliali, mesenchimali ed endoteliali attraverso pori di 8 μm in direzione di un feeder layer utilizzando un colorante fluorescente permeabile alle cellule.

Saggio scratch per l'analisi della migrazione cellulare

Il saggio scratch viene utilizzato per studiare la migrazione cellulare e la guarigione delle ferite. Nel saggio scratch viene effettuato un graffio sulla superficie di un monostrato di cellule confluenti per creare uno stretto spazio senza cellule, simile a una ferita. Il test monitora quindi la migrazione delle cellule rimaste sui bordi verso lo spazio vuoto, fino a quando esso non viene riempito. Il nostro saggio scratch Cell Comb™ crea una serie di graffi molto ravvicinati per massimizzare i numero di bordi e di spazi vuoti da riempire, lasciando allo stesso tempo un numero adeguato di cellule intatte che possano migrare nello spazio vuoto.

L’invasione da parte di cellule HT-1080 è determinata mediante saggio di invasione cellulare a 96 pozzetti. Le cellule invasive sono visualizzate mediante colorazione con cristalvioletto, usando cellule NIH3T3 come controllo negativo.

Saggi di invasione cellulare

La capacità di un tumore di degradare i componenti dell'ECM della membrana basale e dei tessuti associati è indice del suo potenziale metastatico. I nostri saggi di invasione cellulare QCM™mediante camera di Boyden, rappresentano un approccio sensibile e ad alto rendimento per quantificare l'invasione cellulare in vitro. In questi saggi viene valutata l’invasione delle cellule su un modello di membrana basale in cui i pori di una membrana sono ostruiti da uno strato di proteine della ECM che bloccano le cellule non invasive.

Il saggio di crescita dei neuriti Chemicon® utilizza la tecnologia degli inserti microporosi per colture di tessuti Millipore® che permette il passaggio dei neuriti attraverso una membrana con pori di 1 µm, diametro che non consente invece il passaggio dei corpi cellulari. Q.Questo saggio è ottimizzato per cellule PC12.





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