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Miscela di fenolo-cloroformio-alcol isoamilico

BioUltra, for molecular biology, 25:24:1

• Numero CAS: 136112-00-0
• Numero MDL: MFCD00133763
• Codice UNSPSC: 12352401
• ID PubChem: 329767815
• NACRES: NA.25

Proprietà

• Grado: for molecular biology
• Livello qualitativo: 200
• Nome Commerciale: BioUltra
• Forma fisica: liquid
• tecniche: ChIP: suitable; DNA extraction: suitable; DNA purification: suitable
• Impurezze: DNases, none detected; RNases, none detected; phosphatases, none detected; proteases, none detected
• pH: 7.2-8.3(H₂O-phase, after extraction with H₂O, 1:1)
• Densità: 1.28 g/mL at 20 °C
• Assorbimento: cut-off at 360 nm
• Compatibilità: suitable for molecular biology
• applicazioni: agriculture
• Temperatura di conservazione: 2-8°C
• Stringa SMILE: ClC(Cl)Cl.CC(C)CCO.Oc1ccccc1
• InChI: 1S/C6H6O.C5H12O.CHCl3/c7-6-4-2-1-3-5-6;1-5(2)3-4-6;2-1(3)4/h1-5,7H;5-6H,3-4H2,1-2H3;1H; ZYWFEOZQIUMEGL-UHFFFAOYSA-N

Descrizione

Descrizione generale

La miscela fenolo-cloroformio-alcol isoamilico (miscela PCI) è una miscela ampiamente utilizzata nella ricerca in biologia molecolare e in biochimica, specifica per la purificazione di acidi nucleici, compresi DNA ed RNA. Con la sua composizione canonica 25% fenolo, 24% cloroformio e 1% alcol isoamilico, la miscela PCI gioca un ruolo cardinale nel separare le proteine dagli acidi nucleici nel corso del processo di purificazione. Il fenolo denatura le proteine, il cloroformio costituisce uno strato specifico in cui intrappolarle e l′alcol isoamilico favorisce la separazione netta di questi due strati, così da isolare DNA o RNA purificati nella fase acquosa.
Diverse sono le applicazioni della miscela PCI; tra queste, l′isolamento dell′RNA, procedura nella quale consegue l′estrazione dell′RNA da tessuti animali e vegetali per analisi downstream quali la trascrizione inversa o per studi di espressione genica. Inoltre, la miscela PCI di dimostra di grande aiuto nell′estrazione del DNA, consentendo un recupero efficace per svariate applicazioni, tra cui il fingerprinting basato su minisatelliti DNA per l′identificazione genetica. A livello di tecnica di purificazione di uso generale, la miscela PCI garantisce preparazioni di DNA e di RNA di alta qualità da sottoporre poi a ricerca.

Applicazioni

La miscela di fenolo−cloroformio−alcol isoamilico è stata usata nell′estrazione degli acidi nucleici da tessuto del dotto biliare, Drosofila, cromatina e nell′immunoprecipitazione dell′RNA in Caenorhabditis elegans e nel DNA mitocondriale.E, inoltre, anche nell′estrazione di DNA per la generazione di impronte digitali genetiche (fingerprints) contenenti minisatelliti di DNA

Azioni biochim/fisiol

Impiegando la miscela di fenolo-cloroformio-alcol isoamilico per estrarre gli acidi nucleici, si ottiene una separazione netta dei componenti di interesse. Le proteine presenti nel campione vengono denaturate e rimosse (si raccolgono nella fase organica o nell′interfase), mentre gli acidi nucleici restano nella fase acquosa. Il cloroformio denatura le proteine e favorisce la separazione della fase acquosa da quella organica, mentre l'alcool isoamilico riduce la formazione di schiuma durante l′estrazione.

Caratteristiche e vantaggi

• Versatile e adattabile ad un′ampia varietà di applicazioni di laboratorio e di ricerca
• Privo di Dnasi, Rnasi, nickasi e proteasi

Stato fisico

miscela di fenolo, cloroformio, alcol isoamilico in rapporto 25:24:1 (v/v/v); saturata con TRIS 100 mM, pH 8.0; contiene lo 0,1% circa di 8-idrossichinolina

Altre note

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Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS05,GHS06,GHS08,GHS09
• Avvertenze: Danger
• Indicazioni di pericolo: H301 + H331 - H312 - H314 - H336 - H341 - H351 - H361d - H372 - H373 - H411
• Consigli di prudenza: P202 - P273 - P280 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338
• Classi di pericolo: Acute Tox. 3 Inhalation - Acute Tox. 3 Oral - Acute Tox. 4 Dermal - Aquatic Chronic 2 - Carc. 2 - Eye Dam. 1 - Muta. 2 - Repr. 2 - Skin Corr. 1B - STOT RE 1 Oral - STOT RE 2 - STOT SE 3
• Organi bersaglio: Central nervous system
• Codice della classe di stoccaggio: 6.1A - Combustible, acute toxic Cat. 1 and 2 / very toxic hazardous materials
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 3
• Punto d’infiammabilità (°F): 174.2 °F
• Punto d’infiammabilità (°C): 79 °C
• Dispositivi di protezione individuale: Faceshields, Gloves, Goggles, type ABEK (EN14387) respirator filter