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MABE1109

Sigma-Aldrich

Anticorpo anti-HHV-8 LNA-1, clone LN53

clone LN53, from rat

Sinonimo/i:

HHV-8/KSHV Orf73 LANA, HHV-8/KSHV Orf73 LNA, HHV-8/KSHV Orf73 LNA-1, HHV-8/KSHV Orf73 latency-associated nuclear antigen, HHV-8/KSHV Orf73 latent nuclear antigen, HHV-8/KSHV Orf73 latent nuclear antigen-1

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About This Item

Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

Origine biologica

rat

Livello qualitativo

Forma dell’anticorpo

purified immunoglobulin

Tipo di anticorpo

primary antibodies

Clone

LN53, monoclonal

Reattività contro le specie

human, rhesus macaque

tecniche

ELISA: suitable
flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable

Isotipo

IgG2cκ

N° accesso Genebanck

N° accesso NCBI

N° accesso UniProt

Condizioni di spedizione

ambient

modifica post-traduzionali bersaglio

unmodified

Descrizione generale

L′herpesvirus-8 umano/herpesvirus associato a sarcoma di Kaposi (HHV-8/KSHV) umano e l′herpesvirus in cellule di fibromatosi peritoneale di macaco (RFHV) sono stati identificati per la prima volta nell′uomo in pazienti affetti da AIDS in associazione con sarcoma di Kaposi (KS) e nei macaco affetti da AIDS di scimmia all′interno delle lesioni tumorali di fibromatosi retroperitoneale (RF). La proteina più espressa nelle cellule esposte a infezione latente da parte di KSHV e RFHV è il prodotto del gene Orf73 noto come antigene nucleare associato a latenza (LANA o LNA). LANA è una proteina nucleare deputata a garantire la conservazione del genoma virale imbrigliando il DNA episomale virale ai cromosomi della cellula ospite. LANA regola anche il programma di trascrizione cellulare nelle cellule ospiti grazie all′interazione con numerose proteine cellulari, come i regolatori della trascrizione e i noti soppressori tumorali p53 e pRB. Inoltre, LANA influenza il programma di trascrizione virale e contribuisce a mantenere lo stato latente del virus inibendo la replicazione virale. La proteina LANA di KSHV contiene un dominio N-terminale ricco di serine e proline dotato di un segnale di localizzazione nucleare (NLS), un motivo di legame alla cromatina (CBM) e domini responsabili dell′interazione con i regolatori della trascrizione, il complesso mSin3 e Sp1. Il dominio centrale contiene numerose regioni acide altamente ripetitive di lunghezza variabile, dalle quali dipende la diversa lunghezza delle proteine LANA riscontrabile in isolati diversi di KSHV che può variare da 1003 a 1162 amminoacidi. Il terzo dominio C-terminale ricco di proline contiene un altro NLS ed è responsabile della dimerizzazione di LANA e del legame alle ripetizioni terminali (TR) del DNA genomico virale. L′interazione con i soppressori tumorali p53 e pRB avviene a livello del dominio C-terminale.

Specificità

Il clone LN53 riconosce i motivi strutturali ripetuti EQEQE ed EPEPE dell′acido glutammico presenti nella regione ripetuta ricca di Glu rispettivamente presenti nell′antigene nucleare associato a latenza (LANA o LNA) codificato dal gene Orf73 dell′herpesvirus associato a sarcoma di Kaposi umano (KSHV o HHV-8) e dell′herpesvirus delle cellule di fibromatosi retroperitoneale di scimmia (RFHV).
KSHV (HHV8) di uomo e RFHV di scimmia.

Immunogeno

Proteine di fusione tra i frammenti C-terminali di HHV-8 LNA-1 e GST, purificate per affinità (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).

Applicazioni

Analisi ELISA: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare i costrutti ricombinanti HHV-8 LNA-1 contenenti la regione ripetitiva degli aa 803-929 (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).

Analisi di citometria a flusso: un lotto rappresentativo ha rivelato l′immunoreattività per HHV-8 LNA-1 in cellule BCP-1, BC-3 e HBL-6 ma non in cellule di Daudi o Ramos (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).
Immunocitochimica: con un lotto rappresentativo è stata ottenuta la rivelazione in fluorescenza dell′espressione transiente della proteina ORF73 di KHSV (HHV-8 LANA o LNA-1) e ORF7 di herpesvirus in cellule di fibromatosi retroperitoneale (RF) di un macaco rhesus (RFHV LANA) nei nuclei di cellule COS transfettate. Non è stata rivelata reattività verso le proteine MneRV2 di macaco nemestrino e RRV LANA di macaco rehsus (Burnside, K.L., et al. (2006). Virology. 354(1):103-115).
Immunocitochimica: con un lotto rappresentativo è stata ottenuta l′immunorivelazione in fluorescenza dei corpi nucleari positivi per HHV-8 LNA-1 nella linea cellulare BCP-1 di linfoma a effusione primaria (PEL) ma non in cellule Daudi o Ramos (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).
Immunoistochimica: Nei nuclei di cellule tumorali ottenute dalla biopsia di una fibromatosi retroperitoneale (RF) di un macaco nemestrino infettato con il virus SIV, fissate in formalina e incluse in paraffina, è stata rivelata l′immunoreattività per RFHVMn LANA. Non è stata rilevata immunoreattività nelle sezioni di tessuto di digiuno di macaco normale (Burnside, K.L., et al. (2006). Virology. 354(1):103-115).

Immunoistochimica: con alcuni lotti rappresentativi è stata ottenuta l'immunocolorazione di cellule infettate in modo latente con HHV-8 su sezioni di tessuti inclusi in paraffina derivati da macule, placche e noduli di sarcoma di Kaposi (KS), malattia di Castleman multicentrica (MCD) e linfoma a effusione primaria (PEL) (Codish, S., et al. (2000). Am. J. Hematol. 65(4):310-314; Dupin, N., et al. (2000). Blood. 95(4):1406-1412; Dupin, N., et al. (1999). Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 96(8):4546-4551).

Immunoistochimica: un lotto rappresentativo ha rivelato l′immunoreattività per HHV-8 LNA-1 nei nuclei delle cellule presenti all′interno di lesioni nodulari di sarcoma di Kaposi, ma non nel derma circostante, dopo colorazione immunoistochimica di sezioni classiche di KS incluse in paraffina (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).
Immunoprecipitazione: con un lotto rappresentativo è stata ottenuta l′immunoprecipitazione di HHV-8 LNA-1 (220/230 kDa) dalla linea cellulare BC-3 di linfoma a effusione primaria (PEL) ma non da cellule Ramos (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).
Western blotting: un lotto rappresentativo ha rivelato l′espressione transiente delle proteine ORF73 di KHSV (HHV-8 LANA o LNA-1) e ORF7 di herpesvirus in cellule di fibromatosi retroperitoneale di un macaco rhesus (RFHV LANA) nel lisato di cellule COS transfettate. Non è stata rivelata reattività verso le proteine MneRV2 di macaco nemestrino e RRV LANA di macaco rehsus (Burnside, K.L., et al. (2006). Virology. 354(1):103-115).

Western blotting: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare la doppia banda di HHV-8 LNA-1 di 220/230 kDa nel lisato della linea cellulare BC-3 di linfoma a effusione primaria (PEL) ma non in cellule Ramos (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).
L′anticorpo anti-HHV-8 LNA-1, clone LN53, N° Cat. MABE1109, un anticorpo monoclonale di ratto altamente specifico diretto contro l′antigene nucleare associato a latenza (LANA o LNA) codificato dal gene Orf73 del virus KSHV/HHV8 umano e del virus RFHV di scimmia, è stato testato nelle applicazioni di ELISA, citometria a flusso, immunocitochimica, immunoistochimica e immunoprecipitazione.

Qualità

Valutata mediante immunocitochimica su cellule BCBL-1.

Immunocitochimica (ICC): Questo anticorpo alla concentrazione di 1 µg/mL ha determinato l′immunocolorazione positiva per HHV-8 LNA-1 nei corpi nucleari di cellule di linfoma BCBL-1 infettate con herpesvirus associato al sarcoma di Kaposi/herpesvirus 8 umano (KSHV/HHV8).

Descrizione del bersaglio

Previsto a 116/135 kDa (KSHV LNA) e 118 kDa (RFHV LNA), segnalato come banda doppia a ~220/230 kDa (KSHV) e come banda doppia a ~240 kDa (RFHV) (Burnside, K.L., et al. (2006). Virology. 354(1):103-115; Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155). Il peso molecolare apparente più alto del previsto è verosimilmente dovuto alla presenza di residui amminoacidici ad alta carica negativa nella regione ripetuta interna (Rainbow, L., et al. (1997). J. Virol. 71(8):5915-5921).

Stato fisico

Formato: purificato
IgG2c monoclonali purificate di ratto in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 M con azoturo di sodio 0,05%

Altre note

Concentrazione: fare riferimento alla scheda tecnica specifica del lotto.

Note legali

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Codice della classe di stoccaggio

12 - Non Combustible Liquids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 1

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable


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