CC160-350UG
Substrato in laminina ECMatrix-511 E8
Xeno-free laminin-511 coating for feeder-free pluripotent stem cell cultures, 350 μg (CHO-S derived)
Sinonimo/i:
E8 Laminin, E8 Laminin Substrate, ECMatrix Laminin Substrate
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352202
NACRES:
NA.81
Prodotti consigliati
Forma fisica
liquid
Confezionamento
pkg of 2 x 175 μg
tecniche
cell culture | stem cell: suitable
Temperatura di conservazione
2-8°C
Descrizione generale
“Il substrato ECMatrix ha consentito un flusso di lavoro più semplice per il trattamento delle iPSC umane. Risparmiamo tempo liberi dalla necessità di pre-rivestire la nostra coltura, mantenendo al contempo colture di cellule staminali pluripotenti di alta qualità” - Ricercatore, gruppo di bioprocesso per la terapia cellulare.
“Le cellule ES umane coltivate sul substrato ECMatrix hanno un'elevata vitalità cellulare, proliferazione e sono state in grado di differenziarsi dopo molteplici passaggi. Inoltre, il substrato ci fa risparmiare tempo eliminando la necessità di pre-rivestire la coltura” - Scienziato senior in cellule staminali, gruppo di sviluppo dei processi di medicina rigenerativa.
Le cellule staminali pluripotenti umane (cellule ES e iPS) esprimono α6β1 l'integrina come specie principale e quindi possono essere mantenute in modo stabile ed espanse in modo efficiente in condizioni "feeder-free" su vasi di coltura rivestiti con il suo partner di legame laminina-511. Tuttavia, la laminina-511 non è adatta alla produzione su larga scala a causa del suo grande peso molecolare e della sua natura eterotrimerica. Il gruppo del professor Kiyotoshi Sekiguchi (Matrixome, Inc.) ha risolto questo problema producendo un frammento E8 ricombinante della laminina-511 su larga scala, mantenendo l'intera attività di legame dell'integrina.
“Le cellule ES umane coltivate sul substrato ECMatrix hanno un'elevata vitalità cellulare, proliferazione e sono state in grado di differenziarsi dopo molteplici passaggi. Inoltre, il substrato ci fa risparmiare tempo eliminando la necessità di pre-rivestire la coltura” - Scienziato senior in cellule staminali, gruppo di sviluppo dei processi di medicina rigenerativa.
Le cellule staminali pluripotenti umane (cellule ES e iPS) esprimono α6β1 l'integrina come specie principale e quindi possono essere mantenute in modo stabile ed espanse in modo efficiente in condizioni "feeder-free" su vasi di coltura rivestiti con il suo partner di legame laminina-511. Tuttavia, la laminina-511 non è adatta alla produzione su larga scala a causa del suo grande peso molecolare e della sua natura eterotrimerica. Il gruppo del professor Kiyotoshi Sekiguchi (Matrixome, Inc.) ha risolto questo problema producendo un frammento E8 ricombinante della laminina-511 su larga scala, mantenendo l'intera attività di legame dell'integrina.
Applicazioni
Rivestimento in laminina-511 esente da xenobiotici per colture di cellule staminali pluripotenti "feeder-free", 350 μg (derivate da CHO-S)
Caratteristiche e vantaggi
Il substrato di laminina ECMatrix-511 E8 può essere utilizzato per la coltura di cellule staminali pluripotenti in condizioni "feeder-free" con numerosi vantaggi aggiuntivi rispetto ai metodi tradizionali, tra cui:
- Formato privo di componenti di origine animale, privo di xenobiotici: stabile da un lotto all'altro, senza necessità di pre-selezione
- Non è necessario il pre-rivestimento della piastra: risparmia tempo aggiungendolo semplicemente al terreno di coltura durante il passaggio delle cellule
- Supporta il passaggio di singole cellule senza ROCKi: ottimo per l'editing CRISPR o l'isolamento clonale
- Tassi di adesione e di crescita più elevati: per arrivare più velocemente al vostro esperimento
- Semplici da utilizzare: non è necessario refrigerare i materiali per la coltura cellulare
Confezionamento
350 μg (2 x 175 μg)
Componenti
2 X 175 μg substrato in laminina 511 E8 ECMatrix (0.5 mg/mL in PBS). Espressa in cellule CHO-S.
Qualità
- Purezza (SDS-Page): > 95%
- Test delle endotossine: = 750 EU/mg
- Test del micoplasma: negativo
- Test di sterilità: negativo
- Test di legame dell'integrina (kDa) = 10 nM
Nota sulla preparazione
A seconda dell'applicazione, per la coltura delle cellule staminali pluripotenti si può utilizzare un metodo di precoating o di non-precoating.
Metodo non-precoating:
1. Staccare le cellule in piccoli grumi o singole cellule usando Accutase.
2. Aggiungere ECMatrix-511 al terreno di coltura fresco a una concentrazione finale di 0,25 μg/cm2 (per esempio: per un pozzetto di una piastra a 6 pozzetti aggiungere 5 µL della soluzione madre da 0,5 mg/mL).
3. Aggiungere le cellule all'ECMatrix-511/Media e piastrare le cellule alla densità desiderata.
Metodo precoating:
1. Diluire la soluzione madre di 0,5 mg/mL con PBS sterile per ottenere una soluzione di lavoro di 2,5 μg/mL.
2. Aggiungere ECMatrix-511 al terreno di coltura fresco a una concentrazione finale di 0,25 μg/cm2 (per esempio, per un pozzetto di una piastra a 6 pozzetti aggiungere 1 mL della soluzione madre da 2,5 μg/mL).
3. Incubare per 1 ora a 37 °C, per 3 ore a temperatura ambiente o per tutta la notte a 4 °C.
4. Prima dell'uso, rimuovere il fluido residuo dalla superficie rivestita (non risciacquare).
5. Staccare le cellule in piccoli grumi usando Accutase.
6. Piastrare le cellule alla densità desiderata.
N.B: Non lasciare asciugare le piastre, centrifugare brevemente tutti i liquidi nella provetta prima dell'uso, evitare cicli ripetuti di congelamento/scongelamento.
Metodo non-precoating:
1. Staccare le cellule in piccoli grumi o singole cellule usando Accutase.
2. Aggiungere ECMatrix-511 al terreno di coltura fresco a una concentrazione finale di 0,25 μg/cm2 (per esempio: per un pozzetto di una piastra a 6 pozzetti aggiungere 5 µL della soluzione madre da 0,5 mg/mL).
3. Aggiungere le cellule all'ECMatrix-511/Media e piastrare le cellule alla densità desiderata.
Metodo precoating:
1. Diluire la soluzione madre di 0,5 mg/mL con PBS sterile per ottenere una soluzione di lavoro di 2,5 μg/mL.
2. Aggiungere ECMatrix-511 al terreno di coltura fresco a una concentrazione finale di 0,25 μg/cm2 (per esempio, per un pozzetto di una piastra a 6 pozzetti aggiungere 1 mL della soluzione madre da 2,5 μg/mL).
3. Incubare per 1 ora a 37 °C, per 3 ore a temperatura ambiente o per tutta la notte a 4 °C.
4. Prima dell'uso, rimuovere il fluido residuo dalla superficie rivestita (non risciacquare).
5. Staccare le cellule in piccoli grumi usando Accutase.
6. Piastrare le cellule alla densità desiderata.
N.B: Non lasciare asciugare le piastre, centrifugare brevemente tutti i liquidi nella provetta prima dell'uso, evitare cicli ripetuti di congelamento/scongelamento.
Stoccaggio e stabilità
I substrati di laminina ECMatrix-511 E8 devono essere conservati a 2-8 °C. Evitare cicli multipli di congelamento/scongelamento e proteggere dalla luce.
Esclusione di responsabilità
Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.
Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
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