P5147
Protéase from Streptomyces griseus
Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder
Synonyme(s) :
Actinase E, Pronase E
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About This Item
Numéro CAS:
Numéro CE :
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352204
eCl@ss :
32160410
Nomenclature NACRES :
NA.54
Produits recommandés
Source biologique
Streptomyces griseus
Niveau de qualité
Type
Type XIV
Forme
powder
Activité spécifique
≥3.5 units/mg solid
Solubilité
10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble 0.2 mg/mL at 37 °C, clear, colorless to tan
Conditions d'expédition
wet ice
Température de stockage
−20°C
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Catégories apparentées
Spécificité
Mélange d′au moins trois activités protéolytiques incluant une sérine protéase extracellulaire. En général, les sérines protéases sont actives sur une large gamme de substrats, et cette activité est attribuée à un site actif composé d′un résidu Asp, un résidu His et un résidu Ser dans la molécule. Cette enzyme hydrolyse préférentiellement les liaisons peptidiques du côté carboxylique de l′acide glutamique ou aspartique.
Application
Cette enzyme est plus active dans une plage de pH plus élevée que les protéases alcalines connues, présentant une activité protéolytique même dans une solution de NaOH à 0,2 N. Elle s′avère utile pour la protéolyse des protéines insolubles et pour les études structurelles sur les protéines.
La protéase de Streptomyces griseus a été utilisée :
- pour la digestion du tissu de noyau gélatineux
- dans la catalyse de la réaction de Mannich à un récipient
- pour la déprotéinisation de l′amidon
- dans la digestion de tranches de cerveau pour la dissociation des cellules
La protéase est généralement utilisée pour les procédures d′isolement des acides nucléiques, en réalisant des incubations de 0,5 à 3,0 heures en présence de dodécylsulfate de sodium à 0,2 % et d′EDTA à 10 mM.
La protéase est une enzyme utilisée pour décomposer les protéines par hydrolyse des liaisons peptidiques. Elle est utilisée pour dégrader les protéines, pour étudier les inhibiteurs de protéases et pour évaluer la cinétique d′inactivation thermique. La protéase est utilisée lors des incubations dans les procédures d′isolement des acides nucléiques. La protéase de Streptomyces griseus a été utilisée dans des études de cristallographie et de cinétique du complexe covalent formé par les aldéhydes tétrapeptides et les protéases à sérine.
L′enzyme proposée par Sigma a été utilisée pour la digestion et l′analyse des complexes antithrombine-héparine. Elle a également été utilisée pour l′isolement de l′amidon résistant aux enzymes.
Actions biochimiques/physiologiques
Ce produit est un mélange d′au moins trois activités caséinolytiques et d′une activité d′aminopeptidase. Les enzymes caséinolytiques correspondent à la protéase A de Streptomyces griseus, la protéase B de Streptomyces griseus et la trypsine de Streptomyces griseus. Ce produit peut être utilisé lorsqu′une dégradation extensive ou complète des protéines est nécessaire. Ce mélange est très peu spécifique et peut digérer la caséine jusqu′à l′obtention de >70 % d′acides aminés individuels.
La protéase dégrade les protéines par hydrolyse des liaisons peptidiques. Les protéases sont inactivées par les inhibiteurs à site actif de sérine, comme le fluorure de phényl méthyl sulfonyle (PMSF) et le di-isopropyl-fluorophosphate. La protéase de Streptomyces griseus est un mélange d′au moins trois activités protéolytiques incluant une sérine protéase extracellulaire. Les sérines protéases sont actives sur une large gamme de substrats, et cette activité est attribuée à un site actif composé d′un résidu Asp, un résidu His et un résidu Ser présents dans la molécule. Cette enzyme hydrolyse préférentiellement les liaisons peptidiques du côté carboxylique de l′acide glutamique ou aspartique.
Caractéristiques et avantages
- très stable dans la gamme de pH comprise entre 5,0 et 9,0 avec une activité optimale à pH 8,8
- compatible avec de nombreux tampons d′isolement de l′ADN et de l′ARN
- accepte un large éventail de substrats
Qualité
Contient de l′acétate de calcium.
Propriétés physiques
Complètement inactivée par chauffage à une température supérieure à 80 °C pendant 15 à 20 minutes.
Définition de l'unité
Une unité hydrolyse la caséine et produit une couleur équivalente à 1,0 μmole (181 μg) de tyrosine par min à pH 7,5 et à 37 °C (couleur obtenue avec le réactif de Folin-Ciocalteu).
Notes préparatoires
Isolée à partir de milieu de culture de S. griseus.
Produit(s) apparenté(s)
Réf. du produit
Description
Tarif
Mention d'avertissement
Danger
Mentions de danger
Conseils de prudence
Classification des risques
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organes cibles
Respiratory system
Code de la classe de stockage
11 - Combustible Solids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 2
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
Équipement de protection individuelle
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
Certificats d'analyse (COA)
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Protocoles
To standardize a procedure for the enzymatic assay of Protease using Casein as a substrate at Sigma-Aldrich St. Louis.
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