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LIG1

Sigma-Aldrich

DNA Ligation Kit

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About This Item

Code UNSPSC :
12352204
Nomenclature NACRES :
NA.53

Qualité

for molecular biology

Utilisation

 kit sufficient for 150 ligation reactions

Conditions d'expédition

wet ice

Température de stockage

−20°C

Description générale

Sigma′s DNA Ligation Kit contains all of the reagents necessary to perform DNA ligation reactions. Sticky-end ligations are more efficient than blunt-end ligations; these can be facilitated with the addition of PEG.

Application

Suitable for:
  • Joining fragments of DNA into a cloning vector
  • Mutagenesis
  • Gene anyalysis and structure-function relationships

Composants

Sufficient for 150 reactions:
  • 300uL 10X Ligation Buffer (D2176) in 250 mM Tris-HCl (pH 7.8) 100 mM MgCl2, and 10 mM dithiothreitol
  • 3 x 100 units T4 DNA Ligase (D2886) in 50% glycerol with 10 mM Tris-HCl (pH 7.5) 50 mM KCl, and 1 mM dithiothreitol
  • 3 x 100 uL 10 mM ATP ( A3702)
  • 50 uL Control pBR322 DNA, HAE III Digest (D9430) 0.5 ug/ul in 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), and 1 mM EDTA
  • 1.5 mL 24% (w/v) PEG Solution, (P 2454)
  • 1.5 mL Molecular Biology Grade Water (W4502)

Principe

One of the most important steps in the cloning process is the ligation of linear DNA into a cloning vector. DNA ligations are performed by incubating DNA fragments with appropriately linearized cloning vectors in the presence of buffer, ATP, and DNA ligase. Many parameters affect ligations such as the relative ratio of insert to vector, the quality and type of the DNA ends, the temperature of ligation and the concentration of DNA.

Pictogrammes

Exclamation mark
GHS07

Mention d'avertissement

Warning

Mentions de danger

H319

Classification des risques

Eye Irrit. 2

Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 3

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Certificats d'analyse (COA)

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Sambrook, J., et al
Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2, 1-1 (1989)
Ausubel, F. M.
Current Protocols in Molecular Biology, 1, 3-3 (1994)
Bradley J Eckelmann et al.
NAR cancer, 2(3), zcaa013-zcaa013 (2020-08-11)
Homologous recombination/end joining (HR/HEJ)-deficient cancers with BRCA mutations utilize alternative DNA double-strand break repair pathways, particularly alternative non-homologous end joining or microhomology-mediated end joining (alt-EJ/MMEJ) during S and G2 cell cycle phases. Depletion of alt-EJ factors, including XRCC1, PARP1 and

Protocoles

DNA Ligation Protocol

The cloning process requires the ligation of linear DNA into a cloning vector. This ability to join fragments of DNA through recombinant technology is essential for many basic experiments in biotechnology.

Notre équipe de scientifiques dispose d'une expérience dans tous les secteurs de la recherche, notamment en sciences de la vie, science des matériaux, synthèse chimique, chromatographie, analyse et dans de nombreux autres domaines..

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