GE27-0843-01
Protéase PreScission
Cytiva 27-0843-01
Synonyme(s) :
protéine de fusion, élimination d'étiquette GST
About This Item
Produits recommandés
Conditionnement
pkg of 500 units
Fabricant/nom de marque
Cytiva 27-0843-01
Conditions d'expédition
dry ice
Température de stockage
−70°C
Catégories apparentées
Description générale
Clivage enzymatique sur colonne ou hors colonne
Les étiquettes GST et la protéase peuvent être éliminées en une seule étape, les protéines de fusion restant fixées à la résine de chromatographie d'affinité Glutathione Sepharose 4B, Glutathione Sepharose High Performance ou Glutathione Sepharose 4 Fast Flow. Une méthode alternative consiste à éluer les protéines avec étiquette GST avec du gluthanion réduit, à réaliser le clivage puis à transférer l'échantillon sur le même type de résine pour éliminer la protéase et les étiquettes. Contrairement à d'autres protéases courantes, telles que la thrombine et le facteur Xa, la protéine de fusion avec étiquette GST peut être facilement éliminée par fixation sur une résine présentant une affinité pour la GST. Les autres protéases non recombinantes nécessitent une étape de purification supplémentaire avec une résine différente.
Vecteurs codant pour la séquence de reconnaissance de la protéase 3C du RVH
Les vecteurs pGEX-6P, pGEX-6P-1, pGEX-6P-2 et pGEX-6P-3 codent pour la séquence de reconnaissance de la protéase 3C.
Application
La protéase PreScission a été utilisée pour éluer l'AT3 marquée par une étiquette GST lors des réactions d'ubiquitination in vitro et de préparation d'AT3-Ub. Elle a également été employée pour cliver l'étiquette GST de l'alpha-énolase lors de l'induction de l'expression de cette protéine de fusion dans la souche déficiente en protéases BL21 d'Escherichia coli.
Caractéristiques et avantages
- Clivage spécifique – entre les résidus Gln et Gly de la séquence de reconnaissance LeuGluValLeuPheGln/GlyPro.
- Gain de temps – Les protéines avec étiquette GST peuvent être clivées tout en étant encore fixées sur une résine de chromatographie d'affinité.
- La faible température d'incubation – permet le clivage à basse température des protéines de fusion contenant la séquence de reconnaissance de la protéase 3C de RVH.
Stockage et stabilité
Remarque sur l'analyse
Informations légales
Les vecteurs pGEX sont uniquement destinés aux activités de recherche scientifique et ne sauraient être utilisés à d'autres fins. Une licence pour utilisation commerciale des produits sous licence et des processus couverts par le brevet américain n° 5,654,176 et par les brevets équivalents (ou demandes de brevets en instance) dans d'autres pays doit être négociée directement avec Millipore Corp (anciennement Chemicon International Inc) par l'acheteur avant toute utilisation de ce type.
Code de la classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
Faites votre choix parmi les versions les plus récentes :
Certificats d'analyse (COA)
It looks like we've run into a problem, but you can still download Certificates of Analysis from our Documents section.
Si vous avez besoin d'assistance, veuillez contacter Service Clients
Déjà en possession de ce produit ?
Retrouvez la documentation relative aux produits que vous avez récemment achetés dans la Bibliothèque de documents.
Les clients ont également consulté
Articles
This page describes troubleshooting strategies for cloning the gene or gene fragment into a pGEX expression vector.
This page shows troubleshooting strategies for cleavage methods using Cytiva products.
This page shows how to cleave and purify GST-tagged proteins bound to Glutathione Sepharose in batch mode from Cytiva. Glutathione Sepharose High Performance, Glutathione Sepharose 4 Fast Flow, and Glutathione Sepharose 4B can all be used for cleavage and purification of GST-tagged proteins in batch.
This page shows how to cleave and purify GST-tagged proteins bound to GSTrap from Cytiva.
Protocoles
This page describes the characteristics of pGEX expression vectors used with Cytiva products.
To protect the fusion protein from proteolytic degradation prior to enzymatic cleavage with PreScission Protease, thrombin, or Factor Xa, it may be necessary to remove proteases from the sample. Additionally, following enzymatic cleavage, it may be necessary to remove thrombin or Factor Xa from the sample.
Notre équipe de scientifiques dispose d'une expérience dans tous les secteurs de la recherche, notamment en sciences de la vie, science des matériaux, synthèse chimique, chromatographie, analyse et dans de nombreux autres domaines..
Contacter notre Service technique