Accéder au contenu
Merck
Toutes les photos(1)

Principaux documents

GE27-0843-01

Protéase PreScission

Cytiva 27-0843-01

Synonyme(s) :

protéine de fusion, élimination d'étiquette GST

Se connecterpour consulter vos tarifs contractuels et ceux de votre entreprise/organisme


About This Item

Code UNSPSC :
41106501
Nomenclature NACRES :
NA.56

Conditionnement

pkg of 500 units

Fabricant/nom de marque

Cytiva 27-0843-01

Conditions d'expédition

dry ice

Température de stockage

−70°C

Description générale

La protéase PreScission est une protéine de fusion constituée de protéase 3C du rhinovirus humain (RVH) et de glutathion S-transférase (GST). Elle permet de mettre en œuvre en une seule étape le clivage des étiquettes GST sur colonne et la purification des protéines.

Clivage enzymatique sur colonne ou hors colonne

Les étiquettes GST et la protéase peuvent être éliminées en une seule étape, les protéines de fusion restant fixées à la résine de chromatographie d'affinité Glutathione Sepharose 4B, Glutathione Sepharose High Performance ou Glutathione Sepharose 4 Fast Flow. Une méthode alternative consiste à éluer les protéines avec étiquette GST avec du gluthanion réduit, à réaliser le clivage puis à transférer l'échantillon sur le même type de résine pour éliminer la protéase et les étiquettes. Contrairement à d'autres protéases courantes, telles que la thrombine et le facteur Xa, la protéine de fusion avec étiquette GST peut être facilement éliminée par fixation sur une résine présentant une affinité pour la GST. Les autres protéases non recombinantes nécessitent une étape de purification supplémentaire avec une résine différente.

Vecteurs codant pour la séquence de reconnaissance de la protéase 3C du RVH

Les vecteurs pGEX-6P, pGEX-6P-1, pGEX-6P-2 et pGEX-6P-3 codent pour la séquence de reconnaissance de la protéase 3C.

Application

Clivage spécifique à basse température d'étiquettes de protéines de fusion ; clivage simple sur colonne lors de la purification par affinité.
La protéase PreScission a été utilisée pour éluer l'AT3 marquée par une étiquette GST lors des réactions d'ubiquitination in vitro et de préparation d'AT3-Ub. Elle a également été employée pour cliver l'étiquette GST de l'alpha-énolase lors de l'induction de l'expression de cette protéine de fusion dans la souche déficiente en protéases BL21 d'Escherichia coli.

Caractéristiques et avantages

  • Clivage spécifique – entre les résidus Gln et Gly de la séquence de reconnaissance LeuGluValLeuPheGln/GlyPro.
  • Gain de temps – Les protéines avec étiquette GST peuvent être clivées tout en étant encore fixées sur une résine de chromatographie d'affinité.
  • La faible température d'incubation – permet le clivage à basse température des protéines de fusion contenant la séquence de reconnaissance de la protéase 3C de RVH.

Stockage et stabilité

Remarque : ce produit peut être expédié jusqu'à 90 jours avant sa date de péremption. Pour de plus amples informations sur la date de péremption d'un lot, veuillez contacter le service technique.

Remarque sur l'analyse

Pour consulter le certificat d'analyse de ce produit, rendez-vous sur le site www.cytiva.com.

Informations légales

Vecteurs pGEX
Les vecteurs pGEX sont uniquement destinés aux activités de recherche scientifique et ne sauraient être utilisés à d'autres fins. Une licence pour utilisation commerciale des produits sous licence et des processus couverts par le brevet américain n° 5,654,176 et par les brevets équivalents (ou demandes de brevets en instance) dans d'autres pays doit être négociée directement avec Millipore Corp (anciennement Chemicon International Inc) par l'acheteur avant toute utilisation de ce type.

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Faites votre choix parmi les versions les plus récentes :

Certificats d'analyse (COA)

Lot/Batch Number

It looks like we've run into a problem, but you can still download Certificates of Analysis from our Documents section.

Si vous avez besoin d'assistance, veuillez contacter Service Clients

Déjà en possession de ce produit ?

Retrouvez la documentation relative aux produits que vous avez récemment achetés dans la Bibliothèque de documents.

Consulter la Bibliothèque de documents

Zhen Wang et al.
Nature communications, 10(1), 3162-3162 (2019-07-20)
HECT E3 ligases control the degradation and functioning of numerous oncogenic/tumor-suppressive factors and signaling proteins, and their activities must be tightly regulated to prevent cancers and other diseases. Here we show that the Nedd4 family HECT E3 WWP1 adopts an
Dorothée Raoux-Barbot et al.
PloS one, 13(11), e0206133-e0206133 (2018-11-13)
Several bacterial pathogens produce nucleotidyl cyclase toxins to manipulate eukaryotic host cells. Inside host cells they are activated by endogenous cofactors to produce high levels of cyclic nucleotides (cNMPs). The ExoY toxin from Pseudomonas aeruginosa (PaExoY) and the ExoY-like module
Maximilian Fottner et al.
Nature communications, 12(1), 6515-6515 (2021-11-13)
The post-translational modification of proteins with ubiquitin (Ub) and Ub-like modifiers (Ubls) represents one of the most important regulators in eukaryotic biology. Polymeric Ub/Ubl chains of distinct topologies control the activity, stability, interaction and localization of almost all cellular proteins
Ana Belén Uceda et al.
Antioxidants (Basel, Switzerland), 10(2) (2021-03-07)
Frataxin is a mitochondrial protein which deficiency causes Friedreich's ataxia, a cardio-neurodegenerative disease. The lack of frataxin induces the dysregulation of mitochondrial iron homeostasis and oxidative stress, which finally causes the neuronal death. The mechanism through which frataxin regulates the
Sokol V Todi et al.
The Journal of biological chemistry, 285(50), 39303-39313 (2010-10-15)
Deubiquitinating enzymes (DUbs) play important roles in many ubiquitin-dependent pathways, yet how DUbs themselves are regulated is not well understood. Here, we provide insight into the mechanism by which ubiquitination directly enhances the activity of ataxin-3, a DUb implicated in

Articles

This page describes troubleshooting strategies for cloning the gene or gene fragment into a pGEX expression vector.

This page shows troubleshooting strategies for cleavage methods using Cytiva products.

This page shows how to cleave and purify GST-tagged proteins bound to Glutathione Sepharose in batch mode from Cytiva. Glutathione Sepharose High Performance, Glutathione Sepharose 4 Fast Flow, and Glutathione Sepharose 4B can all be used for cleavage and purification of GST-tagged proteins in batch.

This page shows how to cleave and purify GST-tagged proteins bound to GSTrap from Cytiva.

Afficher tout

Protocoles

This page describes the characteristics of pGEX expression vectors used with Cytiva products.

To protect the fusion protein from proteolytic degradation prior to enzymatic cleavage with PreScission Protease, thrombin, or Factor Xa, it may be necessary to remove proteases from the sample. Additionally, following enzymatic cleavage, it may be necessary to remove thrombin or Factor Xa from the sample.

Notre équipe de scientifiques dispose d'une expérience dans tous les secteurs de la recherche, notamment en sciences de la vie, science des matériaux, synthèse chimique, chromatographie, analyse et dans de nombreux autres domaines..

Contacter notre Service technique