PFHYS0616

Flacon de culture multicouches Millicell^® HY

T-600, 3 layer, 120-180 mL, sterile, vented cap, Tissue Culture (TC)-treated surface

• Synonyme(s) : culture cellulaire, culture tissulaire, flacon de culture cellulaire, flacon multicouches
• Code UNSPSC : 41104923
• eCl@ss : 32011202
• Nomenclature NACRES : NB.22

Propriétés

• Matériaux: angled neck high-density polyethylene cap (vented); polystyrene flask
• Niveau de qualité: 200
• Stérilité: sterile; γ-irradiated
• Caractéristiques: 3 layer
• Conditionnement: pack of 16
• Fabricant/nom de marque: Millicell^®
• Paramètres: 45 °C max. temp.
• Technique(s): cell culture | mammalian: suitable
• Hauteur: 32 mm , excluding cap; 51 mm , including cap
• Longueur: 22.2 cm
• Largeur: 12 cm
• Superficie: 600 cm²
• Volume de travail: 120-180 mL
• Type de liaison: Tissue Culture (TC)-treated surface
• Conditions d'expédition: ambient

Description

Notes préparatoires

1. Pour ensemencer les cellules, remplir le flacon Millicell HY T-600 avec le milieu de croissance souhaité.
2. Ajouter le nombre de cellules souhaité pour obtenir une densité d'ensemencement typique.
3. Mélanger les cellules et le milieu en soulevant l'extrémité du flacon et en pipettant la solution de haut en bas à plusieurs reprises jusqu'à obtenir une suspension homogène. Remarque : une mauvaise homogénéisation des cellules peut entraîner une répartition non homogène des cellules sur les différentes couches du flacon Millicell HY.
4. Poser brièvement le flacon sur le côté afin d'équilibrer le volume de liquide entre les couches du flacon.
5. Incliner le flacon sur son extrémité pour répartir le volume de liquide dans chaque couche du flacon.
6. Poser le flacon à plat pour répartir uniformément la suspension cellulaire sur toute la surface de chaque couche.
7. En fonction du volume, il peut être nécessaire de basculer le flacon sur ses quatre coins pour s'assurer que toute la surface s'humecte. Remarque : en cas de modification du volume de liquide sur l'une des couches au cours de la procédure de mouillage (par exemple, déversement de liquide de la couche supérieure vers les couches inférieures), répéter les étapes 4 à 6 pour assurer une répartition homogène du liquide parmi toutes les couches.
8. Remettre le flacon en position verticale lors du transport vers l'incubateur. Poser le flacon à plat dans l'incubateur (comme à l'étape 6) et cultiver les cellules dans des conditions appropriées.
9. Si un échange de milieu est nécessaire, aspirer ou transvaser le milieu du flacon Millicell HY T-600. Remarque : en raison de la plus grande surface des flacons Millicell, il peut être nécessaire de laisser le flacon sur le côté pendant plusieurs minutes après chaque aspiration afin que tout le liquide résiduel s'accumule en un même point ; cela permet une seconde aspiration pour retirer complètement le liquide.
10. Ajouter le volume approprié de milieu frais, et répéter les étapes 4 à 8.
11. Pour récolter les cellules, retirer le milieu comme à l'étape 9.
12. Ajouter le volume souhaité de solution de lavage appropriée (par exemple, PBS ou EDTA 0,02 %) dans le flacon et répéter les étapes 4 à 7.
13. Retirer la solution de lavage comme à l'étape 9.
14. Ajouter la quantité souhaitée d'enzyme de dissociation (par exemple, trypsine à 0,25 %/EDTA ou équivalent) selon le protocole privilégié, répéter les étapes 4 à 8 et incuber. Le volume d'enzyme de dissociation requis par cm² n'a pas besoin d'être modifié par rapport au protocole du flacon de culture cellulaire. Remarque : procéder à un examen au microscope pour s'assurer que toutes les cellules sont complètement dissociées de la surface du flacon. Une dissociation incomplète des cellules de la surface de culture (de sorte que toutes les cellules ne flottent pas librement) peut entraîner une réduction des rendements cellulaires.
15. Si vous utilisez de la trypsine, ajouter le volume souhaité de solution d'inactivation, comme un milieu à base de sérum.
16. Collecter les cellules soit par aspiration, soit en les transvasant, comme à l'étape 9.

Informations légales

Millicell is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany