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MABE342

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-puromycine, clone 4G11

clone 4G11, from mouse

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

mouse

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

purified immunoglobulin

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

4G11, monoclonal

Espèces réactives

human

Réactivité de l'espèce (prédite par homologie)

all

Technique(s)

flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
western blot: suitable

Isotype

IgG1κ

Conditions d'expédition

wet ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Informations sur le gène

human ... NPEPPS(9520)

Description générale

La puromycine est un antibiotique aminonucléosidique dérivé de la bactérie Streptomyces alboniger. Elle agit comme un inhibiteur de la synthèse des protéines qui bloque la traduction en interrompant prématurément la chaîne protéique dans le ribosome. Les anticorps monoclonaux anti-puromycine peuvent être utilisés avec des protocoles d'immunochimie standard pour examiner directement la traduction : c'est ce que l'on appelle la méthode SUnSET ("surface sensing of translation"). Son utilité dans les analyses de la traduction des protéines provient du fait qu'une partie de la molécule ressemble à l'extrémité 3′ de l'aminoacyl-ARNt. La puromycine induit la fragmentation de l'ADN dans les thymocytes et les cellules leucémiques humaines HL-60.

Spécificité

Réaction vérifiée avec un échantillon test humain préalablement incubé avec de la puromycine. Réaction anticipée avec toutes les espèces lorsque l'échantillon test est incubé avec de la puromycine.

Application

Analyse par immunocytochimie : une dilution au 1/2 000e d'un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HeLa traitées à la puromycine. Cependant, un signal plus faible est obtenu lorsque le cycloheximide est ajouté, car il inhibe la biosynthèse des protéines dans les organismes eucaryotes.

Analyse par western blotting : un lot représentatif provenant d'un laboratoire indépendant a permis de détecter les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par WB (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277).

Analyse par Immunofluorescence : un lot représentatif provenant d'un laboratoire indépendant a permis de détecter les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par IF (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277).

Analyse par cytométrie en flux (FACS) : un lot représentatif provenant d'un laboratoire indépendant a permis de détecter les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par FACS (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

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L'anticorps anti-puromycine, clone 4G11, détecte la puromycine incorporée dans les protéines. Les anticorps monoclonaux anti-puromycine peuvent également être utilisés avec des méthodes d'immunochimie standard.

Qualité

Produit évalué par western blotting sur des lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide ou à la puromycine uniquement.

Analyse par western blotting : une dilution au 1/12 500e de cet anticorps a permis de détecter les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine uniquement. Cet anticorps a également détecté de faibles quantités de puromycine dans les cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide.

Description de la cible

La puromycine est incorporée dans les protéines nouvellement synthétisées. En présence de puromycine uniquement, cet anticorps détecte les protéines nouvellement synthétisées de multiples poids moléculaires qui ont incorporé la puromycine. Cependant, un signal plus faible est obtenu lorsque le cycloheximide est également présent, car il inhibe la biosynthèse des protéines dans les organismes eucaryotes.

Forme physique

Format : Produit purifié

Informations légales

ALEXA FLUOR is a trademark of Life Technologies

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


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