ABE1462

Anticuerpo anti-fosfo LSD1 (Ser 112)

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Sinónimos: Lysine-specific histone demethylase 1A, Ser 112 phosphorylated, BRAF35-HDAC complex protein BHC110, Ser 112 phosphorylated, Flavin-containing amine oxidase domain-containing protein 2, Ser 112 phosphorylated
• Código UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• origen biológico: rabbit
• Nivel de calidad: 100
• forma del anticuerpo: affinity isolated antibody
• tipo de anticuerpo: primary antibodies
• clon: polyclonal
• purificado por: affinity chromatography
• reactividad de especies: human, mouse
• reactividad de especies (predicha por homología): rat (based on 100% sequence homology), porcine (based on 100% sequence homology), zebrafish (based on 100% sequence homology), rhesus macaque (based on 100% sequence homology)
• técnicas: dot blot: suitable; western blot: suitable
• Nº de acceso NCBI: NP_598633
• Nº de acceso UniProt: Q6ZQ88
• Condiciones de envío: wet ice
• modificación del objetivo postraduccional: phosphorylation (pSer112 )
• Información sobre el gen: human ... KDM1A(23028)

Descripción

Descripción general

La histona desmetilasa específica de lisinas 1A (UniProt Q6ZQ88; también conocida como proteína BHC110 del complejo BRAF35-HDAC, proteína 2 que contiene el dominio aminooxidasa que contiene flavina) está codificada por el gen Kdm1a (también conocido como Aof2, Kiaa0601, Lsd1) (ID del gen 99982) en especies murinas. La desmetilasa específica de lisinas (LSD) dependiente de FAD+, la LSD1, es un componente de los complejos correpresores REST (CoREST) que intervienen en la represión génica catalizando la desmetilación de la histona H3 monometilada y dimetilada en la Lys4 (H3K4me1/2). La LSD1 también participa en el proceso de activación génica asociado con receptores nucleares a través de la desmetilación del H3K9me1/2. Además, se sabe que la LSD1 desmetila sustratos no histonas, como p53 y Dnmt1. Se ha comunicado que la LSD1 es fosforilada en la Ser112 por la PKCalfa y por consiguiente interviene en la regulación del reloj circadiano dependiente de la señalización por la PKCalfa. La fosforilación de la Ser112 induce la interacción de la LSD1 con CLOCK:BMAL1 para facilitar la activación transcripcional dependiente de las secuencias E (E-box). Se ha comunicado que ratones knockin, que son portadores de los alelos Lsd1(SA/SA) que codifican una LSD1 mutante S112A con defectos de fosforilación, exhiben ritmos circadianos alterados en el comportamiento locomotor con expresión rítmica atenuada de genes del reloj central y deterioro del reajuste de la fase del reloj circadiano.

Especificidad

La designación Ser112 corresponde a la secuencia murina KDM1A/LSD1 (UniProt Q6ZQ88). La Ser112 murina es equivalente a la Ser111 humana y a la Ser106 de rata (UniProt O60341 & F1MA31). La especificidad de este anticuerpo policlonal se confirmó mediante el análisis de inmunotransferencia por puntos utilizando el péptido inmunógeno y el péptido no fosforilado correspondiente, así como mediante el análisis de inmunotransferencia Western de la fosforilación diana inducida por PMA; el tratamiento con fosfatasa lambda del lisado celular antes de la transferencia Western suprimió por completo la detección de la banda diana (NAM, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53:791-805).

Inmunógeno

Epítopo: pSer112.

Péptido lineal que corresponde a una secuencia LSD1 de ratón que contiene la Ser112 fosforilada.

Aplicación

Análisis mediante inmunotransferencia por puntos: un lote representativo detectó el péptido inmunógeno con la Ser112 fosforilada (equivalente a la pSer111 humana), pero no el péptido correspondiente con la Ser112 no fosforilada (Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53, 791-805).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB) un lote representativo detectó la inducción de fosforilación de la LSD1 humana expresada exógenamente tras el tratamiento con PMA de transfectantes de HEK293T sin suero durante 24 horas . Se detectó la LSD1 fosforilada en la fracción nuclear, pero no en la citosólica, y el cotratamiento con el inhibidor Go 6976 (Nº de ref. 365250) de la PKC impidió la fosforilación de la LSD1 inducida por PMA (Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53, 791-805).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB) un lote representativo detectó un nivel de fosforilación de la LSD1 dependiente del tiempo en extractos hepáticos de ratones mantenidos en un ciclo de oscuridad constante (DD). Extractos nucleares de MEF en diferentes momentos después de la inducción de la transcripción del gen circadiano por tratamiento con dexametasona demostraron igualmente una oscilación similar a la circadiana del nivel de fosforilación de la LSD1 (Nam, H.J., et al. (2014). Mol. Cell 53:791-805).

El anticuerpo anti-fosfo LSD1 (Ser 112) es un anticuerpo contra la fosfo LSD1 (Ser 112) para utilizar en inmunotransferencia Western y por puntos.

Calidad

Evaluada mediante inmunotransferencia Western en lisado de células HEK293T que sobreexpresan la LSD1.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: una dilución 1:500 de este anticuerpo detectó la fosforilación inducida por PMA de la LSD1 humana expresada exógenamente en transfectantes de HEK293T sin suero durante 24 horas. El tratamiento con fosfatasa lambda de la membrana antes de probar el anticuerpo abolió por completo la detección de la banda diana.

Descripción de destino

~115 kDa observados. 92,90/95,16 kDa (isoforma humana 1/2), 92,85 (ratón) y 94,60 kDa (rata) calculados. En algunos lisados pueden aparecer bandas no caracterizadas.

Otras notas

Concentración: Consulte la ficha técnica específica del lote.

Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): Not applicable
• Punto de inflamabilidad (°C): Not applicable