Fabricación de vacunas de ADN plasmídico
Proceso de producción de vacunas de ADN plasmídico
El ADN plasmídico (ADNp) es un componente importante de los tratamientos con vectores víricos. Estas moléculas de ADN circular pueden utilizarse como el transgén terapéutico para codificar la cápside del virus o como vacuna en sí mismas. Las vacunas de ADN han sido aprobadas para su uso en animales y se han desarrollado contra el virus SARS-CoV-2. El ADNp también se utiliza como material de partida para las vacunas de ARNm.
La fabricación de ADNp presenta varios desafíos. La producción adolece de una baja productividad de fermentación microbiana. Además, el proceso de purificación se complica por el hecho de que el lisado bacteriano es muy viscoso y contiene contaminantes con propiedades similares a las del ADNp, lo que produce baja resolución de la separación. El lisado bacteriano puede ser muy viscoso y contiene contaminantes con propiedades similares a las del ADNp que producen una separación de baja resolución. Estos desafíos pueden superarse con el uso de una plataforma integral que consta de tecnologías avanzadas de un solo uso.
Recursos relacionados
Libro electrónico: Plasmid DNA Downstream Process For Gene Therapy and Plasmid-based
DNA Vaccine Development
Seminario virtual: Scalable Purification of Plasmid DNA for use in Vaccine Manufacturing
Artículo técnico: Downstream Applications for Plasmid DNA and Substrates
Artículo técnico: Manufacturing Strategies for mRNA Vaccines and Therapeutics
Artículo técnico: Purificación de ADN plasmídico
Nota de aplicación: Scalable Purification of Plasmid DNA – Strategies & Considerations for Vaccine and Gene Therapy Manufacturing
Nota de aplicación: Cell Harvest, Lysis, Neutralization & Clarification of Plasmid DNA
Nota de aplicación: Tangential Flow Filtration (UF/DF) of Plasmid DNA
Nota de aplicación: Chromatographic Purification of Plasmid DNA
Nota de aplicación: Sterilizing Grade Filtration Unit Operations for Plasmid DNA Processes
Aceleración del tiempo hasta la fase clínica a la vez que se aumenta la productividad upstream
El ADNp representa varios desafíos que pueden superarse con tecnologías de recolección y clarificación celular avanzadas de un solo uso. La centrifugación o la microfiltración TFF (MF-TFF) se utilizan para eliminar el caldo de fermentación gastado, mientras que los filtros de profundidad han demostrado un rendimiento excelente en una amplia gama de condiciones para la clarificación.
Consecución de los objetivos de rendimiento y eficiencia con una potente depuración de impurezas
El intercambio aniónico (AEX) ha demostrado una potente depuración de proteínas, ARN, gDNA y endotoxinas. Por otra parte, las isoformas plasmídicas son muy difíciles de separar con intercambio iónico. En este caso, puede utilizarse cromatografía de interacción hidrófoba (HIC), que está bien situada después del AEX debido a la elevada concentración de eluidos salinos.
Maximización de la recuperación downstream
La purificación del ADNp es compleja. Requiere una combinación de TFF y cromatografía. La TFF puede colocarse entre las etapas de clarificación y cromatografía, donde las impurezas residuales pueden lavarse mediante diafiltración y el ADNp concentrarse para cromatografía. Para la purificación cromatográfica pueden utilizarse tanto resinas como membranas. Las resinas ofrecen instalaciones flexibles y una buena selectividad, mientras que las membranas ofrecen una gran capacidad de adsorción y caudales elevados.
Garantía de la seguridad del paciente
Una vez purificado y formulado, el ADNp debe esterilizarse mediante filtración para garantizar la seguridad del paciente. Si bien este paso puede parecer una operación relativamente sencilla, la filtración del ADNp puede ser difícil debido al gran tamaño de los plásmidos, la gran viscosidad de la disolución y la retención bacteriana para las formulaciones adyuvantes. Deben considerarse muchos parámetros del proceso para optimizar la filtración de grado esterilizante, entre ellos, la concentración salina, el tamaño del plásmido, la pureza y la concentración del plásmido.
Donwstream - Filtración de flujo tangencial
Consiga los objetivos de rendimiento, eficiencia y recuperación del ADNp al tiempo que garantiza una potente depuración de impurezas
Disoluciones tampón y medios para cultivo celular líquido en bioprocesos
Ofrecemos las prestaciones de esterilización de líquidos mediante filtración de la mayor calidad del sector, suministrando medios de cultivo celular, tampones y productos CIP y SIP listos para usar de instalaciones GMP de todo el mundo para optimizar su producción biofarmacéutica.
Cromatografía downstream
- Buffers & pH Ajusters
- Membrane Chromatography with Natrix® Q Pilot Chromatography Membranes
- Membrane Chromatography with Natrix® Q Recon Mini
- Capture an/or Polishing Chromatography with Fractogel® EMD DEAE Chromatography Resins
- Capture an/or Polishing Chromatography with Fractogel® EMD DMAE Chromatography Resins
Formulación, filtración esterilizante y acabado de llenado
Garantice la seguridad del paciente con un proceso de esterilización por filtración fiable y robusto
Para seguir leyendo, inicie sesión o cree una cuenta.
¿No tiene una cuenta?