Dulbecco Modified Eagle Medium F12 (DMEM F12)
In jüngster Zeit haben Forscher über die Kultivierung einer Vielzahl von Zelllinien in serumfreien Medien berichtet, die anstelle von Serum einen Zusatz in Form von Nährstoffen, Wachstumsfaktoren und Hormonen enthalten. Mather und Sato (BBRC, 1985) berichteten über die erfolgreiche Kultivierung von Leydig- und Sertoli-Zellen in serumfreiem Medium, das Insulin, Transferrin, epidermalen Wachstumsfaktor, luteinisierendes Hormon oder follikelstimulierendes Hormon, Somatomedin und Wachstumshormon enthält.
Obwohl die Hormone und ihre Konzentrationen für den untersuchten Zelltyp spezifisch sind, erwies sich für diese Studien eine 1:1-Mischung aus Dulbeccos modifiziertem Eagle-Medium (DMEM) und Hams F12-Nährstoffmischung als optimal. Diese als DMEM/F12-Medium bezeichnete Mischung enthält unter anderem 21 Aminosäuren, 10 Vitamine, Glucose, Eisen und Zink.
DMEM/F12 ist ein reichhaltigeres und komplexeres Medium als DMEM. HEPES-Puffer kann auch in einer Endkonzentration von 15 mmol/l in die Formulierung aufgenommen werden, um den Verlust an Pufferkapazität auszugleichen, der durch die Entfernung des Serums entsteht. Dieses synthetische Medium enthält weder Serum, Proteine, Lipide noch Wachstumsfaktoren und kann, abhängig von der Art der Zellkultur, somit eine Supplementierung mit fetalem Kälberserum (FBS) erfordern. Einige kommerzielle Formulierungen können Glutamin oder Phenolrot enthalten.
Anwendungen von DMEM/F12
Das hochwertige Basalmedium DMEM/F12 wird häufig für Anwendungen verwendet, die serumarme oder serumfreie Medien erfordern, wie z. B. eine 3D-Organoidkultur oder Stammzellkultur. DMEM/f12-Medien können auch zur Optimierung von Zelltransfektionen verwendet werden, die serumarme oder serumfreie Bedingungen erfordern.
Neben der Stammzellkultur, die häufig eine serumreduzierte oder serumfreie Umgebung erfordert, können auch primäre Zellen in DMEM/F12-Medien kultiviert werden. Dazu gehören Fibroblasten, MDCK-Zellen, neuronale Zelllinien, Gliazellen und glatte Muskelzellen, die ein gleichwertiges oder besseres Wachstum und eine bessere Funktion aufweisen als Primärzellen, die mit hohen Serumkonzentrationen supplementiert wurden. Zellen, die in DMEM/F12-Medien kultiviert werden, weisen die gleiche Zellmorphologie auf wie Zellen, die unter hohen Serumkonzentrationen kultiviert werden.
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