RTN10
GenElute™ Säugetier-Gesamt-RNA-Miniprep-Kit
sufficient for 10 purifications
Synonym(e):
GenElute
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352200
NACRES:
NA.52
Empfohlene Produkte
Verwendung
sufficient for 10 purifications
Qualitätsniveau
Grünere Alternativprodukt-Eigenschaften
Designing Safer Chemicals
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Grünere Alternativprodukt-Kategorie
, Aligned
Lagertemp.
15-25°C
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Allgemeine Beschreibung
Sigmas GenElute Säugetier-Gesamt-RNA Minprep Kit bietet eine einfache und praktische Lösung, um Gesamt-RNA aus Säugetierzellen und -gewebe zu isolieren. Protokolle für Zellen, Gewebe und Fasergewebe sind verfügbar. Diese Protokolle unterscheiden sich bei den Bedingungen für die Zelllyse und den Zellaufschluss. Sobald die RNA an die GenElute-Bindungssäule gebunden ist, ist das Aufreinigungsverfahren für alle Ausgangsmaterialien dasselbe. Für Fasergewebe muss das Kit mit Proteinase K (Kat.-Nr. P4850) verwendet werden, um einen wirksamen Zellaufschluss sicherzustellen. Das Kit kombiniert die Vorteile eines Systems auf Siliziumdioxidbasis mit einem Mikrospinformat und eliminiert die Notwendigkeit für Cäsiumchloridgradienten, Alkoholpräzipitation und gefährliche organische Verbindungen wie Phenol und Chloroform. Zellen und Gewebe werden in einem Guanidinthiocyanat-haltigen Puffer lysiert und homogenisiert, um eine gründliche
Denaturierung von Makromolekülen und die Inaktivierung von RNasen sicherzustellen. Die Zugabe von Ethanol veranlasst die RNA dazu, zu binden, wenn das Lysat in einem Mikrozentrifugenröhrchen durch eine Siliziumdioxidmembran geschleudert wird. Nachdem die RNA gewaschen wurde, um Verunreinigungen zu entfernen, wird sie in 50 bis 100 μl einer Elutionslösung eluiert. Bis zu 150 μg Gesamt-RNA können in weniger als 30 Minuten isoliert werden.
Wenn alle Spuren einer DNA-Verunreinigung eliminiert werden müssen, wird eine weitere Behandlung mit DNase I empfohlen. Der Aufschluss mit DNase I kann mit dem On-Column DNase I Aufschluss-Set (DNASE10 und DNASE70) durchgeführt werden, während die RNA an die GenElute Bindungssäule gebunden ist. Alternativ kann die fertige RNA-Aufbereitung für eine stärkere Entfernung von kontaminierender DNA mit DNase I in Amplifikationsqualität (AMPD1) behandelt werden.
Denaturierung von Makromolekülen und die Inaktivierung von RNasen sicherzustellen. Die Zugabe von Ethanol veranlasst die RNA dazu, zu binden, wenn das Lysat in einem Mikrozentrifugenröhrchen durch eine Siliziumdioxidmembran geschleudert wird. Nachdem die RNA gewaschen wurde, um Verunreinigungen zu entfernen, wird sie in 50 bis 100 μl einer Elutionslösung eluiert. Bis zu 150 μg Gesamt-RNA können in weniger als 30 Minuten isoliert werden.
Wenn alle Spuren einer DNA-Verunreinigung eliminiert werden müssen, wird eine weitere Behandlung mit DNase I empfohlen. Der Aufschluss mit DNase I kann mit dem On-Column DNase I Aufschluss-Set (DNASE10 und DNASE70) durchgeführt werden, während die RNA an die GenElute Bindungssäule gebunden ist. Alternativ kann die fertige RNA-Aufbereitung für eine stärkere Entfernung von kontaminierender DNA mit DNase I in Amplifikationsqualität (AMPD1) behandelt werden.
We are committed to bringing you Greener Alternative Products, which adhere to one or more of The 12 Principles of Greener Chemistry. This product has Inherently Safer Chemistry, compared to the standard use of phenol and chloroform to perform DNA extractions.
Anwendung
GenElute™ Mammalian Total RNA Miniprep Kit has been used to extract total RNA from tissues and cells.
Die aufgereinigte RNA ist bereit für die reverse Transkription und PCR, Markierung und Mikroarray-Analyse sowie andere gängige Anwendungen. Beachten Sie, dass RNA, die weniger als 200 Nukleoside lang ist, z. B. tRNA, 5S rRNA und 5,8S rRNA, unter den Bedingungen dieses Kits nicht aureichend gewonnen wird.
Leistungsmerkmale und Vorteile
- Reinigt Gesamt-RNA aus bis zu 107 Zellen oder 40 mg Gewebe je Aufbereitung auf
- Ergibt bis zu 150 μg reiner, konzentrierter Gesamt-RNA je Aufbereitung
- Gewinnen Sie RNA aus so wenig wie 100 Zellen
- Leicht und effizient – 12 bis 18 Aufbereitungen in 30 Minuten
- Schneller als Schwerkraftfluss-Anionenaustauschverfahren
- Keine umständlichen Schritte in Zusammenhang mit Harzen und magnetischen Aufschlämmungen
- 40 % mehr Aufreinigungen je Kit als der führende Anbieter
Sonstige Hinweise
Das GenElute™-Säugetier-Gesamt-RNA-Aufreinigungskit kombiniert eine Siliziumdioxidmembrantechnologie mit einem praktischen Spinsäulenformat für ein schnelles Bindungs-, Wasch- und Eluationsverfahren, um hochqualitative Gesamt-RNA zu gewinnen.
Weitere Informationen finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/totalrna.
Prinzip
Die Proben werden in Guanidinthiocyanat und 2-Mercaptoethanol lysiert und homogenisiert, um RNA und inaktive RNasen freizusetzen. Die Lysate werden durch eine Filtrationssäule geschleudert, um Zelltrümmer und Scherungs-DNA zu entfernen. Das Filtrat wird anschließend in eine Siliziumdioxidsäule mit hoher Kapazität gegeben, um Gesamt-RNA zu binden, gefolgt von Waschen und Elution. Bis zu 150 μg Gesamt-RNA können je Aufbereitung in 100 μl Wasser gewonnen werden. Die aufgereinigte RNA ist bereit für Northern Blot (Abb. 1), RT-PCR (Abb. 2) und andere gängige Anwendungen.
Rechtliche Hinweise
GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
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Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben
Signalwort
Danger
Gefahreneinstufungen
Acute Tox. 2 Dermal - Acute Tox. 3 Inhalation - Acute Tox. 3 Oral - Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 3 - Repr. 2 - Skin Corr. 1C - Skin Sens. 1 - STOT RE 2 Oral - STOT SE 3
Zielorgane
Central nervous system
Zusätzliche Gefahrenhinweise
Lagerklassenschlüssel
3 - Flammable liquids
WGK
WGK 3
Flammpunkt (°F)
77.0 °F - closed cup
Flammpunkt (°C)
25 °C - closed cup
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