C6219

Anti-Connexin-43 in Kaninchen hergestellte Antikörper

affinity isolated antibody, buffered aqueous solution

• Synonym(e): Connexin 43 Antibody, Connexin 43 Antibody - Anti-Connexin-43 antibody produced in rabbit, Cx43 Antibody
• MDL-Nummer: MFCD00803532
• UNSPSC-Code: 12352203
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rabbit
• Qualitätsniveau: 200
• Konjugat: unconjugated
• Antikörperform: affinity isolated antibody
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: polyclonal
• Form: buffered aqueous solution
• Speziesreaktivität: mammals, human
• Verpackung: antibody small pack of 25 μL
• Methode(n): immunocytochemistry: suitable; immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): 1:2,000 using human or animal tissue sections; immunohistochemistry (frozen sections): 1:2,000 using human or animal tissue sections; indirect immunofluorescence: 1:400 using cultured BHK cells; microarray: suitable; western blot: 1:8,000 using an animal tissue extract
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P17302
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... GJA1(2697) ; mouse ... Gja1(14609) ; rat ... Gja1(24392)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Anti-Connexin-43-Antikörper wird mit einem synthetischen Peptid, das mit Glutaraldehyd als Immunogen an KLH konjugiert ist, in Kaninchen entwickelt. Das Peptid entspricht einem C-terminalen Segment der zytoplasmischen Domäne von Human- und Ratten-Connexin-43-Aminosäureresten, mit einem am N-Terminus hinzugefügten Lysin. Der affinitätsisolierte, antigenspezifische Antikörper wird durch immunspezifische Aufreinigung gewonnen, bei der im Wesentlichen alle Kaninchenserumproteine, einschließlich Immunglobuline, die nicht spezifisch an Connexin-43 binden, entfernt werden.

Gap Junctions sind spezialisierte Zellmembrandomänen, die aus Ansammlungen von interzellulären Kanälen bestehen, die das Zytoplasma von benachbarten Zellen direkt verbinden. Gap Junctions koordinieren die Zell- und Organfunktion in Gewebe und sind an der metabolischen Kooperation zwischen Zellen, der elektrischen Kupplung, der Synchronisation von zellulären physiologischen Aktivitäten, der Wachstumssteuerung und Entwicklungsregulierung beteiligt. Die Gap-Junction-Kanäle ermöglichen den interzellulären Austausch von Ionen, Nukleotiden und kleinen Molekülen zwischen benachbarten Zellen. Im Gegensatz zu anderen Membrankanälen überspannen interzelluläre Kanäle zwei gegenüberliegende Plasmamembranen und erfordern die Unterstützung von Halbkanälen, Connexone genannt, von beiden beteiligten Zellen. Diese Kanäle sind für Moleküle bis zu einer Größe von 1 kDa permeabel und kommen in den meisten Säugetierzelltypen vor. Zwei Connexone interagieren im extrazellulären Raum, um den vollständigen interzellulären Kanal zu bilden. Jedes Connexon besteht aus sechs ähnlichen oder identischen Proteinen, die Connexine genannt werden. Connexine (Cx) sind eine Multigen-Familie von sehr ähnlichen Proteinen mit Molekülmassen im Bereich von 26 bis 70 kDa. Bei Säugetieren wurde mindestens ein Dutzend verschiedener Connexingene identifiziert. Viele davon werden in unterschiedlichem Gewebe und zellspezifischen Mustern exprimiert. Bei Säugetieren wurden zwei verschiedene Linien identifiziert: Eine namens Klasse I oder β-Gruppe, zu der Cx26, Cx30, Cx31, Cx31.1 und Cx32 gehören, und die andere namens Klasse II oder α-Gruppe, zu der Cx33, Cx37, Cx40, Cx43 und Cx46 gehören.

Connexin-43 (Cx-43), ein 43-kDa-Protein, ist ein Mitglied der Connexin-Proteinfamilie, die eine Gap Junction bildet. Es wird von verschiedenen Zelltypen wie Astrozyten, Herz- und Glattmuskelzellen, Endothelzellen, Ependymzellen, Fibroblasten, Keratinozyten, Linsen- und Corneaepithelzellen exprimiert. Außerdem kommt das Protein in Leptomeningen, Leukozyten, Leydig-Zellen, Makrophagen, Myoepithelzellen der Brustdrüse, Osteozyten, Granulosazellen der Eierstöcke, pankreatischen β-Zellen, Vorimplantations-Blastozysten, Sertoli-Zellen, Schilddrüsenfollikelzellen und Trophoblast-Riesenzellen vor.

Das 43-kDa-Connexinprotein (Connexin-43, Cx43) ist ein Phosphoprotein, das in dem meisten Gewebe exprimiert wird, auch wenn das Expressionsmuster sich in verschiedenen Zelltypen unterscheiden kann (z. B. kommt es im Gehirn in Astrozyten, Ependymzellen und Leptomeningen, aber nicht in Neuronen, Oligodendrozyten und Pinealozyten vor; in der Leber kommt es in Ito-Zellen, aber nicht in Hepatozyten vor). Der Gap-Junction-Proteingehalt verändert sich als Reaktion auf eine Störung der Gewebearchitektur. Zum Beispiel gehen die frühen Stadien einer Atherosklerose mit einer erhöhten Expression von Cx43 einher.

Spezifität

Anti-Connexin-43-Antikörper reagiert spezifisch mit Connexin-43. Durch Immunblotting erfasst der Antikörper ein einzelnes Band oder 2 bis 3 Bänder im Bereich von 43 kDa. Die Färbung von Connexin-43-Bändern durch Immunblotting wird vom Connexin-43-Peptid spezifisch gehemmt. Eine Reaktivität mit Human-, Rinder-, Ratten-, Mäuse-, Hamster- und Huhn-Connexin-43 wurde beobachtet.

Immunogen

Synthetisches Peptid, das dem C-terminalen Segment der zytoplasmischen Domäne (Aminosäuren mit N-terminal hinzugefügtem Lysin) von Human-/Ratten-Connexin-43 entspricht.

Anwendung

Der Anti-Connexin-43-Antikörper kann für Immunblotting, Immunzytochemie und Immunhistochemie verwendet werden (gefrorenes und formalinfixiertes, paraffineingebettetes Gewebe). Polyklonale Antikörper, die spezifisch mit Cx43 reagieren, können bei verschiedenen zellulären und molekularen Ansätzen zur Untersuchung von Gap Junctions und ihren Eigenschaften angewandt werden.
Eine minimale Arbeitsverdünnung von 1:8.000 wird durch Immunblotting mit einem Gesamtextrakt aus Mäusehirn bestimmt.
Eine minimale Arbeitsverdünnung von 1:400 wird durch indirekte immunfluoreszierende Färbung von acetonfixierter, kultivierter Babyhamster-Niere (BHK) bestimmt.
Eine minimale Arbeitsverdünnung von 1:2.000 wird durch indirekte immunfluoreszierende Färbung von Rattenherz bestimmt. (Negativ für Rattenleberschnitte)
Eine minimale Arbeitsverdünnung von 1:2.000 wird durch indirekte Immunperoxidase-Färbung von trypsinverdautem, formalinfixiertem, paraffineingebettetem menschlichen oder tierischen Gewebe bestimmt.

Biochem./physiol. Wirkung

Connexin-43 (Cx-43) könnte eine wichtige Rolle bei der neuronalen Migration spielen, da es sich in den radialen Gliafasern befindet, die eng mit migrierenden Neuronen verbunden sind. Es ist auch am Transmembran-NAD⁺-Transport beteiligt. Connexin-43, das ein Teil der Gap Junction ist, ermöglicht die Zell-Zell-Kommunikation. Cx-43 leitet das [Ca²⁺]_i-Burst-Phänomen in Gebärmutterarterien-Epithelzellen ein. Während der frühen Stadien von koronarer Atherosklerose beim Menschen wurde eine erhöhte Expression von Cx-43 beobachtet. Eine Verringerung oder Veränderung der Menge oder Arten von Connexin, das in verschiedenen Zelltypen exprimiert wird, korreliert mit der Tumorprogression und -metastase. Jedoch weisen Gliomzellen, die mit dem Onkogen neu (c-erb-B2) transfiziert sind, eine starke Verringerung der interzellulären Kommunikation auf, ohne Verringerung der Gesamtexpression von Cx43. Während der Entwicklung und Laktation werden verschiedene Zustände der Ratten-Cx43-Phosphorylierung vorgefunden. Connexin-43-Mutationen treten bei Kindern auf, deren Herz sich nicht asymmetrisch entwickelt hat, und bei Mäusen, bei denen das Gen ausgeschaltet wird, treten tödliche Herzfehlbildungen auf. Polyklonale Antikörper, die spezifisch mit Cx438-11 reagieren, können bei verschiedenen zellulären und molekularen Ansätzen zur Untersuchung von Gap Junctions und ihren Eigenschaften angewandt werden, und um ihre Expressionsmuster in verschiedenen Zelltypen und Gewebe mit physiologischen Funktionen oder pathologischen Zuständen zu korrelieren.

Physikalische Form

Lösung in 0,01 M phosphatgepufferter Kochsalzlösung, pH-Wert 7,4, enthält 1 % Rinderserumalbumin und 15 mM Natriumazid.

Lagerung und Haltbarkeit

Für regelmäßige Verwendung bei 2 bis 8°C bis zu 1 Monat aufbewahren. Zur Langzeitlagerung in Arbeitsaliquoten einfrieren. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen wird nicht empfohlen. Eine Aufbewahrung in „frostfreien“ Gefrierschränken wird nicht empfohlen. Falls nach längerer Lagerung eine leichte Trübung eingetreten ist, die Lösung vor der Verwendung durch Zentrifugieren klären.

Haftungsausschluss

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• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
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