2GFRMKB

KAPA2G Fast ReadyMix

suitable for PCR, 2 ×, with dye

• Synonym(e): Mastermix, PCR
• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Verwendung: sufficient for 100 reactions; sufficient for 2000 reactions; sufficient for 500 reactions
• Haltbarkeit: ≤18 mo.
• Leistungsmerkmale: Fast PCR; dNTPs included; hotstart: no
• Verpackung: kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5101); kit of 25 mL (KK5103); kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5102)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Konzentration: 2 ×
• Methode(n): PCR: suitable
• Aufnahme: purified DNA
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die KAPA2G Fast DNA-Polymerase ist ein Enzym der zweiten Generation (2G), das speziell für eine erhöhte Prozessivität und Geschwindigkeit entwickelt wurde und im Vergleich zur Wildtyp-Taq-Polymerase wesentlich kürzere Extensionszeiten bietet. Neben der Schnelligkeit liefert KAPA2G Fast in einem breiten Spektrum von Zielen auch höhere Ausbeuten und bessere Sensitivität als Enzyme anderer Hersteller.
Die PCR-Kits KAPA2G Fast ReadyMix^™ wurden speziell für die Durchführung einer Fast-PCR entwickelt. Damit kann gegenüber herkömmlichen, mit Wildtyp-Taq-DNA-Polymerase durchgeführten PCR-Assays 20–70 % Reaktionszeit eingespart werden. Die Reaktionsleistung wird in keiner Weise beeinträchtigt und es werden keine speziellen PCR-Verbrauchsmaterialien oder Thermocycler benötigt.

Anwendung

KAPA2G Fast ReadyMix^™ wird verwendet in:

• Nested PCR (nPCR)
• Routine-PCR
• Fast-PCR
• Genotypisierungen

Biochem./physiol. Wirkung

Durch KAPA2G Fast DNA-Polymerase erzeugte DNA-Fragmente können für nachgelagerte Routineanalysen oder -anwendungen eingesetzt werden, wie u. a. beim Restriktionsenzymverdau sowie bei der Klonierung und Sequenzierung. Die Genauigkeit von KAPA2G Fast ist vergleichbar mit der von Wildtyp-Taq; die Fehlerquote liegt bei ca. 1 Fehler pro 1,7 x 10⁵ Nukleotiden. Wie das Wildtyp-Taq weist auch KAPA2G Fast eine 5→3′-Polymerase- und 5′→3′-Exonuklease-Aktivität, jedoch keine 3′→5′-Exonuklease-(Korrekturlese-)Aktivität auf.

Leistungsmerkmale und Vorteile

Reduziert die Durchlaufzeit um bis zu 75 %:

• Extensionszeiten von nur 1 s pro Kilobase
• Breite Erfassung von AT- und GC-reichen Targets

Hohe Geschwindigkeit, höhere Leistung:

• Einzelkopie-Sensitivität in komplexen Zielsequenzen
• Erhöhte Ausbeuten

Einige Anmerkungen:

• KAPA2G Fast ReadyMix-PCR-Kits enthalten die speziell für eine Fast-PCR entwickelten KAPA2G Fast DNA-Polymerasen.
• Bei einer Extensionszeit von 1 s für Amplikons <1 kb und 15 s/kb für längere Amplikons verkürzt sich die Gesamtreaktionszeit um 20–70 %.
• Es sind keine Spezialinstrumente oder PCR-Verbrauchsmaterialien erforderlich.
• Das optimierte Puffersystem erhöht die Ausbeute, Spezifität und Sensitivität und ermöglicht ein effizientes Primer-Annealing über einen weiten Bereich von Primer-Längen, GC-Gehalten und Schmelztemperaturen.
• Für eine hohe Reaktionseffizienz sollte das Reaktionsvolumen 25 μL nicht überschreiten.
• Der KAPA2G Fast ReadyMix enthält 1,5 mM MgCl₂ bei 1X. Im Lieferumfang des KAPA2G Fast ReadyMix sind zwei inerte Tracking-Farbstoffe enthalten, womit ein direktes Auftragen auf Agarosegele ermöglicht wird.
• Reaktionsprodukte haben 3′-dA-Enden und können in TA-Klonierungsvektoren geklont werden.

Qualität

Jede Charge der KAPA2G Fast DNA-Polymerase enthält nachweislich <2 % kontaminierendes Protein (Agilent-Protein-230-Assay). Der KAPA2G Fast ReadyMix wird strengen Qualitätskontrolltests unterzogen, ist frei von kontaminierender Exo- und Endonukleaseaktivität und erfüllt strenge Anforderungen in Bezug auf DNA-Kontamination.

Angaben zur Herstellung

Stellen Sie stets sicher, dass das Produkt vor der Verwendung vollständig aufgetaut und gut gemischt ist. Reagenzien können kurzzeitig (bis zu 1 Monat) bei 4 °C aufbewahrt werden. Die Langzeitaufbewahrung sollte bei -20 °C erfolgen. Sofern das ReadyMix-Kit sorgfältig gehandhabt und nicht kontaminiert wurde, ist keine Beeinträchtigung des Kits zu erwarten, wenn es (unbeabsichtigt) für kurze Zeit (bis zu 3 Tage) bei Raumtemperatur belassen wird. Eine langzeitige Lagerung bei Raumtemperatur und 4 °C wird nicht empfohlen. Hinweis: Reagenzien, die bei Temperaturen über -20 °C gelagert werden, sind bei einer Kontaminierung während der Verwendung viel anfälliger für eine Zersetzung. Die Lagerung bei den nicht empfohlenen Temperaturen erfolgt daher auf Risiko des Anwenders.

Sonstige Hinweise

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Rechtliche Hinweise

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Nur Kit-Komponenten

• KAPA2G Fast HotStart^® DNA Polymerase 0.5 U per 25 µL reaction
• MgCl₂ 1.5mM at 1X
• Stabilizers
• dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Warning
• H-Sätze: H371
• P-Sätze: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Gefahreneinstufungen: STOT SE 2
• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash