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Biotin-16-dUTP

• Synonym(e): Bio-16-dUTP Tetralithiumsalz, Biotin-markierte Uridine, 5-(N-[N-Biotinyl-ε-aminocaproyl-γ-aminobutyryl]-3-aminoallyl)-2′-Desoxyuridin-5′-triphosphat
• Empirische Formel (Hill-System): C₃₂H₅₂N₇O₁₈P₃S
• CAS-Nummer: 136632-31-0
• Molekulargewicht: 947.78
• UNSPSC-Code: 41116100

Eigenschaften

• Form: solution
• Qualitätsniveau: 100
• Verpackung: pkg of 50 μL (50 nmol; 1mM)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Farbe: colorless
• Löslichkeit: water: miscible
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Biotin ist ein wasserlösliches Vitamin, das als Coenzym für Carboxylasen wirkt.Biotin-16-dUTP wird zur Herstellung biotinylierter DNA-Sonden verwendet, die üblicherweise zum Nachweis spezifischer DNA- und RNA-Sequenzen in verschiedenen Methoden wie Southern und Northern Blotting, In-situ-Hybridisierung und Sandwich-Assays verwendet werden.

Anwendung

Anwendungsgebiete von Biotin-16-dUTP:

• Für die nicht-radioaktive DNA-Markierung mit Techniken wie Random Priming, PCR-Markierung oder Nick-Translation. Biotin-16-dUTP ersetzt dTTP in der DNA-Markierung mittels Random-Priming oder der Nick-Translation im Verhältnis 35 % Biotin-16-dUTP und 65 % dTTP sowie in der PCR.
• Als Substrat für terminale Transferase, DNA-Polymerase I (Holoenzym und Klenow-Fragment), Taq-DNA-Polymerase und Reverse Transkriptase (z. B. Transcriptor). Das Nukleotid dient auch als Substrat für terminale Transferase bei der 3′-End-Markierung
• Bei der Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH).

Biochem./physiol. Wirkung

Biotin beeinflusst die Genregulierung und die Chromatinstruktur durch Assoziation mit Lysinresten in Histonen. Es wirkt sich auf die Aktionen der erworbenen T-Zellen des Immunsystems und auf natürliche Killerzellen aus. Ein Biotinmangel in Mäusen ist Hinweis auf eine verstärkte Entzündung. Studien haben auch eine verstärkte Entzündungsreaktion humaner dendritischer Zellen bei Biotinmangel gezeigt.

Qualität

Typische Analyse: Mindestens 85 % Desoxynucleosid-Triphosphat (Biotin-16-dUTP) (HPLC, Fl.%).
Anmerkungen: Zur bequemeren Verarbeitung ist Biotin-dUTP auch in praktischen Markierungsmischungen (eine Lösung mit herkömmlichen dNTPs und Biotin-16-dUTP) sowie verfahrensspezifischen Mischungen (Nukleotide, Puffer und Enzyme in einer einzigen Flasche) erhältlich.

Hinweis zur Analyse

Absorption: Spektraldaten von Biotin-16-dUTP (bei pH 7,3):
Emax₂₄₁: E = 10,700;
Emax₂₉₂: E = 7,000;
Emax₂₆₅: E = 4,400;
A_292/265: 1,6.

Sonstige Hinweise

Biotin-markierte DNA kann folgendermaßen detektiert werden: Streptavidin-alkalische-Phosphatase-Konjugat und ein Chemilumineszenzsubstrat (CSPD, CDP-Star) oder ein Farbsubstrat-Biotin-Lumineszenz-Nachweiskit.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: nwg
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash