SCC161

Humane CF-Bronchialepithelzelllinie CFBE41o- 6.2 DeltaF508-CFTR

CFBE41o- 6.2 ΔF508-CFTR human CF bronchial epithelial cell line may be used to study the relationship between CFTR mRNA expression and Cl transport function.

• Synonym(e): CFBE41o, CF41o, CFBE
• UNSPSC-Code: 41106514
• eCl@ss: 32011203

Eigenschaften

• Biologische Quelle: human
• Methode(n): cell based assay: suitable; cell culture | mammalian: suitable
• Versandbedingung: ambient

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die Mukoviszidose (auch: zystische Fibrose, CF) ist eine letale autosomal-rezessive Erkrankung, die durch Mutationen im CFTR-Gen (CF Transmembrane Conductance Regulator) verursacht wird, das als cAMP-aktivierter und phosphoryliert-regulierter Cl-Kanal fungiert. Die vorherrschende Mutation im CFTR-Gen ist eine Trinukleotid-Deletion, die zum Verlust eines Phenylalanins bei den Aminosäuren 508 (ΔF508) im CFTR-Protein führt. Diese Mutation macht ca. 66 % aller CF-Allele aus .

Die humane CF-Bronchialepithelzelllinie CFBE41o- 6.2 WT-CFTR ist ein Subklon, der mit einem auf dem Epstein-Barr-Virus (EBV) basierenden episomalen pCEP4-β-Vektor von der Elektroporation der parentalen Zelllinie CFBE41o- abgeleitet wird, der die ΔF508-CFTR-cDNA in voller Länge von 6,1 kb und ein Hygromycin-B-Resistenzgen enthält . Die 6,2-kb-ΔF508-CFTR-cDNA enthält am ΔF508-Locus anstelle des natürlich vorkommenden CTT das Trinukleotid TTT und ermöglicht so die Differenzierung zwischen der endogenen ΔF508-CFTR- und der plasmidabgeleiteten ΔF508-CFTR-Expression. Die 6,2-kb-ΔF508-CFTR-cDNA enthält sowohl die 5’- als auch die 3’-UTR-Sequenzen, die bekanntermaßen die translationale Effizienz und mRNA-Stabilität beeinflussen. Die parentale CFBE41o- ist eine humane CF-Bronchialepithelzelllinie, die von einem CF-Patienten stammt, der homozygot für die ΔF508-CFTR-Mutation ist, und mit dem defekten SV40-Plasmid am Replikationsursprung (pSVori-) immortalisiert wurde .

Etablierte CF-Bronchialepithelzelllinien, die entweder durch Wildtyp- oder ΔF508-CFTR-mRNA ergänzt werden, werden dazu beitragen, Erkenntnisse über die Beziehung zwischen der transgen abgeleiteten CFTR-mRNA-Expression und der Rettung der cAMP-abhängigen Chlorid-Transportfunktion zu gewinnen.

Beschreibung der Zelllinie

Epithelzellen

Anwendung

Die humane CF-Bronchialepithelzelllinie CFBE41o- 6.2 ΔF508-CFTR kann zur Untersuchung der Beziehung zwischen der CFTR-mRNA-Expression und der Cl-Transportfunktion verwendet werden.

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Qualität

• Jedes Fläschchen enthält ≥1 x 10⁶ lebensfähige Zellen.
• Die Zellen wurden mittels PCR getestet und weisen ein negatives Ergebnis für HPV-16, HPV-18, Hepatitis A, C, und HIV-1 und 2 auf, was mit dem humanen Essential-CLEAR-Panel von Charles River Animal Diagnostic Services beurteilt wurde.
• Die Zellen weisen keine Mykoplasmen-Kontamination auf.
• Jede Zellcharge wird mittels STR-Analyse genotypisiert, um die eindeutige Identität der Zelllinie zu verifizieren.

Lagerung und Haltbarkeit

In Flüssigstickstoff aufbewahren. Die Zellen können nach dem ersten Auftauen für mindestens 10 Passagen kultiviert werden, ohne dass die Expression und Funktionalität der Zellmarker wesentlich beeinträchtigt wird.

Haftungsausschluss

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Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 6.2 - Infectious substances
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
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