MABT868

Anti-Acetyl-Alpha-Tubulin-Antikörper, Klon 6-11B-1

clone 6-11B-1, from mouse

• Synonym(e): Tubulin alpha-1 chain, acetyl-alpha tubulin
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: 6-11B-1, monoclonal
• Speziesreaktivität: sea urchin, bovine, monkey, Chlamydomonas, Drosophila, mouse, rat-kangaroo, human
• Methode(n): dot blot: suitable; electron microscopy: suitable; immunocytochemistry: suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG2bκ
• GenBank-Hinterlegungsnummer: AEI99579.1
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P18258
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: acetylation (Lys40)
• Angaben zum Gen: human ... TUBA1A(7846)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Mikrotubuli sind Zytoskelett-Filamente, die sich aus Alpha-/Beta-Tubulin-Heterodimeren zusammensetzen, die sich Kopf-an-Schwanz zu Protofilamenten und seitlich zu einer hohlen Röhre zusammenfügen. Verschiedene posttranslationale Modifikationen (PTMs), darunter Acetylierung, Polyglutamylierung, Polyglycylierung, Detyrosinierung, Phosphorylierung und Palmitoylierung, können die Polymerisationseigenschaften von Tubulinen und/oder ihre Interaktionen mit Mikrotubuli-assoziierten Proteinen (MAPs) und Motorproteinen regulieren. Es ist bekannt, dass eine Untergruppe der zytoplasmatischen Mikrotubuli und der Mikrotubuli in der Spindel, im Axon und in den Zilien Alpha-Tubulin enthält, das über die Epsilon-Aminogruppe von Lysin-40 (K40) acetyliert ist. Das Mitglied der GNAT-Lysin-Acetyltransferase-Familie MEC-17 (oder Alpha-Tubulin-Acetyltransferase/AlphaTAT) katalysiert die K40-Acetylierung, während HDAC6 und Sirtuin2 (SIRT2) bekanntlich die Tubulin-Deacetylierung katalysieren. Experimentelle Beweise deuten darauf hin, dass die K40-Acetylierung Alpha-Tubulin für weitere PTM(s) vorbereitet, was durch eine spätere Deaktivierung von K40ac nicht rückgängig gemacht werden kann. Das acetylierte und deacetylierte Alpha-Tubulin in nativen Mikrotubuli unterscheidet sich strukturell von dem nicht acetylierten Alpha-Tubulin (dessen K40 nie acetyliert ist).

Spezifität

Experimentelle Beweise deuten darauf hin, dass sich das acetyliertes und deacetyliertes α-Tubulin in nativen Mikrotubuli strukturell von nicht acetyliertem α-Tubulin unterscheidet, und dass Klon 6-11B-1 acetyliertes und deacetyliertes α-Tubulin erkennt, aber nicht nichtacetyliertes (niemals acetyliertes) α-Tubulin. Obwohl das 6-11B-1-Immunfärbemuster dem von Acetyl-Lys40-Antikörpern auf normalen zyklischen Zellen ähnelt, ist bei der Interpretation der Immunfärbeergebnisse mit diesem mAb auf Zellen, die durch exogene Deacetylase-Expression oder durch chemische Mittel an der Tubulin-Deacetylierung manipuliert wurden, Vorsicht geboten.

Immunogen

15 S-Dynein-Fraktion aus Seeigel-Spermienaxonem.

Anwendung

Dieser Anti-Acetyl-Alpha-Tubulin-Antikörper, Klon 6-11B-1, ist für die Verwendung in Western-Blot, Immunzytochemie, Dot-Blot und Elektronenmikroskopie für den Nachweis von Acetyl-Alpha-Tubulin validiert.

Forschungskategorie
Zellstruktur

Forschungsunterkategorie
Adhäsion (CAM)

Western-Blot-Analyse: Mit 4,0 µg/ml einer repräsentativen Charge wurde Acetyl-Alpha-Tubulin in 10 µg Hirngewebelysat von Mäusen nachgewiesen.
Immunhistochemische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde acetyliertes Alpha-Tubulin in kultivierten normalen humanen Nierenepithelzellen nachgewiesen (mit freundlicher Genehmigung von Dr. Christopher Ward, University of Kansas Medical Center).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde Alpha-Tubulin in Seeigel-Spermienaxonem-Lysaten nachgewiesen, nicht aber in Lysaten von Taxol-stabilisierten Mikrotubuli aus Seeigel-Eiern (Piperno, G., und Fuller, M. (1985). J Cell Biol.101(6):2085-2094).
Dot-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde Alpha-Tubulin sowohl in den mit dem ionischen Reinigungsmittel Sarkosyl löslichen als auch in den unlöslichen Fraktionen von Seeigel-Spermienaxonemextrakten nachgewiesen (Piperno, G., und Fuller, M. (1985). J Cell Biol.101(6):2085-2094).
Immunzytochemische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde acetyliertes und deacetyliertes, aber nicht nichtacetyliertes Alpha-Tubulin in COS-7-Fibroblasten der Niere grüner Meerkatzen und Ptk2-Nieren-Epithelzellen von Rattenkängurus durch Fluoreszenz-Immunzytochemie nachgewiesen (Soppina V., et al. (2012). PLoS One. 7(10):e48204).
Elektronenmikroskopische Analyse: Das Fab-Fragment von Klon 6-11B-1 färbt nachweislich Taxol-stabilisierte Mikrotubuli, die in vitro aus aufgereinigtem Rinderhirntubulin mit oder ohne SIRT2-katalysierte Deacetylierung polymerisiert wurden (Soppina V., et al. (2012). PLoS One. 7(10):e48204).

Qualität

Beurteilt mittels Western Blot in HeLa-Zelllysat.

Western-Blot-Analyse: Mit 4,0 µg/ml dieses Antikörpers wurde Acetyl-Alpha-Tubulin in 10 µg HeLa-Zelllysat nachgewiesen.

Zielbeschreibung

~ 50 kDa gemessen

Physikalische Form

Aufgereinigter monoklonaler Maus-IgG2bκ-Antikörper in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2–8 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Rechtliche Hinweise

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