MABS1267

Anti-Kernporenkomplex-Protein-Antikörper, Klon 414

clone 414, from mouse

• Synonym(e): Nuclear pore glycoprotein p62, 62 kDa nucleoporin, Nucleoporin Nup62, Nuclear pore complex proteins
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41
• Klon: 414, monoclonal
• application: EM; ICC; IP; WB
• Speziesreaktivität: yeast, mouse, rat, human
• Methode(n): electron microscopy: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• citations: 1

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: 414, monoclonal
• Speziesreaktivität: yeast, mouse, rat, human
• Methode(n): electron microscopy: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG1κ
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_075586
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P17955
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... NUP62(23636)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das Kernporen-Glykoprotein p62 (UniProt: P17955; auch bezeichnet als 62-kDa-Nukleoporin, Nukleoporin Nup62) wird bei der Ratte vom Gen Nup62 (Gen-ID: 65274) kodiert. Der Kernporenkomplex (NPC) dient als Schleuse für den Transport zwischen Zellkern und Zytoplasma. Lösliche Transportprotein-Komplexe navigieren durch die Pore. Hierzu binden Sie an Proteine mit Phenylalanin-Glycin(FG)-Repeats, die sich an den Kanalwänden befinden. Der Nup62-Komplex befindet sich in der Mitte des NPCs und enthält die FG-Repeat-Proteine Nup62, Nup54 und Nup58, die jeweils über konservierte Coiled-Coil-Segmente in einem stöchiometrischen Verhältnis von 1:1:1 miteinander assoziiert sind. Die Kernhülle wird in der Prometaphase abgebaut. Die zerlegten Nukleoporin-Teilkomplexe fungieren als kritische Regulatoren verschiedener mitotischer Ereignisse, um eine korrekte Chromosomentrennung zu gewährleisten. Nup62 ist Berichten zufolge spezifisch an Zentrosomen/Spindelpolen lokalisiert, wo es sich mit den zentrosomalen Proteinen Gamma-Tubulin und hSAS-6 zusammenlagert. Nup62 ist an der Rekrutierung kritischer Proteine an das Zentrosom beteiligt und seine Abreicherung führt zu einer Fehllokalisierung verschiedener Zentrosomenkomponenten.

Spezifität

Mit Klon 414 wurde eine Immunfärbung des Zellkernrands von Leberzellen der Ratte sowie der Kernhülle von Hefezellen durchgeführt (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067; Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699-709).

Immunogen

Mit Triton X-100 behandelte Leber-Zellkerne der Ratte.

Anwendung

Der Anti-Kernporenkomplex-Protein-Antikörper (Klon 414) ist ein Antikörper gegen Kernporenkomplex-Proteine für die Verwendung in Immunzytochemie, Immunpräzipitation, Western Blotting und Elektronenmikroskopie.

Forschungskategorie
Signalgebung

Forschungsunterkategorie
Chromatin-Biologie

Immunzytochemische Analyse: Mit einer 1:200-Verdünnung einer repräsentativen Charge wurde eine Immunfärbung des Zellkernrands von NIH/3T3-Zellen durchgeführt.
Immunzytochemische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunfärbung der Kernhülle von Hefezellen mit einem punktförmigen und einem fleckigen Muster durchgeführt (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067).
Immunzytochemische Analyse: Mit repräsentativen Chargen wurde ein punktförmiges Nup62-Färbemuster am Zellkernrand mittels Fluoreszenz-Immunzytochemie unter Verwendung von in 2 % Formaldehyd fixierten, methanolpermeabilisierten Leberzellen der Buffalo-Ratte (BRL) nachgewiesen (Davis, L.I. und Blobel, G. (1987). Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 84(21):7552–755; Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699–709).
Elektronenmikroskopie: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunfärbung der Kernhülle von Hefezellen mittels 3 % Paraformaldehyd-/0,2 % Glutaraldehyd-fixierten LR-White-Schnitten von Hefe-Zellkernen durchgeführt (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067).
Elektronenmikroskopie: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunfärbung der Porenkomplexe in Dünnschnitten isolierter Leber-Zellkerne der Ratte (extrahiert mit 2 % Triton X-100 und fixiert mit 0,05 % Glutaraldehyd) durchgeführt (Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699–709).
Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunpräzipitation von einer ~100 kDa (p110) und einer ~95 kDa (p95) schweren Proteinspezies aus Hefe-Zellkernextrakt durchgeführt. Außerdem wurde mit Klon 414 eine Immunpräzipitation eines ~55 kDa schweren Proteins unter Verwendung einer zytosolischen Hefefraktion oder eines Ganzzelllysats durchgeführt (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067).
Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunpräzipitation von drei wichtigen GlcNAcylierten Protein-Spezies (62, 175 und 270 kDa) aus SDS-solubilisiertem Porenkomplex-Lamina-Extrakt eines Zellkern-Präparats von Leber der Buffalo-Ratte (BRL), das mittels Galactosyltransferase mit UDP-[3H]Gal markiert wurde, durchgeführt (Davis, L.I. und Blobel, G. (1987). Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 84(21):7552–755).
Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunpräzipitation von einem GlcNAcylierten 62-kDa-Protein (p62) aus SDS-solubilisiertem Porenkomplex-Lamina-Extrakt sowie von einer schwächer glykosylierten zytoplasmatischen p61-Form aus dem postmitochondrialen Überstand von Leberzellen der Buffalo-Ratte (BRL) durchgeführt (7552–755; Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699–709).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden eine immunreaktive Bande von ~100 kDa (p110) und eine immunreaktive Bande von ~95 kDa (p95) in Hefe-Kernextrakt nachgewiesen (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden selbst nach sequenzieller Behandlung mit Nukleasen, Triton X-100 und 140 mM NaCl eine Zielbande von ~62 kDa (p62) und eine Zielbande von ~200 kDa nachgewiesen, die mit der Kernporenkomplex-Lamina von Zellkernen der Rattenleber assoziiert werden (Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699-709).

Qualität

Beurteilt mittels Immunzytochemie in HeLa-Zellen.

Immunzytochemische Analyse: Mit einer 1:200-Verdünnung dieses Antikörpers wurde eine Immunfärbung des Zellkernrands von HeLa-Zellen durchgeführt.

Zielbeschreibung

53,40 kDa (Nup62 der Ratte) berechnet. ~62/175/270 kDa (Leber-Zellkernextrakt der Ratte) und ~95/100 kDa (Hefe-Zellkernextrakt) gemessen (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067; Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699-709). In manchen Lysaten können nichtcharakterisierte Banden auftreten.

Physikalische Form

Aufgereinigter monoklonaler Maus-IgG1κ-Antikörper in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mmol/l NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2–8 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Haftungsausschluss

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