MABF957

Anti-CLEC-2-Antikörper, Klon AYP1

clone AYP1, from mouse

• Synonym(e): C-type lectin domain family 1 member B, C-type lectin-like receptor 2, CLEC-2
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.43

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: AYP1, monoclonal
• Speziesreaktivität: human
• Methode(n): flow cytometry: suitable
• Isotyp: IgG1κ
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_057593
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q9P126
• Versandbedingung: ambient
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... CLEC1B(51266)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

C-Typ-Lektin Domänenfamilie 1 Mitglied B (UniProt Q9P126; auch bekannt als C-Typ-Lektin-ähnlicher Rezeptor 2, CLEC-2) wird durch das Gen CLEC1B (auch bekannt als CLEC2, UNQ721/PRO1384) (Gen-ID 51266) beim Menschen kodiert. CLEC-2 ist ein Typ-II-Einzel-Transmembranprotein (AS 34–54) mit einer großen extrazellulären (AS 55–229) Region, die eine C-Typ-Lektin-Domäne (AS 109–217) und ein kurzes N-terminales zytoplasmisches Ende (AS 1–33) mit einem einzigen Hem-Immunrezeptor-Tyrosin-basierten Aktivierungsmotiv (hemITAM; AS 7–10) enthält. Die Expression von CLEC-2 ist auf Thrombozyten beschränkt, wo es über sein hemITAM-Motiv die Aktivierung der Thrombozyten vermittelt, was zur proteolytischen Spaltung von zwei anderen Thrombozyten-ITAM-Rezeptoren, Glykoprotein (GP) VI und Fc RIIa, aber nicht von CLEC-2 selbst führt. CLEC-2 fungiert als Rezeptor für das Typ-I-Transmembran-GP Podoplanin, das außerhalb des Gefäßsystems weit verbreitet ist, einschließlich lymphatischer Endothelzellen, Typ-1-Lungenalveolarzellen, Lymphknoten-Stromazellen, des Aderhautplexusepithels, entzündlicher Makrophagen sowie einer Untergruppe aktivierter T-Helfer(Th)17-Zellen. Patienten mit rheumatoider Arthritis weisen erhöhte Plasmaspiegel von CLEC-2-positiven Mikropartikeln auf. Diese Mikropartikel stammen von aktivierten Thrombozyten und sind negativ für GPVI, während Mikropartikel in gesunden Spendern überwiegend von Megakaryozyten stammen und sowohl für CLEC-2 als auch für GPVI positiv sind. Die Thrombozyten-spezifische Deletion von CLEC-2 oder eines seiner nachgeschalteten Signalproteine, Syk, SLP-76 oder PLC 2, führt bei Mäusen zu einer Reihe von Entwicklungsproblemen, einschließlich einer Blut-Lymph-Vermischung in der Mitte der Schwangerschaft.

Spezifität

Klon AYP1 zielt auf ein extrazelluläres Epitop ab, das in beiden gespleißten Isoformen des humanen CLEC-2/CLEC1B vorkommt und von UniProt (Q9P126) gemeldet wird.

Immunogen

His-markiertes rekombinantes extrazelluläres humanes CLEC-2-Fragment.

Anwendung

Dieser monoklonale Maus-Anti-CLEC-2-Antikörper, Klon AYP1, Best.- N. MABF957, wurde zur Verwendung in der Durchflusszytometrie, in Funktionsassays und in der Immunpräzipitation für den Nachweis von CLEC-2 validiert.

Durchflusszytometrie-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Doxycyclin-abhängige Expressionsinduktion von exogen transfiziertem CLEC-2/CLEC1B unter Verwendung von T-REx 293 Zellen nachgewiesen (Gitz, E., et al. (2014). Blood. 124(14): 2262-2270.).

Durchflusszytometrische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge (vorkonjugiert mit Alexa Fluor^™ 488) wurde die CLEC-2/CLEC1B-Expression auf der Oberfläche von Thrombozyten und CD41-positiven Mikropartikeln in Thrombozyten-reichem Plasma (PRP) nachgewiesen, nicht aber auf Monozyten, Neutrophilen, dendritischen Zellen, B- oder T-Zellen (Gitz, E., et al. (2014). Blood. 124(14):2262-2270).

Funktionsassay: Das Fab-Fragment des Klons AYP1 (2,5 µg/mL), quervernetzt mit Anti-Maus-Fab-spezifischen F(ab)2-Fragmenten, aber nicht AYP1-Fab oder Anti-Maus-F(ab)2 allein, induzierte die P-Selektin-Expression an der Oberfläche und die Aggregation gewaschener humaner Thrombozyten (Gitz, E., et al. (2014). Blood. 124(14): 2262-2270).

Analyse mittels Immunpräzipitation: Mit einer repräsentativen Charge wurde CLEC-2/CLEC1B aus humanen Thrombozytenlysaten immunpräzipitiert. Die Stimulation mit Rhodocytin vor der Zelllyse und IP induzierte die Tyrosinphosphorylierung von CLEC-2/CLEC1B (Gitz, E., et al. (2014). Blood. 124(14):2262–2270).

Qualität

Beurteilt mittels Durchflusszytometrie in humanen Thrombozyten.

Durchflusszytometrie-Analyse: Mit 0,2 µl dieses Antikörpers wurde CLEC-2/CLEC1B auf der Oberfläche humaner Thrombozyten nachgewiesen.

Zielbeschreibung

26,60 kDa (Isoform 1) und 23,10 kDa (Isoform 2). ~32/40 kDa Doublette, die auf eine unterschiedliche Glykosylierung zurückzuführen ist (Gitz, E., et al. (2014). Blood. 124(14):2262–2270).

Physikalische Form

Format: Aufgereinigt

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Rechtliche Hinweise

ALEXA FLUOR is a trademark of Life Technologies

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable