MAB377

Anti-NeuN-Antikörper, Klon A60

clone A60, Chemicon^®, from mouse

• Synonym(e): Neuron-Specific Nuclear Protein, Neuna60, A60
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: A60, monoclonal
• Speziesreaktivität: avian, pig, chicken, human, rat, salamander, ferret, mouse
• Hersteller/Markenname: Chemicon^®
• Methode(n): flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG1
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... RBFOX3(146713) ; mouse ... Rbfox3(52897) ; rat ... Rbfox3(287847)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Der NeuN-Antikörper (NEUronale Nuklei; Klon A60) erkennt spezifisch das DNA-bindende, neuronenspezifische Protein NeuN, das in den meisten ZNS- und PNS-neuronalen Zelltypen aller getesteten Wirbeltiere vorkommt. NeuN-Proteinverteilungen sind anscheinend auf neuronale Zellkerne, Perikarya und einige proximale neuronale Prozesse im fötalen und adulten Gehirn beschränkt, obwohl einige Neuronen von NeuN in allen Altersgruppen nicht erkannt werden: INL Netzhautzellen, Cajal-Retzius-Zellen, Purkinje-Zellen, Neuronen der unteren Olive und Nucleus-dentatus-Neuronen und sympathische Ganglienzellen sind Beispiele (Mullen et al., 1992; Wolf et al., 1996). Immunhistochemisch nachweisbares NeuN-Protein erscheint zunächst an Entwicklungszeitpunkten, die mit dem Rückzug des Neurons aus dem Zellzyklus und/oder mit der Einleitung der terminalen Differenzierung des Neurons übereinstimmen (Mullen et al., 1992). Immunreaktivität erscheint um E9.5 in Neuralrohr der Maus und ist extensiv über das sich entwickelnde Nervensystem E12.5 hinweg vorhanden. Eine starke Kernfärbung deutet auf eine nuklearregulatorische Proteinfunktion hin; derzeit liegen jedoch keine Belege dafür vor, ob das NeuN-Protein-Antigen eine Funktion im distalen Zytoplasma hat oder ob es dort lediglich synthetisiert wird, bevor es zurück in den Zellkern transportiert wird. Zwischen Protein, das aus gereinigten Kernen isoliert wurde, und Protein aus Ganzhirnextrakt auf Immunblots wurde kein Unterschied gefunden (Mullen et al., 1992).

Spezifität

Millipores exklusiver monoklonaler Antikörper gegen das neuronenspezifische Kernprotein, das als NeuN (oder Neuronale Nuklei) bezeichnet wird, reagiert mit den meisten neuronalen Zelltypen im gesamten Nervensystem von Mäusen, einschließlich Kleinhirn, Großhirnrinde, Hippocampus, Thalamus, Rückenmark und Neuronen im peripheren Nervensystem, einschließlich Spinalganglien, vegetative Ganglien und enterische Ganglien. Entwicklungsbezogen ist Immunreaktivität zuerst zu beobachten, nachdem die Neuronen postmitotisch geworden sind. In proliferativen Zonen ist keine Anfärbung zu beobachten. Die immunhistochemische Anfärbung ist vorwiegend im Zellkern der Neuronen lokalisiert mit leichterer Färbung im Zytoplasma. Einige Zelltypen reagieren nicht mit MAB377, einschließlich Purkinje-, Mitral- und Photorezeptorzellen. Der Antikörper ist ein ausgezeichneter Marker für Neuronen in Primärkulturen und in Retinsäure-stimulierten P19-Zellen. Der Antikörper ist auch hilfreich zur Identifizierung von Neuronen in Transplantaten.

Immunogen

Gereinigte Zellkerne aus dem Maus-Gehirn

Anwendung

Der Anti-NeuN-Antikörper, Klon A60, detektiert NeuN und wurde publiziert und zur Verwendung in FC, IC, IF, IH, IH(P), IP und WB validiert.

Forschungs-Unterkategorie
Neuronen- & Glia-Marker

Forschungskategorie
Neurowissenschaft

Western-Blot-Analyse:
Eine frühere Charge dieses Antikörpers erkannte 2-3 Banden im 46-48 kDa-Bereich und möglicherweise eine weitere Bande bei etwa 66 kDa.

Immunzytochemie:
Es wurde eine 1:10-1:100-Verdünnung einer früheren Charge verwendet. Neuronen in Kultur sollten mit 0,1 % Triton X-100 permeabilisiert werden. Alle primären Antikörperverdünnungen sollten mit einfachen Lösungen angefertigt werden, die nur Puffer und primäre Antikörper ohne überschüssige Proteinblocker oder Detergenzien enthalten.

Immunhistochemie:
1:100-1:1000. Der Antikörper funktioniert am besten auf Polyesterwachsschnitten, jedoch auch auf Paraffinschnitten bei einer niedrigeren Arbeitsverdünnung. Der Antikörper funktioniert gut mit Formaldehyd-basierten Fixiermitteln. Citronensäure- und Mikrowellen-Vorbehandlungen wurden erfolgreich eingesetzt (Sarnat, 1998).

Immunhistochemische (Paraffin) Analyse: Eine frühere Charge wurde für die IH(P) verwendet.

Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endbenutzer bestimmt werden.

Qualität

Regelmäßig mittels Immunhistochemie an Hirngewebe beurteilt.

Immunhistochemische (Paraffin) Analyse:
NeuN (Best.- Nr. MAB377) Färbemuster/Morphologie in Rattenkleinhirn. Gewebe vorbehandelt mit Citrat, pH 6,0. Diese Antikörper-Charge wurde 1:100 mit IHC-Select Detektionsreagenz mit HRP-DAB verdünnt. Die Immunreaktion zeigt sich als Kernfärbung in den Neuronen der Körnerschicht. Beachten Sie bitte, dass im Kern von Purkinje-Zellen kein Signal detektiert wird.
Optimale Färbung mit Citratpuffer, pH 6,0, Epitop-Rückgewinnung: Rattenkleinhirn

Zielbeschreibung

46/48 kDa

Physikalische Form

Aufgereinigtes Maus-Immunglobulin IgG1, flüssig in Puffer mit 0,02 M Phosphatpuffer, 0,25 M NaCl, pH 7,6 und 0,1% Natriumazid.

Aufgereinigtes Protein A

Format: Aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2-8 ºC 6 Monate ab Empfangsdatum haltbar.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Positivkontrolle - Hirngewebe. Negativkontrolle - Jedes nicht-neuronale Gewebe, wie z.B. Fibroblasten

Sonstige Hinweise

Gewinner des CiteAb Award 2024 in der Kategorie „Supplier Succeeding in Parkinson′s Research“ (Erfolgreiche Anbieter in der Parkinson-Forschung)

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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