AB5830

Anti-8-Hydroxydesoxyguanosin-Antikörper

serum, Chemicon^®

• Synonym(e): 8-OHdG, 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: goat
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: serum
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: polyclonal
• Speziesreaktivität: human
• Hersteller/Markenname: Chemicon^®
• Methode(n): ELISA: suitable; immunohistochemistry: suitable (paraffin)
• Versandbedingung: dry ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

8-Hydroxydesoxyguanosin (8OHdG) ist eine modifizierte Base, die beim Angriff von Hydroxylradikalen auf die DNA entsteht; diese werden als Neben- und Zwischenprodukte des aeroben Stoffwechsels und bei oxidativem Stress gebildet. Es liegen zunehmend Beweise vor, die die Annahme einer Beteiligung freiradikalischer Reaktionen an der Schädigung von Biomolekülen stützen, welche letztendlich beim Menschen verschiedene Erkrankungen verursacht, zum Beispiel Atherosklerose, ischämische Reperfusionsschäden in Gehirn und Herz, Krebs, rheumatoide Arthritis, Entzündungen, Diabetes, Alterung und neurodegenerative Krankheiten wie etwa Morbus Alzheimer.

8OHdG gewinnt zunehmend an Beliebtheit als empfindlicher, stabiler und integraler Marker einer oxidativen Schädigung von zellulärer DNA. Ein Biomonitoring beim Menschen zeigt, dass 8OHdG im Urin ausgeschieden werden kann und dass der Kontakt mit Tabakrauch sowie ionisierender Strahlung eine signifikante Erhöhung verursachen. Da die Korrelation von 8OHdG mit oxidativem Stress und DNA-Schäden, welche wiederum zu degenerativen Erkrankungen führen, so gut belegt ist, hat die Entwicklung eines Antikörpers, der zur Untersuchung von DNA-Schäden verwendet werden kann, zahlreiche Anwendungen. Dieser Antikörper kann nicht nur für die direkte Erforschung von DNA-Schäden in Zellen genutzt werden, sondern hat auch Anwendungen in der Entwicklung von Immunassays, die die Ausscheidung von 8OHdG im Urin überwachen und als Biomarker von oxidativem Stress dienen. Industrielle Anwendungsgebiete könnten auch bei Herstellern von Nahrungsergänzungsmitteln vorliegen; diese könnten von einem Immunassay profitieren, mit dem sie die Wirksamkeit von Antioxidantien und anderen Nutrazeutika testen können.

Das neue Ziegen-Antiserum gegen 8-Hydroxyguanosin von CHEMICON ist nun erhältlich. Mittels ELISA wurde nachgewiesen, dass dieses Antiserum vollständig kreuzreaktiv mit 8-Hydroxydesoxyguanosin ist, jedoch nicht mit anderen natürlich vorkommenden Nukleotiden kreuzreagiert. Dieser Antikörper sollte ein wertvolles Hilfsmittel sein, um die Rolle von freiradikalischen Schädigungen für eine Reihe von menschlichen Erkrankungszuständen zu erforschen.

Spezifität

Reagiert mit 8-Hydroxydesoxyguanosin (8-OHdG) und 8-Hydroxyguanosin (8-OHG). In einem kompetitiven ELISA war der Antikörper zu 100 % gehemmt durch die Nukleotide 8-Hydroxydesoxyguanosin und 8-Hydroxyguanosin. Eine partielle Kreuzreaktivität wurde beobachtet mit 8-Mercaptoguanosin (80 %), während 8-Bromoguanosin wenig Kreuzreaktivität zeigte (5 %). 2-Desoxyadenosin, 7-Methlyguanosin, Guanosin-Monophosphat und Guanosin zeigten keine Reaktivität.

Immunogen

8-Hydroxy-2′-desoxyguanosin und 8-Hydroxyguanosin.

Anwendung

Dieser Anti-8-Hydroxydesoxyguanosin-Antikörper ist für die Verwendung in ELISA und IH(P) für den Nachweis von 8-Hydroxydesoxyguanosin validiert.

Immunhistochemie: >1:200 an paraffineingebettetem, formalinfixiertem menschlichem Gehirn. Es wird empfohlen, die Gewebe vor dem Färben 40 Minuten lang bei 37 °C mit 10 μg/ml Proteinase K vorzubehandeln.

Entwachste Schnitte behandelt mit 3 % H2O2 in Methanol für eine Dauer von 30 Minuten, Blockierung mit 10 % NGS in TBS. Die Schnitte wurden vor der Blockierung 40 Minuten lang bei 37 C mit 10 ug/ml Proteinase K in PBS (pH 7,4) behandelt. Der Nachweis erfolgte mittels DAB. Da der Antikörper eine Nukleinsäure färbt, ist es wichtig, ausreichend Proteinase zu verwenden, um die Histon-Barriere zu durchdringen.
Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Haut, Färbung ist auf den Zellkern beschränkt.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable