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KOD Xtreme Heißstart-DNA-Polymerase

Ultra high fidelity dnapolymerase designed for the most challenging PCR applications including: crude sample PCR, amplification of long strand and highly GC-rich DNA templates.

• Synonym(e): High fidelity master mix, Hot start PCR, Hot start master mix
• UNSPSC-Code: 41105500
• NACRES: NA.85

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for 200 reactions
• Leistungsmerkmale: Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR; High Fidelity PCR; dNTPs included; hotstart
• Hersteller/Markenname: Novagen^®
• Lagerbedingungen: OK to freeze
• Methode(n): PCR: suitable
• Aufnahme: crude DNA
• Eignung: suitable for PCR
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

*Hergestellt von Toyobo und vertrieben durch EMD Millipore. In Japan nicht von der Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland erhältlich.

Hinweis: Der Kauf dieses Produkts schließt eine Immunität gegen eine Klage unter den in der Produktbeilage angegebenen Patenten ein, wonach nur die erworbene Menge für die internen Forschungszwecke des Käufers verwendet werden darf. Es werden keine anderen Patentrechte (wie z. B. 5′-Nukleaseprozess-Patentrechte) übertragen, weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung. Weitere Informationen über den Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

Die PCR beinhaltet die Replikation einer DNA-Matrize durch eine thermostabile DNA-Polymerase. Die Prozessivität, Spezifität und Wiedergabetreue des verwendeten Polymerase-Enzyms können die Effizienz, Reproduzierbarkeit und Ausbeute der PCR-Reaktion beeinflussen. Bei der High-Fidelity-PCR wird eine DNA-Polymerase mit einer geringen Fehlerrate eingesetzt und somit ein hoher Genauigkeitsgrad der Replikation der Ziel-DNA erreicht. Die Wiedergabetreue ist entscheidend, wenn die genaue Sequenz-Amplifikation des Zielgens notwendig ist, beispielsweise bei direkter Sequenzierung oder Klonierung zur Downstream-Proteinexpression. Untersuchungen können durch unerwünschte Mutationen gravierend beeinträchtigt werden. Unsere Analyse hat gezeigt, dass KOD-Enzyme eine gute Wahl für eine schnelle und genaue PCR mit hoher Ausbeute sind. Unsere Molekularbiologen arbeiten an der Entwicklung und Formulierung von Polymerasen mit der höchsten Spezifität, Wiedergabetreue und Ausbeute bei der PCR-Amplifikation. Des Weiteren bieten optimierte Pufferzusammensetzungen sowie praktische Master-Mixe und Zyklierungsparameter zusätzliche Anwenderfreundlichkeit und Datenreproduzierbarkeit.
Das KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL> Hot Start DNA-Polymerase*-Kit ist ein optimiertes PCR-Enzym für die Amplifikation langer oder GC-reicher DNA-Matrizen, einschließlich Mausschwanzspitzen, Pflanzengeweben und synthetischer biologischer Anwendungen. Die einzigartige Formulierung ermöglicht die direkte Amplifikation minimal verarbeiteter Proben und somit eine hocheffiziente PCR-Zielamplifikation von Rohproben. Zusammen mit einem speziell formulierten 2X-Puffer beinhaltet das System eine Hochpräzisions-KOD-DNA-Polymerase, die mit zwei monoklonalen Antikörpern komplexiert ist, um ein Heißstart-Thermocycling zu ermöglichen. Die KOD Xtreme Heißstart-DNA-Polymerase amplifiziert genomische und Phagen-/Plasmid-DNA-Zielsequenzen bis zu 24 bzw. 40 kbp schnell und präzise. Die KOD Xtreme Heißstart-DNA-Polymerase amplifiziert erfolgreich schwierige DNA-Matrizen mit bis zu 90 % GC-Gehalt. Jedes Kit enthält 200 U KOD Xtreme Heißstart-DNA-Polymerase, einen optimierten Puffer und dNTPs, die für 200 Amplifikationsreaktionen ausreichen. Die Polymerase erzeugt stumpfendige DNA-Produkte, die für das Klonen mit den Kits Novagen Perfectly Blunt<TMSYMBOL></TMSYMBOL> und LIC Vector geeignet sind.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Optimiert für die höchste PCR-Erfolgsrate, selbst bei den schwierigsten Targets.
• 10X höhere Genauigkeit als Taq-Mischungen
• Effiziente Amplifikation von DNA-Templates mit bis zu 90 % GC-Gehalt
• Amplifiziert genomische Zielsequenzen bis zu 24 kbp
• Amplifiziert Phagen-/Lambda-Zielsequenzen bis zu 40 kbp
• Verhindert Mispriming und die Bildung von Primer-Dimeren
• Benutzerfreundliche Vorbereitung bei Umgebungstemperatur, kompatibel mit Automatisierungslösungen

Komponenten

• 1 × 200 U KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL> Heißstart-DNA-Polymerase
• 3 × 1,7 mL 2X Xtreme-Puffer
• 2 × 1 mL dNTPs (je 2 mM)

Warnhinweis

Toxizität: Reizstoff (B)

Einheitendefinition

Eine Einheit ist definiert als die Enzymmenge, die die Umsetzung von 10 nmol dNTP in eine in Säure unlösliche Form in 30 Minuten bei 75°C, in einer Reaktion, die 20 mM Tris-HCl (pH-Wert 7,5 bei 25°C), 8 mM MgCl₂, 7,5 mM DTT, 50 µg/ml BSA, jeweils 150 µM dATP, dCTP, dGTP, dTTP (eine Mischung aus unmarkiertem und [³H]dTTP) und 150 µg/ml aktivierte Kalbsthymus-DNA enthält, katalysiert.

Rechtliche Hinweise

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids